Применение пробиотиков у пациентов с хроническим пародонтитом

Материалы и методы В этом двойном слепом, плацебо-контролируемом, рандомизированном (соотношение 1:1) контролируемом исследовании с двумя параллельными группами приняли участие 48 взрослых пациентов с запущенным пародонтитом. Они были набраны на кафедре пародонтологии Университета Чукурова, Турция. Все пациенты, направленные на пародонтологическое лечение, были проверены на соответствие требованиям. Проект был одобрен этическим комитетом клинических испытаний Университета Чукурова в Турции под номером . После утверждения Комитетом по этике никаких изменений в дизайн испытания не вносилось.

Расчет размера выборки и рандомизация. Анализ мощности до начала исследования был затруднен, поскольку ранее не проводились рандомизированные контролируемые испытания этого исследуемого продукта. Размер выборки был определен. Учитывалась глубина зондирования кармана с ожидаемой разницей 0,82 мм и стандартным отклонением 0,61 мм. Было подсчитано, что в каждой группе необходимо 10 пациентов, чтобы обеспечить мощность 80% с альфа 0,05. Несмотря на это небольшое количество и принимая во внимание исследования, сравнивающие дополнительный эффект антибиотиков с удалением зубного камня и пломбированием корней, было решено включить в каждую группу по 24 пациента.

Рандомизацию пациентов проводили методом блочной рандомизации. Координатор исследования раздавал закодированные бутылки исследователю на исходном уровне, через 4 недели и через 8 недель. За исключением координатора исследования, все пациенты и исследовательский персонал не были осведомлены о распределении по исследовательским группам. Перед отправкой данных специалисту по биостатистике код был взломан, чтобы сгруппировать пациентов в соответствующие группы.

Протокол лечения Пациентов, отвечающих критериям приемлемости, просили принять участие в исследовании и после одобрения подписать информированное согласие. Исходное обследование включало зондирование всей полости рта, глубину кармана, рецессию десны и кровоточивость при зондировании, измеренные в шести точках на зуб. Кроме того, были отмечены индексы зубного налета на деснах. Регистрировали полный ротовой зубной индекс. После базового осмотра пародонта и микробного анализа были даны инструкции по гигиене полости рта (зубная щетка, межзубная щетка). Начальная пародонтологическая терапия состояла из одноэтапной дезинфекции всего рта. Все клинические процедуры проводились одним и тем же пародонтологом. Больному было предложено полоскаться в течение 2 минут 0,12% раствором хлоргексидина без спирта. Удаление зубного камня и корневое выравнивание выполняли в течение 2 дней подряд с помощью ультразвукового скейлера под орошением 0,12% раствором хлоргексидина и ручными инструментами. После этого все поверхности слизистых оболочек дезинфицировали, а язык чистили щеткой в ​​течение 1 минуты. Кроме того, участников рандомизировали на 2 группы лечения: контрольную или группу пробиотиков. Участникам группы пробиотиков было предложено рассасывать таблетку пробиотика на языке 2 раза в день в течение 3 месяцев. Участников контрольной группы попросили сделать то же самое с таблеткой плацебо. Всем пациентам было рекомендовано использовать таблетки после чистки зубов утром и вечером. Таблетки с пробиотиком и плацебо были идентичны по форме, текстуре, вкусу и составу, за исключением того, что в таблетку с пробиотиком добавляли Streptococcus. Все пациенты получали одну и ту же зубную пасту. Было предложено не использовать какие-либо продукты, содержащие пробиотики, в ходе исследования. Также во время исследования не разрешалось использовать препараты с противовоспалительными свойствами, хлоргексидин или другие ополаскиватели для полости рта.

В назначенные моменты времени были запланированы последующие визиты. Через 30 и 60 дней после начала терапии проводили клиническую оценку и микробный анализ. Через 90 и 180 дней после начала лечения регистрировали все исходные параметры.

Интересующие переменные исхода Первичные показатели исхода Первичной переменной ответа была глубина кармана зондирования. Все исследования проводились пародонтальным зондом North Carolina.

Вторичные показатели исхода Вторичными переменными ответа были рецессия, уровень клинического прикрепления, кровотечение, индекс десны, индекс зубного налета и микробные параметры.

По этим переменным результатов был проведен субанализ с учетом исходного кармана. Карман считался умеренным, если его первоначальный карман был между 4 и 6 мм и глубоким, если ≥7 мм. «Риск прогрессирования заболевания» определяли на уровне пациента. Был рассчитан критерий исхода «необходимость операции». Участок считался «требующим хирургического вмешательства», если карман был ≥ 6 мм или 5 мм и кровотечение было положительным. Зуб считался нуждающимся в хирургическом вмешательстве, если он имел хотя бы один участок, нуждающийся в хирургическом вмешательстве. Пациент считался нуждающимся в хирургическом вмешательстве, если хотя бы один зуб нуждался в хирургическом вмешательстве.

Были собраны микробиологические образцы наддесневого и поддесневого налета, слюны и языка. Объединенные образцы наддесневого зубного налета были взяты с помощью кюреток у четырех однокорневых зубов с самым глубоким начальным карманом в каждом квадранте. Перед взятием проб участки изолировали от слюны с помощью ватных валиков, а затем высушивали сжатым воздухом. Весь наддесневой налет с этих участков рассеялся. Образцы диспергировали с помощью вихревого миксера и немедленно замораживали при -20°C до проведения анализа. На одних и тех же зубах были собраны объединенные образцы поддесневого зубного налета. Через 10 с образцы переносили в стерильную пробирку Эппендорфа, как описано. Образцы слюны получали путем сбора нестимулированной слюны в стерильную чашку. Наконец, биопленку с языка собирали ватным тампоном. Им протирали 10 раз язык, начиная с его спинки.

Обработка микробных образцов После завершения исследования замороженные образцы были отправлены на сухом льду в отделение пародонтологии, они были немедленно заморожены при -80°C по прибытии. затем каждый образец размораживали и центрифугировали при 13 000 g. Бактериальную ДНК экстрагировали. Количественный анализ был проведен для количественного определения определенных бактерий.