サイトスポンジを使用した好酸球性食道炎の診断とモニタリング

研究デザインの概要 (すべての目的) これは前向きコホート研究であり、患者登録は UNC および Mayo Clinic で実施され、サンプル分析はケンブリッジ大学によって実施されます。 目的 1 では、EoE の患者が登録され、Cytosponge と内視鏡検査の両方から組織が取得され、食道の好酸球数を定量化するための Cytosponge の精度を決定するために、単一の時点で方法が比較されます。 すべての患者について、安全性を監視し、被験者は Cytosponge の受容性に関する調査を完了します (目的 2)。

サイトスポンジ プロトコル:

研究が説明され、患者がインフォームド コンセントを提供した後、Cytosponge は内視鏡検査の前に、医師の監督下で訓練を受けた研究スタッフによって投与されます。 被験者が局所麻酔を受けることを選択した場合、Cytosponge の投与前に 2% リドカインうがい薬が提供されます。 Cytosponge は、使用説明書に従って投与されます。 回収後、糸を切り、スポンジ（組織標本を含む）を容器に入れ、固定液に浸し、4°Cの冷蔵庫に保存します。 次に、固定液を遠心分離機で回転させ、ペレット化した細胞を標準的な技術を使用してパラフィンブロックに包埋します。

上部内視鏡検査および生検：

Cytosponge が除去された後、臨床的に必要とされるように、患者は標準治療 (通常の治療) の上部内視鏡検査および生検を受けます。 この試験中、研究スタッフは、リング、溝、白いプラーク、血管分布の減少、狭窄など、EoE のすべての内視鏡的特徴を記録します。 内視鏡所見の重症度は、最近検証された内視鏡参照スコア（EREFS）スコアリングシステムを使用して測定されます。 ４つの食道生検は、遠位（胃食道接合部から５ｃｍ上）および近位（胃食道接合部から１５ｃｍ上）食道の両方から採取される。 この数の生検は、EoE の診断感度を最大化することが示されています。

組織学および好酸球数:

Cytosponge および内視鏡検査からのすべての組織サンプルは、被験者の識別番号でコード化されますが、それ以外の場合は、EoE 活動、症状、患者の特徴、および処方された治療を含むすべての臨床データについてマスクされます。 パラフィン ブロックを使用して、病理スライドをカットし、組織を通常の H&E 染色で処理します。 次に、スライドをデジタル化し、Aperio ImageScope (Aperio Technologies、Vista、CA) を使用して、以前に検証されたプロトコルを使用して最大好酸球密度 (好酸球/mm2 [eos/mm2]) を決定します。 以前の研究と比較する目的で、好酸球密度は、文献で報告されている平均視野のサイズである 0.24 mm2 と想定される hpf サイズの好酸球数 (eos/hpf) に変換されます。 UNC と Mayo Clinic の研究病理学者がそれぞれのサイトからの標本をレビューし、Cambridge の研究病理学がすべての標本の 2 回目のレビューを提供して、可能な限り最も正確な好酸球数の定量化を保証します。

さらに、研究者は、この検査の診断精度を向上させることができるかどうかを判断することを目的として、既存の生検およびスポンジ サンプルの特別な染色および分析を実行することを計画しています。 特に研究者は、無傷の好酸球を明確に識別する顆粒タンパク質である好酸球ペルオキシダーゼ (EPX) や、脱顆粒を示唆する細胞外 EPX 沈着など、好酸球の機能、活性化、および炎症のマーカーを調べます。 これは、免疫組織化学で検出できます。 これは、現在コード化された標本を持っている私たちの現在の協力者と一緒にメイヨークリニックで行われます.

安全性とアクセシビリティの評価:

EoE におけるサイトスポンジの安全性を判断するために、患者は複数の時点で評価されます。 研究者は、スポンジカプセルが飲み込まれた直後、および膨張したスポンジが取り除かれた直後に、症状またはイベントを評価します. 参加者は、有害事象を評価するために、内視鏡検査の 1 日後および 7 日後に連絡を受けます。 目的 2 の場合、参加者は 7 日間のフォローアップ ポイントで受容性調査を実施されるため、患者は両方の組織採取アプローチの経験を振り返る十分な時間を持てます。 特に、この調査では、患者が Cytosponge を飲み込んだ経験、もう一度飲み込むかどうか、EoE の診断とモニタリングに Cytosponge または内視鏡検査を好むかどうかを記録します。