Diagnos och övervakning av eosinofil esofagit med hjälp av cytosvampen

Översikt över studiedesign (alla syften) Detta kommer att vara en prospektiv kohortstudie, med patientinskrivning utförd vid UNC och Mayo Clinic med provanalys utförd av University of Cambridge. I mål 1 kommer patienter med EoE att registreras, vävnad kommer att erhållas från både Cytosvampen och endoskopi, och metoderna kommer att jämföras under en enda tidpunkt för att bestämma exaktheten av Cytosvamp för att kvantifiera antalet eosinofiler i matstrupen. För alla patienter kommer säkerheten att övervakas och försökspersonerna kommer att fylla i en undersökning om acceptansen av Cytosvamp (Mål 2).

Cytosvamp-protokoll:

Efter att studien har förklarats och en patient ger informerat samtycke, kommer Cytosvampen att administreras före endoskopi av utbildad forskarpersonal under läkares övervakning. Om försökspersoner väljer att få lokalbedövning, kommer de att förses med en 2 % lidokaingurgel före administrering av Cytosvampen. Cytosvampen kommer att administreras enligt dess bruksanvisning. Efter hämtning skärs snöret och svampen (som innehåller vävnadsprovet) placeras i en behållare, nedsänks i fixativ och förvaras i kylskåp vid 4°C. Fixeringsmedlet snurras sedan i en centrifug och de pelleterade cellerna bäddas in i ett paraffinblock med användning av standardtekniker.

Övre endoskopi och biopsi:

Efter att Cytosvampen har tagits bort kommer patienten att genomgå standardvård (rutinvård) övre endoskopi och biopsi, enligt klinisk indikation. Under denna undersökning kommer forskarpersonal att registrera alla endoskopiska egenskaper hos EoE, inklusive ringar, fåror, vita plack, minskad vaskularitet och förträngningar. Svårighetsgraden av endoskopifynd kommer att mätas med det nyligen validerade endoskopiska referenspoängsystemet (EREFS). Fyra esofagusbiopsier kommer att tas både från den distala (5 cm ovanför gastro-esofagusövergången) och den proximala (15 cm ovanför gastro-esofagealövergången) matstrupen. Detta antal biopsier har visat sig maximera den diagnostiska känsligheten för EoE.

Histologi och antal eosinofiler:

Alla vävnadsprover från Cytosvampen och endoskopi kommer att kodas med en patients identifikationsnummer, men kommer annars att maskeras för alla kliniska data, inklusive EoE-aktivitet, symtom, patientegenskaper och ordinerade behandlingar. Med hjälp av paraffinblocken skärs patologiska objektglas och vävnaden bearbetas med rutinmässig H&E-färgning. Objektglasen kommer sedan att digitaliseras, och med hjälp av Aperio ImageScope (Aperio Technologies, Vista, CA), kommer den maximala eosinofildensiteten (eosinofiler/mm2 [eos/mm2]) att bestämmas med vårt tidigare validerade protokoll. I syfte att jämföra med tidigare studier kommer eosinofildensiteten sedan att omvandlas till eosinofilantal (eos/hpf) för en antagen hpf-storlek på 0,24 mm2, storleken på ett medelfält som rapporterats i litteraturen. Studiepatologerna från UNC och Mayo Clinic kommer att granska proverna från sina platser, och studiepatologin från Cambridge kommer att tillhandahålla en andra granskning av alla prover för att säkerställa den mest exakta kvantifieringen av antalet eosinofiler som möjligt.

Dessutom planerar utredarna att utföra speciell färgning och analys av befintliga biopsi- och svampprover med målet att avgöra om den diagnostiska noggrannheten för detta test kan förbättras. I synnerhet kommer utredarna att undersöka markörer för eosinofil funktion, aktivering och inflammation, såsom eosinofil peroxidas (EPX), ett granulprotein som tydligt identifierar intakta eosinofiler, såväl som extracellulär EPX-avsättning som tyder på degranulering. Detta kan detekteras med immunhistokemi. Detta skulle göras på Mayo-kliniken med våra nuvarande medarbetare som för närvarande har de kodade proverna.

Säkerhets- och tillgänglighetsbedömningar:

Patienterna kommer att utvärderas vid flera punkter för att fastställa säkerheten för Cytosvampen i EoE. Utredarna kommer att bedöma för eventuella symtom eller händelser så snart svampkapseln sväljs, såväl som omedelbart efter att den expanderade svampen har tagits bort. Deltagarna kommer att kontaktas 1 och 7 dagar efter endoskopin för att bedöma för biverkningar. För mål 2 kommer deltagarna att administreras godtagbarhetsundersökningen vid 7 dagars uppföljningspunkt, så att patienterna har tillräckligt med tid att reflektera över sina erfarenheter med båda metoderna för vävnadsinsamling. I synnerhet kommer denna undersökning att registrera patientens erfarenhet av att svälja Cytosvampen, om de skulle göra det igen och om de föredrar Cytosvampen eller endoskopi för diagnos och övervakning av EoE.