Diagnose og overvåking av eosinofil øsofagitt ved bruk av cytosvamp

Oversikt over studiedesign (alle mål) Dette vil være en prospektiv kohortstudie, med pasientregistrering utført ved UNC og Mayo Clinic med prøveanalyse utført av University of Cambridge. I mål 1 vil pasienter med EoE bli registrert, vev vil bli hentet fra både Cytosvamp og endoskopi, og metodene vil bli sammenlignet for et enkelt tidspunkt for å bestemme nøyaktigheten av Cytosponge for å kvantifisere esophageal eosinofil teller. For alle pasienter vil sikkerheten bli overvåket og forsøkspersonene vil fullføre en undersøkelse om akseptabiliteten av Cytosponge (Mål 2).

Cytosvamp-protokoll:

Etter at studien er forklart og en pasient gir informert samtykke, vil Cytosvampen bli administrert før endoskopi av opplært forskningspersonell under tilsyn av lege. Hvis forsøkspersoner velger å motta lokalbedøvelse, vil de få en 2 % lidokaingurgle før administrering av cytosvampen. Cytosvampen vil bli administrert i henhold til dens bruksanvisning. Etter uthenting kuttes strengen og svampen (som inneholder vevsprøven) plasseres i en beholder, senkes i fikseringsmiddel og oppbevares i kjøleskap ved 4°C. Fiksativet blir deretter sentrifugert i en sentrifuge, og de pelleterte cellene blir innebygd i en parafinblokk ved bruk av standardteknikker.

Øvre endoskopi og biopsi:

Etter at Cytosvampen er fjernet, vil pasienten gjennomgå standardbehandling (rutinebehandling) øvre endoskopi og biopsi, som klinisk indisert. Under denne eksamenen vil forskningspersonell registrere alle endoskopiske trekk ved EoE, inkludert ringer, furer, hvite plakk, redusert vaskularitet og strikturer. Alvorlighetsgraden av endoskopifunnene vil bli målt ved å bruke det nylig validerte endoskopiske referanseskåresystemet (EREFS). Fire esophageal biopsier vil bli tatt både fra den distale (5 cm over gastro-esophageal junction) og proksimale (15 cm over gastro-esophageal junction) esophagus. Dette antallet biopsier har vist seg å maksimere den diagnostiske sensitiviteten for EoE.

Histologi og eosinofiltall:

Alle vevsprøver fra Cytosvampen og endoskopi vil bli kodet med et forsøkspersons identifikasjonsnummer, men vil ellers være maskert for alle kliniske data, inkludert EoE-aktivitet, symptomer, pasientkarakteristikker og foreskrevet behandling. Ved å bruke parafinblokkene vil patologiglass kuttes og vevet behandles med rutinemessig H&E-farging. Lysbildene vil deretter bli digitalisert, og ved å bruke Aperio ImageScope (Aperio Technologies, Vista, CA), vil den maksimale eosinofiltettheten (eosinofiler/mm2 [eos/mm2]) bli bestemt ved å bruke vår tidligere validerte protokoll. For å sammenligne med tidligere studier, vil eosinofiltetthet deretter bli konvertert til eosinofiltall (eos/hpf) for en antatt hpf-størrelse på 0,24 mm2, størrelsen på et gjennomsnittlig felt som rapportert i litteraturen. Studiepatologene fra UNC og Mayo Clinic vil gjennomgå prøvene fra stedene deres, og studiepatologien fra Cambridge vil gi en ny gjennomgang av alle prøvene for å sikre en mest mulig nøyaktig kvantifisering av eosinofiltall.

I tillegg planlegger etterforskerne å utføre spesiell farging og analyse av eksisterende biopsi- og svampprøver med mål om å avgjøre om den diagnostiske nøyaktigheten til denne testen kan forbedres. Spesielt vil etterforskere undersøke markører for eosinofil funksjon, aktivering og betennelse, slik som eosinofil peroksidase (EPX), et granulatprotein som tydelig identifiserer intakte eosinofiler, samt ekstracellulær EPX-avsetning som tyder på degranulering. Dette kan påvises med immunhistokjemi. Dette vil bli gjort på Mayo-klinikken med våre nåværende samarbeidspartnere som for øyeblikket har de kodede prøvene.

Sikkerhets- og tilgjengelighetsvurderinger:

Pasienter vil bli vurdert på flere punkter for å bestemme sikkerheten til Cytosvampen i EoE. Etterforskere vil vurdere for eventuelle symptomer eller hendelser så snart svampkapselen er svelget, samt umiddelbart etter at den utvidede svampen er fjernet. Deltakerne vil bli kontaktet 1 og 7 dager etter endoskopien for å vurdere for uønskede hendelser. For mål 2 vil deltakerne bli administrert akseptabilitetsundersøkelsen ved 7 dagers oppfølgingspunkt, slik at pasientene har tilstrekkelig tid til å reflektere over sine erfaringer med begge vevsinnsamlingsmetodene. Spesielt vil denne undersøkelsen registrere pasientens erfaring med å svelge Cytosvampen, om de vil gjøre det igjen, og om de foretrekker Cytosvampen eller endoskopi for diagnose og overvåking av EoE.