Diagnostic et surveillance de l'œsophagite à éosinophiles à l'aide de la cytosponge

Aperçu de la conception de l'étude (tous les objectifs) Il s'agira d'une étude de cohorte prospective, avec un recrutement de patients effectué à l'UNC et à la clinique Mayo avec une analyse d'échantillon effectuée par l'Université de Cambridge. Dans l'objectif 1, les patients atteints d'EoE seront recrutés, les tissus seront obtenus à la fois du Cytosponge et de l'endoscopie, et les méthodes seront comparées pour un seul point dans le temps afin de déterminer l'exactitude du Cytosponge pour quantifier le nombre d'éosinophiles œsophagiens. Pour tous les patients, la sécurité sera surveillée et les sujets rempliront une enquête sur l'acceptabilité de Cytosponge (Objectif 2).

Protocole Cytoéponge :

Une fois que l'étude a été expliquée et qu'un patient a donné son consentement éclairé, le Cytosponge sera administré avant l'endoscopie par un personnel de recherche qualifié sous la supervision d'un médecin. Si les sujets choisissent de recevoir une anesthésie locale, ils recevront un gargarisme de lidocaïne à 2 % avant l'administration de la Cytosponge. Le Cytosponge sera administré conformément à son mode d'emploi. Après récupération, la ficelle est coupée et l'éponge (qui contient l'échantillon de tissu) est placée dans un récipient, immergée dans un fixateur et conservée au réfrigérateur à 4°C. Le fixateur est ensuite centrifugé dans une centrifugeuse et les cellules culottées sont incorporées dans un bloc de paraffine en utilisant des techniques standard.

Endoscopie haute et biopsie :

Après le retrait de la Cytosponge, le patient subira une endoscopie supérieure et une biopsie standard (soins de routine), selon les indications cliniques. Au cours de cet examen, le personnel de recherche enregistrera toutes les caractéristiques endoscopiques de l'EoE, y compris les anneaux, les sillons, les plaques blanches, la diminution de la vascularisation et les rétrécissements. La gravité des résultats de l'endoscopie sera mesurée à l'aide du système de notation du score de référence endoscopique récemment validé (EREFS). Quatre biopsies œsophagiennes seront prélevées à la fois de l'œsophage distal (5 cm au-dessus de la jonction gastro-œsophagienne) et proximal (15 cm au-dessus de la jonction gastro-œsophagienne). Il a été démontré que ce nombre de biopsies maximise la sensibilité diagnostique de l'EoE.

Histologie et numération des éosinophiles :

Tous les échantillons de tissus de la cytosponge et de l'endoscopie seront codés avec le numéro d'identification du sujet, mais seront autrement masqués pour toutes les données cliniques, y compris l'activité EoE, les symptômes, les caractéristiques du patient et les traitements prescrits. À l'aide des blocs de paraffine, les lames de pathologie seront coupées et les tissus traités avec une coloration H&E de routine. Les diapositives seront ensuite numérisées et à l'aide de l'Aperio ImageScope (Aperio Technologies, Vista, CA), la densité maximale d'éosinophiles (éosinophiles/mm2 [eos/mm2]) sera déterminée à l'aide de notre protocole précédemment validé. Aux fins de comparaison avec les études précédentes, la densité d'éosinophiles sera ensuite convertie en nombre d'éosinophiles (eos/hpf) pour une taille de hpf supposée de 0,24 mm2, la taille d'un champ moyen tel que rapporté dans la littérature. Les pathologistes de l'étude de l'UNC et de la clinique Mayo examineront les échantillons de leurs sites, et la pathologie de l'étude de Cambridge fournira un deuxième examen de tous les échantillons pour assurer la quantification la plus précise possible du nombre d'éosinophiles.

En outre, les enquêteurs prévoient d'effectuer une coloration et une analyse spéciales des échantillons de biopsie et d'éponge existants dans le but de déterminer si la précision diagnostique de ce test peut être améliorée. En particulier, les chercheurs examineront les marqueurs de la fonction, de l'activation et de l'inflammation des éosinophiles, tels que la peroxydase des éosinophiles (EPX), une protéine granulaire qui identifie clairement les éosinophiles intacts, ainsi que le dépôt extracellulaire d'EPX suggérant une dégranulation. Cela peut être détecté par immunohistochimie. Cela se ferait à la clinique Mayo avec nos collaborateurs actuels qui ont actuellement les échantillons codés.

Évaluations de la sécurité et de l'accessibilité :

Les patients seront évalués à plusieurs points pour déterminer la sécurité du Cytosponge dans l'EoE. Les enquêteurs évalueront tout symptôme ou événement dès que la capsule d'éponge est avalée, ainsi qu'immédiatement après le retrait de l'éponge expansée. Les participants seront contactés 1 et 7 jours après l'endoscopie pour évaluer les événements indésirables. Pour l'objectif 2, les participants recevront l'enquête d'acceptabilité au point de suivi de 7 jours, afin que les patients aient suffisamment de temps pour réfléchir à leurs expériences avec les deux approches de collecte de tissus. En particulier, cette enquête enregistrera l'expérience du patient avec la déglutition de la Cytosponge, s'il recommencerait et s'il préfère la Cytosponge ou l'endoscopie pour le diagnostic et le suivi de l'EoE.