Použití probiotik u pacientů s chronickou parodontitidou

Materiály a metody Tato dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná, randomizovaná (poměr 1:1) kontrolovaná studie se dvěma paralelními rameny zahrnovala 48 pacientů s pokročilou parodontitidou dospělých. Byli přijati na parodontologickém oddělení univerzity Cukurova v Turecku. U všech pacientů doporučených k parodontologickému ošetření byl proveden screening na způsobilost. Projekt byl schválen etickou komisí pro klinické studie Univerzity Cukurova v Turecku s číslem . Po schválení etickou komisí nebyly provedeny žádné změny v designu pokusu.

Výpočet velikosti vzorku a randomizace Analýza síly před zahájením studie byla obtížná, protože nebyly k dispozici žádné předchozí randomizované kontrolované studie s tímto studijním produktem. Byla stanovena velikost vzorku. Byla vzata v úvahu hloubka kapesního sondování s očekávaným rozdílem 0,82 mm a standardní odchylkou 0,61 mm. Bylo spočítáno, že v každé skupině bylo zapotřebí 10 pacientů k poskytnutí 80% výkonu s hodnotou alfa 0,05. Navzdory tomuto nízkému počtu a s přihlédnutím ke studiím srovnávajícím doplňkový účinek antibiotik s škálováním a rootplaningem bylo rozhodnuto zahrnout 24 pacientů do každé skupiny.

Randomizace pacientů byla provedena blokovou randomizací. Koordinátor studie distribuoval kódované lahvičky zkoušejícímu na začátku, po 4 týdnech a po 8 týdnech návštěvy. Kromě koordinátora studie byli všichni pacienti a personál studie zaslepeni, pokud jde o rozdělení studijní skupiny. Před odesláním dat biostatistikovi byl kód rozbit, aby se pacienti seskupili do správných skupin.

Protokol léčby Pacienti splňující kritéria způsobilosti byli požádáni, aby se zúčastnili studie a po schválení podepsali informovaný souhlas. Základní vyšetření zahrnovalo celoústní sondování hloubky kapsy, ústupu dásní a krvácení při sondování měřeno na šesti místech na zub. Navíc byly zaznamenány indexy plaků a dásní. Zaznamenával se index plaku v celých ústech. Po základním periodontálním vyšetření a mikrobiální analýze byla poskytnuta instruktáž ústní hygieny (zubní kartáček, mezizubní kartáček). Počáteční parodontologická terapie sestávala z jednostupňové dezinfekce plných úst. Všechny klinické výkony prováděl stejný parodontolog. Pacient byl požádán, aby oplachoval 2 minuty 0,12% roztokem chlorhexidinu bez alkoholu. Scaling a rootplaning byly prováděny 2 po sobě jdoucí dny s použitím ultrazvukového scaleru pod 0,12% chlorhexidinem irigace a s ručními nástroji. Všechny slizniční povrchy byly poté dezinfikovány a jazyk byl kartáčován po dobu 1 minuty. Kromě toho byli účastníci randomizováni do 2 léčebných skupin: kontrolní nebo probiotická skupina. Účastníci probiotické skupiny byli požádáni, aby si nechali probiotickou tabletu rozpustit na jazyku 2krát denně po dobu 3 měsíců. Účastníci v kontrolní skupině byli požádáni, aby udělali totéž s tabletou s placebem. Všichni pacienti byli poučeni, aby užívali tablety po čištění zubů ráno a večer. Probiotické a placebo tablety byly identické co do tvaru, textury, chuti a složení kromě toho, že pro probiotickou tabletu byl přidán Streptococcus. Všichni pacienti dostali stejnou zubní pastu. Byl požádán, aby v průběhu studie nepoužíval žádné produkty obsahující probiotika. Během studie nebylo dovoleno používat ani léky s protizánětlivými vlastnostmi, chlorhexidin nebo jiné ústní vody.

V určených časových bodech byly naplánovány následné návštěvy. 30 dnů a 60 dnů po zahájení terapie bylo provedeno klinické hodnocení a mikrobiální analýza. 90 dnů a 180 dnů po počáteční léčbě byly zaznamenány všechny základní parametry.

Zájmové výstupní proměnné Měření primárního výsledku Primární proměnnou odezvy byla hloubka sondy. Všechna vyšetření byla provedena parodontální sondou v Severní Karolíně .

Sekundární ukazatele výsledku Sekundárními proměnnými odezvy byly recese, úroveň klinické vazby, krvácení, gingivální index, plakový index a mikrobiální parametry.

U těchto výsledných proměnných byly provedeny dílčí analýzy s přihlédnutím k počáteční kapse. Kapsa byla považována za střední, pokud její počáteční kapsa byla mezi 4 a 6 mm a hluboká, pokud byla ≥7 mm. "Riziko progrese onemocnění" bylo definováno na úrovni pacienta. Byla vypočtena výsledná míra „potřeby operace“. Místo bylo považováno za „potřebující operaci“, pokud byla kapsa ≥6 mm nebo 5 mm a krvácení pozitivní. Zub byl považován za zub vyžadující operaci, pokud měl alespoň jedno místo vyžadující operaci. Pacient byl považován za pacienta v nouzi nebo operaci, pokud alespoň jeden zub potřeboval operaci.

Byly odebrány mikrobiologické vzorky supragingiválního a subgingiválního plaku, slin a jazyka. Shromážděné vzorky supragingiválního plaku byly odebrány pomocí kyret u čtyř jednokořenových zubů s nejhlubší počáteční kapsou v každém kvadrantu. Před odběrem vzorků byla místa izolována od slin pomocí smotků bavlny a poté vysušena stlačeným vzduchem. Veškerý supragingivální plak z těchto míst byl rozptýlen. Vzorky byly dispergovány pomocí vortexového mixéru a okamžitě zmraženy při -20 °C až do analýzy. Na stejných zubech byly odebrány vzorky subgingiválního plaku na jednom místě. Po 10 s byly vzorky přeneseny do sterilní Eppendorfovy zkumavky, jak je popsáno Vzorky slin byly získány sběrem nestimulovaných slin do sterilního kalíšku. Nakonec byl biofilm jazyka odebrán vatovým tamponem. Ty byly otřeny 10krát přes jazyk počínaje od hřbetu jazyka.

Zpracování mikrobiálních vzorků Po ukončení studie byly zmrazené vzorky odeslány na suchém ledu na oddělení parodontologie, které byly ihned po dodání zmraženy na -80°C. každý vzorek byl později rozmražen a odstředěn při 13 000 g. Byla extrahována bakteriální DNA. Pro kvantifikaci určitých bakterií byl proveden kvantitativní test.