Probiotisk bruk hos pasienter med kronisk periodontitt

Materialer og metoder Denne dobbeltblindede, placebokontrollerte, randomiserte (1:1 forhold) kontrollerte studien med to parallelle armer involverte 48 pasienter med avansert periodontitt hos voksne. De ble rekruttert ved periodontologiavdelingen ved Cukurova-universitetet, Tyrkia. Alle pasienter som ble henvist til periodontal behandling ble screenet for valgbarhet. Prosjektet ble godkjent av den etiske komiteen for kliniske studier ved Cukurova University i Tyrkia med nummer . Det ble ikke gjort endringer i utformingen av forsøket etter godkjenning av Etisk komité.

Beregning av prøvestørrelse og randomisering Effektanalyse før starten av studien var vanskelig siden ingen tidligere randomiserte kontrollerte studier på dette studieproduktet var tilgjengelige. Prøvestørrelsen ble bestemt. Det ble tatt hensyn til lommesonderingsdybden, med en forventet forskjell på 0,82 mm og et standardavvik på 0,61 mm. Det ble beregnet at 10 pasienter var nødvendig i hver gruppe for å gi 80 % kraft med en alfa på 0,05 . Til tross for dette lave antallet og tatt i betraktning studier som sammenligner den tilleggseffekten av antibiotika med skalering og rotplaning, ble det besluttet å inkludere 24 pasienter i hver gruppe.

Randomisering av pasientene ble gjort ved blokkrandomisering. Studiekoordinatoren delte ut de kodede flaskene til sensor ved baseline, 4 uker og 8 ukers besøk. Bortsett fra studiekoordinatoren, ble alle pasienter og studiepersonell blindet for studiegruppetildelingen. Før dataene ble sendt til biostatistikeren, ble koden brutt for å gruppere pasientene i de riktige gruppene.

Behandlingsprotokoll Pasienter som oppfyller kvalifikasjonskriteriene ble bedt om å delta i studien og etter godkjenning signere et informert samtykke. Baseline undersøkelse inkluderte full-munn sondering lommedybde, gingival resesjon og blødning ved sondering målt på seks steder per tann. I tillegg ble plakk-en-gingivalindeksene notert. Plakkindeksen i full munn ble registrert. Etter baseline periodontal undersøkelse og mikrobiell analyse ble det gitt munnhygiene (tannbørste, interdental børste). Innledende periodontal terapi besto av en ett-trinns desinfeksjonsmetode i full munn. Alle kliniske prosedyrer ble utført av samme periodontist. Pasienten ble bedt om å skylle i 2 minutter med en 0,12 % klorheksidinløsning uten alkohol. Skalering og rotplaning ble utført på 2 påfølgende dager ved bruk av en ultralydskaler under 0,12 % klorheksidin-irrigasjon og med håndinstrumenter. Alle slimhinneoverflater ble etterpå desinfisert og tungen ble børstet i 1 minutt. I tillegg ble deltakerne randomisert over de 2 behandlingsgruppene: kontroll- eller probiotisk gruppe. Deltakerne i den probiotiske gruppen ble bedt om å la en probiotisk tablett løse seg opp på tungen 2 ganger daglig i 3 måneder. Deltakerne i kontrollgruppen ble bedt om å gjøre det samme med en placebotablett. Alle pasienter ble instruert om å bruke tablettene etter å ha pusset tennene om morgenen og om kvelden. De probiotiske og placebotablettene var identiske i form, tekstur, smak og sammensetning bortsett fra at Streptococcus ble tilsatt for den probiotiske tabletten. Alle pasientene fikk samme tannkrem. Det ble bedt om ikke å bruke produkter som inneholder probiotika i løpet av studien. Det var heller ikke tillatt å bruke medikamenter med anti-inflammatoriske egenskaper, klorheksidin eller andre munnskyllinger under studien.

På angitte tidspunkter ble det planlagt oppfølgingsbesøk. 30 dager og 60 dager etter oppstart av terapien ble det utført klinisk evaluering og mikrobiell analyse. 90 dager og 180 dager etter den første behandlingen ble alle baseline parametere registrert.

Utfallsvariabler av interesse Primære utfallsmål Den primære responsvariabelen var Sondering av lommedybde. Alle undersøkelser ble utført med en North Carolina periodontal probe.

Sekundære utfallsmål De sekundære responsvariablene var resesjon, klinisk tilknytningsnivå, blødning, gingivalindeks, plakkindeks og mikrobielle parametere.

Underanalyser ble utført på disse utfallsvariablene under hensyntagen til den innledende lommen. En lomme ble ansett som moderat hvis dens opprinnelige lomme var mellom 4 og 6 mm og dyp hvis ≥7 mm. «Risiko for sykdomsprogresjon» ble definert på pasientnivå. Utfallsmålet «behov for operasjon» ble beregnet. Et sted ble ansett som "trenger til kirurgi" hvis lommen var ≥6 mm eller 5 mm og blødningspositiv. En tann ble ansett som behov for operasjon hvis den hadde minst ett sted med behov for operasjon. En pasient ble vurdert som behov for operasjon eller operasjon dersom minst én tann trengte operasjon.

Mikrobiologiske prøver ble samlet av supragingival og subgingival plakk, spytt og tunge. Samlede supragingivale plakkprøver ble tatt ved hjelp av kyretter ved de fire enkeltrotede tennene med den dypeste initiallommen i hver kvadrant. Før prøvetaking ble lokalitetene isolert fra spytt ved hjelp av bomullsruller og deretter tørket med trykkluft. All supragingival plakk fra disse stedene ble spredt. Prøver ble dispergert ved bruk av en vortex-blander og umiddelbart frosset ved -20°C inntil analyse. På de samme tennene ble det samlet subgingivale plakkprøver per sted. Etter 10 s ble prøvene overført til et sterilt Eppendorf-rør, som beskrevet Spyttprøver ble oppnådd ved å samle ustimulert spytt i en steril kopp. Til slutt ble biofilmen av tungen samlet med en bomullspinne. Disse ble tørket 10 ganger over tungen med start fra tungeryggen.

Behandling av de mikrobielle prøvene Etter endt studie ble de frosne prøvene sendt på tørris til avdelingen for periodontologi, disse ble umiddelbart frosset ved -80°C ved ankomst. hver prøve ble senere tint og sentrifugert ved 13.000 g. Bakterie-DNA ble ekstrahert. En kvantitativ analyse ble utført for å kvantifisere visse bakterier.