Diagnose en monitoring van eosinofiele oesofagitis met behulp van de cytospons

Overzicht studieontwerp (alle doelen) Dit wordt een prospectieve cohortstudie, waarbij patiënten worden ingeschreven bij UNC en Mayo Clinic met steekproefanalyse uitgevoerd door de Universiteit van Cambridge. In Aim 1 zullen patiënten met EoE worden ingeschreven, weefsel zal worden verkregen van zowel de Cytosponge als de endoscopie, en de methoden zullen worden vergeleken voor een enkel tijdstip om de nauwkeurigheid van Cytosponge te bepalen voor het kwantificeren van het aantal eosinofielen in de slokdarm. Voor alle patiënten zal de veiligheid worden gecontroleerd en de proefpersonen zullen een enquête invullen over de aanvaardbaarheid van Cytosponge (doel 2).

Cytospons-protocol:

Nadat de studie is uitgelegd en een patiënt geïnformeerde toestemming geeft, zal de Cytosponge voorafgaand aan endoscopie worden toegediend door getraind onderzoekspersoneel onder toezicht van een arts. Als proefpersonen ervoor kiezen om plaatselijk verdoofd te worden, krijgen ze voorafgaand aan toediening van de Cytosponge een gorgeldrank met 2% lidocaïne. De Cytospons wordt toegediend volgens de gebruiksaanwijzing. Na het terughalen wordt de draad doorgesneden en wordt de spons (die het weefselmonster bevat) in een houder geplaatst, ondergedompeld in fixeermiddel en in een koelkast bij 4°C bewaard. Het fixeermiddel wordt vervolgens in een centrifuge gedraaid en de gepelleteerde cellen worden ingebed in een paraffineblok met behulp van standaardtechnieken.

Bovenste endoscopie en biopsie:

Nadat de Cytosponge is verwijderd, ondergaat de patiënt standaardzorg (routinematige zorg) endoscopie van het bovenste deel en biopsie, zoals klinisch geïndiceerd. Tijdens dit onderzoek zal het onderzoekspersoneel alle endoscopische kenmerken van EoE registreren, inclusief ringen, groeven, witte plaques, verminderde vasculariteit en vernauwingen. De ernst van de endoscopiebevindingen zal worden gemeten met behulp van het recent gevalideerde endoscopische referentiescore (EREFS) scoresysteem. Er zullen vier slokdarmbiopten worden genomen, zowel van de distale (5 cm boven de gastro-oesofageale overgang) als de proximale (15 cm boven de gastro-oesofageale overgang) slokdarm. Van dit aantal biopsieën is aangetoond dat het de diagnostische gevoeligheid voor EoE maximaliseert.

Histologie en aantal eosinofielen:

Alle weefselmonsters van de Cytosponge en endoscopie worden gecodeerd met het identificatienummer van een patiënt, maar worden anders gemaskeerd voor alle klinische gegevens, inclusief EoE-activiteit, symptomen, patiëntkenmerken en voorgeschreven behandelingen. Met behulp van de paraffineblokken worden pathologie-objectglaasjes gesneden en het weefsel behandeld met routinematige H&E-kleuring. De dia's worden vervolgens gedigitaliseerd en met behulp van de Aperio ImageScope (Aperio Technologies, Vista, CA) wordt de maximale eosinofielendichtheid (eosinofielen/mm2 [eos/mm2]) bepaald met behulp van ons eerder gevalideerde protocol. Ter vergelijking met eerdere studies zal de eosinofielendichtheid vervolgens worden omgezet in eosinofielentellingen (eos/hpf) voor een veronderstelde hpf-grootte van 0,24 mm2, de grootte van een gemiddeld veld zoals gerapporteerd in de literatuur. De studiepathologen van UNC en Mayo Clinic zullen de specimens van hun sites beoordelen, en de studiepathologie van Cambridge zal een tweede beoordeling van alle specimens geven om de meest nauwkeurige kwantificering van het aantal eosinofielen mogelijk te maken.

Bovendien zijn onderzoekers van plan om speciale kleuring en analyse van de bestaande biopsie- en sponsmonsters uit te voeren met als doel te bepalen of de diagnostische nauwkeurigheid van deze test kan worden verbeterd. Onderzoekers zullen met name markers van eosinofielenfunctie, activering en ontsteking onderzoeken, zoals eosinofielperoxidase (EPX), een granule-eiwit dat duidelijk intacte eosinofielen identificeert, evenals extracellulaire EPX-afzetting die wijst op degranulatie. Dit kan worden gedetecteerd met immunohistochemie. Dit zou worden gedaan in de Mayo-kliniek met onze huidige medewerkers die momenteel de gecodeerde exemplaren hebben.

Veiligheids- en toegankelijkheidsbeoordelingen:

Patiënten zullen op meerdere punten worden beoordeeld om de veiligheid van de Cytosponge in EoE te bepalen. Onderzoekers zullen eventuele symptomen of gebeurtenissen beoordelen zodra de sponscapsule is ingeslikt, evenals onmiddellijk nadat de geëxpandeerde spons is verwijderd. Deelnemers worden 1 en 7 dagen na de endoscopie gecontacteerd om te beoordelen op bijwerkingen. Voor doelstelling 2 krijgen de deelnemers de acceptatie-enquête op het 7-daagse follow-uppunt, zodat patiënten voldoende tijd hebben om na te denken over hun ervaringen met beide benaderingen van weefselverzameling. Dit onderzoek zal met name de ervaring van de patiënt met het inslikken van de Cytosponge registreren, of ze het nog een keer zouden doen, en of ze de voorkeur geven aan de Cytosponge of endoscopie voor diagnose en monitoring van EoE.