Stosowanie probiotyków u pacjentów z przewlekłym zapaleniem przyzębia

Materiały i metody To podwójnie ślepe, kontrolowane placebo, randomizowane (stosunek 1:1) badanie z dwoma równoległymi ramionami obejmowało 48 pacjentów z zaawansowanym zapaleniem przyzębia u dorosłych. Zostali oni zatrudnieni na wydziale periodontologii uniwersytetu Cukurova w Turcji. Wszyscy pacjenci skierowani na leczenie periodontologiczne zostali poddani badaniu przesiewowemu pod kątem kwalifikowalności. Projekt został zatwierdzony przez komisję etyczną ds. badań klinicznych Uniwersytetu Cukurova w Turcji pod numerem . Po zatwierdzeniu przez Komisję Etyczną nie wprowadzono żadnych zmian w projekcie badania.

Obliczenie wielkości próby i randomizacja Analiza mocy przed rozpoczęciem badania była trudna, ponieważ nie były dostępne żadne wcześniejsze badania z randomizacją dotyczące tego badanego produktu. Określono wielkość próby. Uwzględniono głębokość sondowania kieszeni, z oczekiwaną różnicą 0,82 mm i odchyleniem standardowym 0,61 mm. Obliczono, że potrzeba było 10 pacjentów w każdej grupie, aby zapewnić 80% mocy z alfa 0,05. Pomimo tak małej liczby i biorąc pod uwagę badania porównujące efekt wspomagający antybiotyków ze skalingiem i rootplaningiem, zdecydowano o włączeniu do każdej grupy po 24 pacjentów.

Randomizację pacjentów przeprowadzono metodą randomizacji blokowej. Koordynator badania przekazał egzaminatorowi zakodowane butelki podczas wizyty początkowej, 4 tygodni i 8 tygodni. Z wyjątkiem koordynatora badania, wszyscy pacjenci i personel badawczy byli zaślepieni co do przydziału grupy badawczej. Przed wysłaniem danych do biostatysty, kod został złamany, aby pogrupować pacjentów w odpowiednie grupy.

Protokół leczenia Pacjenci spełniający kryteria kwalifikacyjne zostali poproszeni o udział w badaniu i po uzyskaniu zgody o podpisanie świadomej zgody. Badanie podstawowe obejmowało głębokość kieszonek w całej jamie ustnej, recesje dziąseł i krwawienie podczas sondowania mierzone w sześciu miejscach na ząb. Dodatkowo odnotowano wskaźniki płytki nazębnej i dziąseł. Rejestrowano wskaźnik płytki nazębnej pełnej jamy ustnej. Po wyjściowym badaniu periodontologicznym i analizie mikrobiologicznej przeprowadzono instruktaż higieny jamy ustnej (szczoteczka do zębów, szczoteczka międzyzębowa). Początkowa terapia periodontologiczna obejmowała jednoetapową dezynfekcję całej jamy ustnej. Wszystkie zabiegi kliniczne wykonywał ten sam lekarz periodontolog. Chorego poproszono o płukanie przez 2 minuty 0,12% roztworem chlorheksydyny bez alkoholu. Scaling i rootplaning wykonywano przez 2 kolejne dni przy użyciu skalera ultradźwiękowego z irygacją 0,12% chlorheksydyną oraz narzędziami ręcznymi. Następnie zdezynfekowano wszystkie powierzchnie błony śluzowej i szczotkowano język przez 1 minutę. Poza tym uczestnicy zostali losowo przydzieleni do 2 grup terapeutycznych: grupy kontrolnej lub grupy probiotycznej. Uczestników grupy probiotycznej poproszono o rozpuszczanie tabletki probiotycznej na języku 2 razy dziennie przez 3 miesiące. Uczestnicy z grupy kontrolnej zostali poproszeni o zrobienie tego samego z tabletką placebo. Wszystkich pacjentów poinstruowano, aby stosowali tabletki po umyciu zębów rano i wieczorem. Tabletki probiotyczne i placebo były identyczne pod względem kształtu, tekstury, smaku i składu, z wyjątkiem tego, że do tabletki probiotycznej dodano Streptococcus. Wszystkim pacjentom zaopatrywano tę samą pastę do zębów. Poproszono, aby w trakcie badania nie stosować żadnych produktów zawierających probiotyki. W trakcie badania nie wolno było również stosować leków o działaniu przeciwzapalnym, chlorheksydyny ani innych płynów do płukania jamy ustnej.

W wyznaczonych punktach czasowych zaplanowano wizyty kontrolne. Po 30 i 60 dniach od rozpoczęcia terapii przeprowadzono ocenę kliniczną i analizę mikrobiologiczną. 90 dni i 180 dni po początkowym leczeniu rejestrowano wszystkie parametry wyjściowe.

Interesujące zmienne wyników Pierwotne pomiary wyników Główną zmienną odpowiedzi była głębokość kieszonek sondujących. Wszystkie badania wykonano sondą periodontologiczną z Karoliny Północnej.

Drugorzędowe pomiary wyników Drugorzędowymi zmiennymi odpowiedzi były recesja, kliniczny poziom przyczepu, krwawienie, wskaźnik dziąseł, wskaźnik płytki nazębnej i parametry mikrobiologiczne.

Analizy podrzędne przeprowadzono na tych zmiennych wynikowych, biorąc pod uwagę początkową kieszeń. Za kieszonkę uważano umiarkowaną, jeśli jej początkowa kieszonka wynosiła od 4 do 6 mm, a głęboka, jeśli ≥7 mm. „Ryzyko progresji choroby” zdefiniowano na poziomie pacjenta. Obliczono miarę wyniku „potrzeba operacji”. Miejsce uznano za „wymagające operacji”, jeśli kieszonka miała ≥6 mm lub 5 mm i dodatnie krwawienie. Ząb uznano za wymagający operacji, jeśli miał co najmniej jedno miejsce wymagające operacji. Pacjent był uznawany za wymagającego operacji lub operacji, jeśli co najmniej jeden ząb wymagał operacji.

Próbki mikrobiologiczne pobrano z naddziąsłowej i poddziąsłowej płytki nazębnej, śliny i języka. Zbiorcze próbki płytki nazębnej naddziąsłowej pobrano za pomocą kiret z czterech zębów jednokorzeniowych z najgłębszą kieszonką początkową w każdym kwadrancie. Przed pobraniem próbek miejsca izolowano ze śliny za pomocą wacików, a następnie suszono sprężonym powietrzem. Cała płytka naddziąsłowa z tych miejsc została rozproszona. Próbki zdyspergowano za pomocą mieszadła wirowego i natychmiast zamrożono w temperaturze -20°C do czasu analizy. Na tych samych zębach pobrano próbki płytki poddziąsłowej z każdego miejsca. Po 10 s próbki przeniesiono do sterylnej probówki Eppendorfa, jak opisano. Próbki śliny uzyskano przez zebranie niestymulowanej śliny do sterylnego kubka. Na koniec biofilm z języka zebrano wacikiem. Wycierano je 10 razy po języku, zaczynając od grzbietu języka.

Przetwarzanie próbek mikrobiologicznych Po zakończeniu badań zamrożone próbki wysłano w suchym lodzie do Oddziału Periodontologii, gdzie zaraz po przybyciu zostały zamrożone w temperaturze -80°C. każdą próbkę później rozmrożono i odwirowano przy 13 000 g. Ekstrahowano bakteryjne DNA. Przeprowadzono oznaczenie ilościowe w celu określenia ilościowego niektórych bakterii.