使用细胞海绵诊断和监测嗜酸粒细胞性食管炎

研究设计概述（所有目标） 这将是一项前瞻性队列研究，患者入组在 UNC 和 Mayo Clinic 进行，样本分析由剑桥大学进行。 在目标 1 中，将招募患有 EoE 的患者，从细胞海绵和内窥镜检查中获取组织，并将在单个时间点比较这些方法，以确定细胞海绵用于量化食管嗜酸性粒细胞计数的准确性。 对于所有患者，安全性将受到监控，受试者将完成有关 Cytosponge 可接受性的调查（目标 2）。

细胞海绵协议：

在对研究进行解释并且患者提供知情同意后，Cytosponge 将在医师监督下由训练有素的研究人员在内窥镜检查之前进行管理。 如果受试者选择接受局部麻醉，那么他们将在使用 Cytosponge 之前使用 2% 的利多卡因漱口液。 Cytosponge 将根据其使用说明进行管理。 取回后，将绳子剪断，将海绵（含有组织标本）放入容器中，浸入固定液中，并保存在 4°C 的冰箱中。 然后将固定剂在离心机中旋转，然后使用标准技术将沉淀的细胞包埋在石蜡块中。

上消化道内窥镜检查和活组织检查：

取出细胞海绵后，患者将根据临床指示接受标准护理（常规护理）上消化道内窥镜检查和活检。 在此检查期间，研究人员将记录 EoE 的所有内窥镜特征，包括环、皱纹、白色斑块、血管分布减少和狭窄。 内窥镜检查结果的严重程度将使用最近验证的内窥镜参考评分 (EREFS) 评分系统来衡量。 将从远端（胃食管交界处上方 5 厘米）和近端（胃食管交界处上方 15 厘米）食道进行四次食管活检。 这种活检数量已被证明可以最大限度地提高 EoE 的诊断灵敏度。

组织学和嗜酸性粒细胞计数：

来自 Cytosponge 和内窥镜检查的所有组织样本都将使用受试者的识别号进行编码，但将掩盖所有临床数据，包括 EoE 活动、症状、患者特征和规定的治疗方法。 使用石蜡块，病理切片将被切割并用常规 H&E 染色处理组织。 然后将幻灯片数字化，并使用 Aperio ImageScope（Aperio Technologies，Vista，CA），最大嗜酸性粒细胞密度（嗜酸性粒细胞/mm2 [eos/mm2]）将使用我们之前验证的协议来确定。 为了与之前的研究进行比较，然后将嗜酸性粒细胞密度转换为嗜酸性粒细胞计数 (eos/hpf)，假定 hpf 大小为 0.24 mm2，即文献中报告的平均视野大小。 UNC 和 Mayo Clinic 的研究病理学家将审查他们站点的标本，而来自剑桥的研究病理学家将对所有标本进行第二次审查，以确保最准确地量化嗜酸性粒细胞计数。

此外，研究人员计划对现有的活检和海绵样本进行特殊染色和分析，以确定是否可以提高该测试的诊断准确性。 特别是研究人员将检查嗜酸性粒细胞功能、激活和炎症的标志物，例如嗜酸性粒细胞过氧化物酶 (EPX)，这是一种可以清楚识别完整嗜酸性粒细胞的颗粒蛋白，以及表明脱颗粒的细胞外 EPX 沉积。 这可以用免疫组织化学检测。 这将在梅奥诊所与我们目前拥有编码标本的合作者一起完成。

安全和可达性评估：

将在多个点对患者进行评估，以确定 Cytosponge 在 EoE 中的安全性。 一旦吞下海绵胶囊，以及取出膨胀的海绵后，研究人员将立即评估任何症状或事件。 内窥镜检查后 1 天和 7 天将联系参与者以评估不良事件。 对于目标 2，将在 7 天的随访点对参与者进行可接受性调查，以便患者有足够的时间反思他们对两种组织收集方法的体验。 特别是这项调查将记录患者吞咽 Cytosponge 的经历，他们是否会再次这样做，以及他们是否更喜欢 Cytosponge 或内窥镜检查来诊断和监测 EoE。