益生菌在慢性牙周炎患者中的应用

材料和方法 这项双盲、安慰剂对照、随机（1:1 比例）对照试验有两个平行组，涉及 48 名晚期成人牙周炎患者。 他们是在土耳其 Cukurova 大学的牙周病学系招募的。 所有转诊接受牙周治疗的患者都经过资格筛选。该项目获得了土耳其 Cukurova 大学临床试验伦理委员会的批准，编号为 。 经伦理委员会批准后，试验设计未作任何更改。

样本量计算和随机化 研究开始前的功效分析很困难，因为之前没有关于该研究产品的随机对照试验。 确定样本量。 考虑了口袋探测深度，预期差异为 0.82 毫米，标准偏差为 0.61 毫米。 据计算，每组需要 10 名患者才能提供 80% 的功效，α 为​​ 0.05。 尽管人数较少，并考虑到比较抗生素与刮治和根面平整的辅助效果的研究，但仍决定每组包括 24 名患者。

患者的随机化是通过区组随机化进行的。 研究协调员在基线、4 周和 8 周访问时将编码瓶分发给检查员。 除研究协调员外，所有患者和研究人员均不知道研究组的分配情况。 在将数据发送给生物统计学家之前，密码被破解以将患者分组到适当的组中。

治疗方案 符合资格标准的患者被要求参加研究，并在批准后签署知情同意书。 基线检查包括全口探诊深度、牙龈退缩和每颗牙齿六个部位的探诊出血。 此外还注意到牙菌斑牙龈指数。 记录全口菌斑指数。基线牙周检查和微生物分析后，给予口腔卫生指导（牙刷、齿间刷）。 最初的牙周治疗包括全口一次性消毒方法。 所有临床程序均由同一名牙周病医生执行。 要求患者用不含酒精的 0.12% 氯己定溶液冲洗 2 分钟。 使用超声波洁牙机在 0.12% 氯己定冲洗下和手持器械连续 2 天进行洁牙和根面平整。 随后对所有粘膜表面进行消毒并刷舌头1分钟。 此外，参与者被随机分配到 2 个治疗组：对照组或益生菌组。益生菌组的参与者被要求让益生菌片在舌头上溶解，每天 2 次，持续 3 个月。 对照组的参与者被要求对安慰剂片做同样的事情。 所有患者都被告知在早晚刷牙后使用这些药片。 益生菌片剂和安慰剂片剂在形状、质地、味道和成分方面完全相同，只是益生菌片剂中添加了链球菌。 所有患者都使用相同的牙膏。 要求在研究过程中不要使用任何含有益生菌的产品。 在研究期间，也不允许使用具有抗炎特性的药物、氯己定或其他漱口水。

在指定的时间点，计划进行后续访问。 治疗开始后 30 天和 60 天进行了临床评估和微生物分析。 初始治疗后 90 天和 180 天记录所有基线参数。

感兴趣的结果变量 主要结果测量 主要响应变量是探测口袋深度。 所有检查均使用 North Carolina 牙周探针进行。

次要结果测量次要响应变量是衰退、临床附着水平、出血、牙龈指数、菌斑指数和微生物参数。

考虑到初始 Pocket，对这些结果变量进行了子分析。 如果初始 Pocket 介于 4 和 6 mm 之间，如果 ≥ 7 mm 则认为 Pocket 较深。 “疾病进展的风险”是在患者层面定义的。 计算“需要手术”结果测量值。 如果 Pocket ≥ 6 mm 或 5 mm 且出血阳性，则认为该部位“需要手术”。 如果一颗牙齿至少有一个部位需要手术，则认为它需要手术。 如果至少有一颗牙齿需要手术，则认为患者需要手术。

收集龈上和龈下菌斑、唾液和舌头的微生物样本。 在每个象限中初始牙槽最深的四颗单根牙齿上，借助刮匙采集合并的龈上菌斑样本。 取样前，借助棉卷将这些部位与唾液隔离，然后用压缩空气吹干。 来自这些部位的所有龈上菌斑都被分散了。 使用涡旋混合器分散样品，并立即冷冻在 -20°C 直至分析。 在同一颗牙齿上，每个部位收集合并的龈下菌斑样本。 10 秒后，将样品转移到无菌 Eppendorf 管中，如前所述 唾液样品是通过在无菌杯中收集未刺激的唾液获得的。 最后用棉签收集舌头的生物膜。 从舌背开始在舌头上擦拭 10 次。

微生物样本的处理完成研究后，冷冻样本用干冰送到牙周病科，这些样本一到就立即冷冻在-80°C。 每个样品随后解冻并以 13.000g 离心。 提取细菌 DNA。 进行定量测定以量化某些细菌。