Diagnose og overvågning af eosinofil esophagitis ved hjælp af cytosvampen

Oversigt over undersøgelsesdesign (alle formål) Dette vil være et prospektivt kohortestudie, med patientindskrivning udført på UNC og Mayo Clinic med prøveanalyse udført af University of Cambridge. I mål 1 vil patienter med EoE blive indskrevet, væv vil blive opnået fra både Cytosvampen og endoskopi, og metoderne vil blive sammenlignet for et enkelt tidspunkt for at bestemme nøjagtigheden af ​​Cytosponge til kvantificering af esophageal eosinofiltal. For alle patienter vil sikkerheden blive overvåget, og forsøgspersonerne vil gennemføre en undersøgelse om acceptabiliteten af ​​Cytosvamp (Mål 2).

Cytosvamp protokol:

Efter at undersøgelsen er blevet forklaret, og en patient har givet informeret samtykke, vil Cytosvampen blive administreret før endoskopi af uddannet forskningspersonale under læges supervision. Hvis forsøgspersoner vælger at modtage en lokalbedøvelse, vil de blive forsynet med en 2% lidokain-gurgle før administration af Cytosvampen. Cytosvampen vil blive administreret i henhold til dens brugsanvisning. Efter udtagning afskæres strengen, og svampen (som indeholder vævsprøven) anbringes i en beholder, nedsænkes i fikseringsmiddel og opbevares i køleskab ved 4°C. Fikseringsmidlet centrifugeres derefter i en centrifuge, og de pelleterede celler indlejres i en paraffinblok under anvendelse af standardteknikker.

Øvre endoskopi og biopsi:

Efter at Cytosvampen er blevet fjernet, vil patienten gennemgå standardbehandling (rutinepleje) øvre endoskopi og biopsi som klinisk indiceret. Under denne eksamen vil forskningspersonalet registrere alle endoskopiske træk ved EoE, herunder ringe, furer, hvide plaques, nedsat vaskularitet og forsnævringer. Sværhedsgraden af ​​endoskopiresultaterne vil blive målt ved hjælp af det nyligt validerede endoskopiske referencescore (EREFS)-scoresystem. Fire esophageal biopsier vil blive taget både fra den distale (5 cm over den gastro-esophageal junction) og den proksimale (15 cm over den gastro-esophageal junction) esophagus. Dette antal biopsier har vist sig at maksimere den diagnostiske følsomhed for EoE.

Histologi og eosinofiltal:

Alle vævsprøver fra Cytosvampen og endoskopi vil blive kodet med et forsøgspersons identifikationsnummer, men vil ellers være maskeret for alle kliniske data, inklusive EoE-aktivitet, symptomer, patientkarakteristika og ordinerede behandlinger. Ved hjælp af paraffinblokkene skæres patologiske objektglas, og vævet behandles med rutinemæssig H&E-farvning. Sliderne vil derefter blive digitaliseret, og ved hjælp af Aperio ImageScope (Aperio Technologies, Vista, CA), vil den maksimale eosinofildensitet (eosinofiler/mm2 [eos/mm2]) blive bestemt ved hjælp af vores tidligere validerede protokol. Til sammenligning med tidligere undersøgelser vil eosinofildensiteten derefter blive konverteret til eosinofiltal (eos/hpf) for en antaget hpf-størrelse på 0,24 mm2, størrelsen af ​​et gennemsnitligt felt som rapporteret i litteraturen. Undersøgelsespatologerne fra UNC og Mayo Clinic vil gennemgå prøverne fra deres lokaliteter, og undersøgelsespatologien fra Cambridge vil give en anden gennemgang af alle prøver for at sikre den mest nøjagtige kvantificering af eosinofiltal muligt.

Derudover planlægger efterforskerne at udføre speciel farvning og analyse af de eksisterende biopsi- og svampeprøver med det formål at afgøre, om den diagnostiske nøjagtighed af denne test kan forbedres. Især vil efterforskere undersøge markører for eosinofil funktion, aktivering og inflammation, såsom eosinofil peroxidase (EPX), et granulatprotein, der tydeligt identificerer intakte eosinofiler, såvel som ekstracellulær EPX-aflejring, der tyder på degranulering. Dette kan påvises med immunhistokemi. Dette ville blive gjort på Mayo-klinikken med vores nuværende samarbejdspartnere, som i øjeblikket har de kodede prøver.

Sikkerheds- og tilgængelighedsvurderinger:

Patienter vil blive vurderet på flere punkter for at bestemme sikkerheden af ​​Cytosvampen i EoE. Efterforskere vil vurdere for eventuelle symptomer eller hændelser, så snart svampekapslen er slugt, såvel som umiddelbart efter at den udvidede svamp er fjernet. Deltagerne vil blive kontaktet 1 og 7 dage efter endoskopien for at vurdere for bivirkninger. For mål 2 vil deltagerne blive administreret acceptabilitetsundersøgelsen ved 7-dages opfølgningspunktet, så patienterne har tilstrækkelig tid til at reflektere over deres erfaringer med begge vævsopsamlingsmetoder. Denne undersøgelse vil især registrere patientens erfaring med at sluge Cytosvampen, om de ville gøre det igen, og om de foretrækker Cytosvampen eller endoskopi til diagnose og monitorering af EoE.