Uso de probióticos en pacientes con periodontitis crónica

Materiales y métodos Este ensayo doble ciego, controlado con placebo, aleatorizado (proporción 1:1) con dos brazos paralelos involucró a 48 pacientes con periodontitis adulta avanzada. Fueron reclutados en el departamento de periodoncia de la universidad de Cukurova, Turquía. Todos los pacientes remitidos para tratamiento periodontal fueron evaluados para determinar su elegibilidad. El proyecto fue aprobado por el comité ético de ensayos clínicos de la Universidad de Cukurova en Turquía con el número . No se realizaron cambios en el diseño del ensayo después de la aprobación del Comité de Ética.

Cálculo del tamaño de la muestra y aleatorización El análisis de potencia antes del inicio del estudio fue difícil ya que no se disponía de ensayos controlados aleatorios previos sobre este producto del estudio. Se determinó el tamaño de la muestra. Se tuvo en cuenta la profundidad de sondaje de la bolsa, con una diferencia esperada de 0,82 mm y una desviación estándar de 0,61 mm. Se calculó que se necesitaban 10 pacientes en cada grupo para proporcionar un 80% de potencia con un alfa de 0,05. A pesar de este bajo número y teniendo en cuenta los estudios que compararon el efecto adyuvante de los antibióticos con el raspado y el alisado radicular, se decidió incluir 24 pacientes en cada grupo.

La aleatorización de los pacientes se realizó mediante aleatorización en bloques. El coordinador del estudio distribuyó los frascos codificados al examinador en la visita inicial, a las 4 semanas y a las 8 semanas. Excepto el coordinador del estudio, todos los pacientes y el personal del estudio estaban cegados a la asignación del grupo de estudio. Antes de enviar los datos al bioestadístico, se descifró el código para agrupar a los pacientes en los grupos adecuados.

Protocolo de tratamiento A los pacientes que cumplieron con los criterios de elegibilidad se les pidió que participaran en el estudio y, después de la aprobación, que firmaran un consentimiento informado. El examen inicial incluyó la profundidad de la bolsa al sondaje en toda la boca, la recesión gingival y el sangrado al sondaje medido en seis sitios por diente. Además se anotaron los índices gingivales de placa. Se registró el índice de placa en toda la boca. Después del examen periodontal inicial y el análisis microbiano, se dio una instrucción de higiene bucal (cepillo de dientes, cepillo interdental). La terapia periodontal inicial consistió en un enfoque de desinfección de una etapa de toda la boca. Todos los procedimientos clínicos fueron realizados por el mismo periodoncista. Se le pidió al paciente que se enjuagara durante 2 minutos con una solución de clorhexidina al 0,12% sin alcohol. El raspado y alisado radicular se realizó en 2 días consecutivos utilizando un raspador ultrasónico bajo irrigación con clorhexidina al 0,12% y con instrumentos manuales. Posteriormente se desinfectaron todas las superficies mucosas y se cepillaron la lengua durante 1 minuto. Además, los participantes fueron aleatorizados en los 2 grupos de tratamiento: control o grupo de probióticos. A los participantes del grupo de probióticos se les pidió que dejaran que una tableta de probiótico se disolviera en su lengua 2 veces al día durante 3 meses. A los participantes del grupo de control se les pidió que hicieran lo mismo con una tableta de placebo. Todos los pacientes recibieron instrucciones de usar las tabletas después de cepillarse los dientes por la mañana y por la noche. Las tabletas de probiótico y placebo eran idénticas en forma, textura, sabor y composición, excepto que se agregó Streptococcus para la tableta de probiótico. A todos los pacientes se les suministró la misma pasta dental. Se solicitó no utilizar ningún producto que contuviera probióticos durante el transcurso del estudio. Tampoco se permitió el uso de fármacos con propiedades antiinflamatorias, clorhexidina u otros enjuagues bucales durante el estudio.

En los puntos de tiempo designados, se planificaron visitas de seguimiento. 30 días y 60 días después del inicio de la terapia se realizó evaluación clínica y análisis microbiano. 90 días y 180 días después del tratamiento inicial se registraron todos los parámetros de referencia.

Variables de resultado de interés Medidas de resultado primarias La variable de respuesta primaria fue la profundidad de la bolsa al sondaje. Todos los exámenes se realizaron con una sonda periodontal de Carolina del Norte.

Medidas de resultado secundarias Las variables de respuesta secundarias fueron recesión, nivel de inserción clínica, sangrado, índice gingival, índice de placa y parámetros microbianos.

Se realizaron subanálisis de estas variables de resultado teniendo en cuenta el Pocket inicial. Se consideró una bolsa moderada si su bolsa inicial estaba entre 4 y 6 mm y profunda si ≥ 7 mm. El "riesgo de progresión de la enfermedad" se definió a nivel de paciente. Se calculó la medida de resultado "necesidad de cirugía". Se consideró que un sitio "necesitaba cirugía" si la bolsa era ≥6 mm o 5 mm y el sangrado era positivo. Se consideró que un diente necesitaba cirugía si tenía al menos un sitio que necesitaba cirugía. Se consideró que un paciente necesitaba cirugía si al menos un diente necesitaba cirugía.

Se recogieron muestras microbiológicas de placa supragingival y subgingival, saliva y lengua. Se tomaron muestras de placa supragingival agrupadas con la ayuda de curetas en los cuatro dientes de una sola raíz con la bolsa inicial más profunda en cada cuadrante. Antes del muestreo, los sitios se aislaron de la saliva con la ayuda de rollos de algodón y luego se secaron con aire comprimido. Se dispersó toda la placa supragingival de estos sitios. Las muestras se dispersaron utilizando un mezclador de vórtice y se congelaron inmediatamente a -20 °C hasta su análisis. En los mismos dientes se recolectaron muestras de placa subgingival agrupadas por sitio. Después de 10 s, las muestras se transfirieron a un tubo Eppendorf estéril, como se describe. Las muestras de saliva se obtuvieron recolectando saliva no estimulada en una copa estéril. Finalmente se recogió el biofilm de la lengua con un hisopo de algodón. Estos se frotaron 10 veces sobre la lengua comenzando desde el dorso de la lengua.

Procesamiento de las muestras microbianas Luego de finalizar el estudio, las muestras congeladas fueron enviadas en hielo seco al departamento de Periodoncia, estas fueron congeladas inmediatamente a -80°C a su llegada. cada muestra fue posteriormente descongelada y centrifugada a 13.000g. Se extrajo el ADN bacteriano. Se realizó un ensayo cuantitativo para cuantificar ciertas bacterias.