慢性歯周炎患者におけるプロバイオティクスの使用

材料と方法 この二重盲検、プラセボ対照、無作為化 (1:1 比) 対照試験には、進行した成人歯周炎の 48 人の患者が参加しました。 彼らは、トルコのククロバ大学の歯周病学科で採用されました。 歯周治療のために紹介されたすべての患者は、適格性についてスクリーニングされました。このプロジェクトは、トルコのククロバ大学の臨床試験の倫理委員会によって承認されました。 倫理委員会の承認後、試験デザインの変更は行われませんでした。

サンプルサイズの計算と無作為化 この研究製品に関するこれまでの無作為化対照試験が入手できなかったため、研究開始前の検出力分析は困難でした。 サンプルサイズが決定された。 ポケットのプロービング深度が考慮され、予想差は 0.82mm、標準偏差は 0.61mm でした。 0.05 のアルファで 80% の検出力を提供するには、各グループに 10 人の患者が必要であると計算されました。 この少数にもかかわらず、抗生物質の補助効果をスケーリングおよびルートプレーニングと比較した研究を考慮して、各グループに 24 人の患者を含めることにしました。

患者の無作為化は、ブロック無作為化によって行われました。 研究コーディネーターは、ベースライン時、4 週間目、8 週間目の来院時に、コード化されたボトルを検査官に配布しました。 研究コーディネーターを除いて、すべての患者と研究担当者は、研究グループの割り当てを知らされていませんでした。 データを生物統計学者に送信する前に、患者を適切なグループにグループ化するためにコードが壊れていました。

治療プロトコル 適格基準を満たす患者は、研究への参加を求められ、承認後、インフォームドコンセントに署名した。 ベースライン検査には、口全体のプロービング ポケットの深さ、歯肉の後退、歯あたり 6 か所で測定されたプロービング時の出血が含まれていました。 さらに、プラークエンジンジバルインデックスが記録されました。 口全体のプラーク指数が記録されました。ベースラインの歯周検査と微生物分析の後、口腔衛生指導が行われました（歯ブラシ、歯間ブラシ）。 初期の歯周治療は、口全体の1段階消毒アプローチで構成されていました。 すべての臨床処置は、同じ歯周病専門医によって実施されました。 患者は、アルコールを含まない 0.12% クロルヘキシジン溶液で 2 分間すすぐように求められました。 0.12% クロルヘキシジン灌注下で超音波スケーラーを使用し、手動器具を使用して、2 日間連続してスケーリングとルートプレーニングを実施しました。 その後、すべての粘膜表面を消毒し、舌を 1 分間ブラッシングしました。 さらに、参加者は 2 つの治療グループに無作為に割り付けられました: コントロール グループまたはプロバイオティクス グループ。 対照群の参加者は、プラセボ錠剤で同じことをするように求められました. すべての患者は、朝と夕方に歯を磨いた後に錠剤を使用するように指示されました. プロバイオティクス錠剤とプラセボ錠剤は、プロバイオティクス錠剤に連鎖球菌が添加されたことを除いて、形状、食感、味、および組成が同一でした. すべての患者に同じ歯磨き粉が提供されました。 研究の過程でプロバイオティクスを含む製品を使用しないように依頼されました. 試験中は、抗炎症特性のある薬剤、クロルヘキシジン、または他の洗口剤を使用することも許可されませんでした.

指定された時点で、フォローアップの訪問が計画されました。 治療開始から30日後および60日後に、臨床評価および微生物分析を実施した。 最初の治療から 90 日後と 180 日後に、すべてのベースライン パラメータを記録しました。

関心のある結果変数 主要な結果の尺度 主要な応答変数は、ポケットの深さの調査でした。 すべての検査は、ノースカロライナ州の歯周プローブで実施されました。

二次結果の測定 二次反応変数は、不況、臨床的付着レベル、出血、歯肉指数、プラーク指数、および微生物パラメーターでした。

初期ポケットを考慮して、これらの結果変数に対してサブ分析が実行されました。 最初のポケットが 4 ～ 6 mm の場合、ポケットは中程度であると見なされ、7 mm 以上の場合は深いと見なされました。 「疾患進行のリスク」は、患者レベルで定義されました。 「手術の必要性」のアウトカム指標が計算されました。 ポケットが 6 mm または 5 mm 以上で出血陽性の場合、その部位は「手術が必要」とみなされました。 手術が必要な部位が少なくとも 1 つある歯は、手術が必要であると見なされました。 少なくとも 1 本の歯が手術を必要としている場合、患者は手術が必要であると見なされました。

微生物学的サンプルは、歯肉縁上および歯肉縁下のプラーク、唾液、および舌から収集されました。 プールされた歯肉縁上プラークのサンプルは、各象限の最初のポケットが最も深い 4 本の単根歯でキュレットを使用して採取されました。 サンプリングの前に、コットンロールを使用してサイトを唾液から分離し、圧縮空気で乾燥させました。 これらの部位からの歯肉縁上のプラークはすべて分散していた。 ボルテックスミキサーを使用してサンプルを分散させ、分析まで-20°Cで直ちに凍結させました。 プールされた同じ歯で、部位ごとに歯肉縁下のプラークサンプルが収集されました。 10秒後、記載されているように、サンプルを滅菌エッペンドルフチューブに移し、刺激されていない唾液を滅菌カップに集めることによって唾液サンプルを得た。 最後に、舌のバイオフィルムを綿棒で採取しました。 これらを舌背側から始めて舌の上を10回拭いた。

微生物サンプルの処理 研究終了後、冷凍サンプルはドライアイスで歯周病科に送られ、到着後すぐに-80℃で凍結されました。 各サンプルは後で解凍し、13,000g で遠心分離しました。 細菌DNAを抽出した。 特定の細菌を定量化するために定量的アッセイを行った。