MEPHISTO（鉄過剰を伴うメタボリックシンドロームにおけるマクロファージ表現型） (MEPHISTO)

MEPHISTO は、病態生理学的、横断的、症例対照、単一施設研究です (大学病院、クレルモン フェラン、フランス)。 この研究の一部として介入（薬物または栄養）は実施されておらず、参加者は除外期間の対象ではありません。 私たちの目的は、単球/マクロファージ分極に対する鉄過剰の影響と、心血管危険因子との関係を調査することです。

60 の被験者を 20 人の参加者から成る 3 つのグループに分けて研究します。

• 代謝異常性肝シデローシスの被験者で構成されるグループDIOS
• 鉄過剰症のないメタボリックシンドロームの被験者で構成されるグループM
• やせた被験者で構成される T 群 DIOS グループの参加者は、二次性高フェリチン血症がなく、肝臓 MRI によって肝臓の鉄過剰が証明された、最近 DIO と診断された患者の中から選択されました。

内科でグループＤＩＯＳの募集を行った。 グループMおよびDIOSの被験者は、臨床調査センター（CIC-501、クレルモンフェラン）のボランティアのファイルから来ています。 グループ M の被験者とグループ DIOS は、年齢、性別 (+/- 5 kg/m²)、および BMI によって一致します。 グループ T からグループ DIOS の被験者は、年齢と性別によって一致します。 参加者に直接的な利益は期待されないため、参加者は 50 ユーロの一括補償を受け取ります。

各参加者は、臨床検査と血液サンプルを含む 1 時間の診察のみを受けます。

メタボリック シンドロームの臨床パラメーター (ウエスト サイズ、BMI、血圧) と除外要因 (感染症、腫瘍形成、抗炎症薬) の探索に焦点を当てています。 炎症や酸化ストレスに影響を与える可能性があるため、喫煙と同様にこれらの要因は除外されました。

血液サンプルは、以下を実行するために使用されます。

• 従来の臨床検査 (血球数、網状赤血球、ASAT、ALAT、LDH、脂質プロファイル、血糖、インスリン血症、TSH、ビタミン D、フェリチン、トランスフェリン飽和、CRP)、
• ELISAによる特定の投与量（IL-6、TNFα、ヘプシジン）、
• FACS（蛍光活性化セルソーティング）による単球表現型（CD14、CD16、CD163、MR）、
• リアルタイム PCR による培養後の単球およびマクロファージからの遺伝子発現の測定。

私たちの主な分析は、単球の代替マクロファージ (M2) への ex vivo 極性化と表現型の特徴付けに焦点を当てています。 IL-4 を含む (M2 マクロファージを誘導する) または IL-4 を含まない (常在マクロファージを誘導する) 単球を培養する前と後に、分極の表現型マーカー (MR、CD200R、F13A1、CD163、AMAC1、TGFb)、炎症マーカーの発現を測定します。 (TNFα、MCP-1、IL-6)、酸化ストレスマーカー (HO-1)、および鉄代謝のマーカー (フェロポーチン、フェリチン、ヘプシジン)。 定量的 PCR マイクロ流体カード (TLDA、Taqman 低密度アレイ) を使用して、単球およびタイプ M2 マクロファージの遺伝子発現を測定します。 この手法により、24 の遺伝子の発現をスクリーニングできます。 異なるフェーズが必要です: RNA 抽出 (RNeasy キット、Qiagen)、逆転写 (RT-PCR キット、HighCap cDNA RT キット、Applied Biosystems)、増幅 (TaqMan Fast Advanced Master Mix、Applied Biosystems)、そして最後に遺伝子の研究式 (GeneEx 用 MFC TaqMan アレイ、フォーマット 24、Applied Biosystems)。 私たちの主な結果は、MR、CD200R、F13A1、CD163、AMAC1、TGFbの発現によって証明されるM2マクロファージの分極能力です。 臨床検査からのデータに対する鉄過剰の影響を評価すること、標準的な生物学および単球遺伝子発現の結果は、私たちの二次的な結果です。