Uso dei probiotici nei pazienti con parodontite cronica

Materiali e metodi Questo studio in doppio cieco, controllato con placebo, randomizzato (rapporto 1:1) con due bracci paralleli ha coinvolto 48 pazienti con parodontite avanzata dell'adulto. Sono stati reclutati presso il dipartimento di parodontologia dell'università di Cukurova, in Turchia. Tutti i pazienti sottoposti a trattamento parodontale sono stati sottoposti a screening per l'idoneità. Il progetto è stato approvato dal comitato etico per le sperimentazioni cliniche dell'Università Cukurova in Turchia con il numero . Non sono state apportate modifiche al disegno dello studio dopo l'approvazione da parte del Comitato Etico.

Calcolo della dimensione del campione e randomizzazione L'analisi della potenza prima dell'inizio dello studio era difficile poiché non erano disponibili precedenti studi randomizzati controllati su questo prodotto dello studio. La dimensione del campione è stata determinata. È stata presa in considerazione la profondità di tastatura della tasca, con una differenza attesa di 0,82 mm e una deviazione standard di 0,61 mm. È stato calcolato che erano necessari 10 pazienti in ciascun gruppo per fornire l'80% di potenza con un alfa di 0,05. Nonostante questo numero basso e prendendo in considerazione gli studi che confrontano l'effetto aggiuntivo degli antibiotici con lo scaling e il rootplaning, è stato deciso di includere 24 pazienti in ciascun gruppo.

La randomizzazione dei pazienti è stata effettuata mediante randomizzazione a blocchi. Il coordinatore dello studio ha distribuito i flaconi codificati all'esaminatore al basale, alla visita di 4 settimane e di 8 settimane. Ad eccezione del coordinatore dello studio, tutti i pazienti e il personale dello studio erano all'oscuro dell'assegnazione del gruppo di studio. Prima di inviare i dati al biostatistico, il codice è stato infranto per raggruppare i pazienti nei gruppi appropriati.

Protocollo di trattamento Ai pazienti che soddisfacevano i criteri di ammissibilità è stato chiesto di partecipare allo studio e, dopo l'approvazione, di firmare un consenso informato. L'esame di base includeva la profondità della tasca al sondaggio a bocca piena, la recessione gengivale e il sanguinamento al sondaggio misurato in sei siti per dente. Inoltre sono stati annotati gli indici gengivali della placca. È stato registrato l'indice di placca a bocca piena. Dopo l'esame parodontale di base e l'analisi microbica, è stata data un'istruzione di igiene orale (spazzolino da denti, scovolino interdentale). La terapia parodontale iniziale consisteva in un approccio di disinfezione a bocca intera in una fase. Tutte le procedure cliniche sono state eseguite dallo stesso parodontologo. Al paziente è stato chiesto di sciacquare per 2 minuti con una soluzione di clorexidina allo 0,12% senza alcool. Lo scaling e la levigatura radicolare sono stati eseguiti per 2 giorni consecutivi utilizzando uno scaler ad ultrasuoni con irrigazione di clorexidina allo 0,12% e con strumenti manuali. Tutte le superfici mucose sono state successivamente disinfettate e la lingua è stata spazzolata per 1 minuto. Inoltre, i partecipanti sono stati randomizzati nei 2 gruppi di trattamento: controllo o gruppo probiotico. Ai partecipanti del gruppo probiotico è stato chiesto di far sciogliere una compressa di probiotico sulla lingua 2 volte al giorno per 3 mesi. Ai partecipanti del gruppo di controllo è stato chiesto di fare lo stesso con una compressa placebo. Tutti i pazienti sono stati istruiti a utilizzare le compresse dopo essersi lavati i denti al mattino e alla sera. Le compresse probiotiche e placebo erano identiche per forma, consistenza, gusto e composizione, tranne per il fatto che per la compressa probiotica era stato aggiunto Streptococco. A tutti i pazienti è stato fornito lo stesso dentifricio. È stato chiesto di non utilizzare prodotti contenenti probiotici durante il corso dello studio. Né è stato consentito l'uso di farmaci con proprietà antinfiammatorie, clorexidina o altri collutori durante lo studio.

Nei punti temporali designati, sono state pianificate visite di follow-up. 30 giorni e 60 giorni dopo l'inizio della terapia sono state eseguite la valutazione clinica e l'analisi microbica. 90 giorni e 180 giorni dopo il trattamento iniziale sono stati registrati tutti i parametri basali.

Variabili degli esiti di interesse Misure di esito primarie La variabile di risposta primaria era la profondità di sondaggio della tasca. Tutti gli esami sono stati eseguiti con una sonda parodontale del North Carolina.

Misure di esito secondarie Le variabili di risposta secondarie erano recessione, livello di attacco clinico, sanguinamento, indice gengivale, indice di placca e parametri microbici.

Sono state eseguite sotto-analisi su queste variabili di esito tenendo conto del Pocket iniziale. Una tasca era considerata moderata se la sua tasca iniziale era compresa tra 4 e 6 mm e profonda se ≥7 mm. Il "rischio di progressione della malattia" è stato definito a livello di paziente. È stata calcolata la misura dell'esito della "necessità di intervento chirurgico". Un sito è stato considerato "necessario intervento chirurgico" se la tasca era ≥6 mm o 5 mm e il sanguinamento era positivo. Un dente era considerato bisognoso di intervento chirurgico se aveva almeno un sito che necessitava di intervento chirurgico. Un paziente era considerato bisognoso o operato se almeno un dente necessitava di intervento chirurgico.

Sono stati raccolti campioni microbiologici di placca sopragengivale e sottogengivale, saliva e lingua. Campioni di placca sopragengivale raggruppati sono stati prelevati con l'ausilio di curette sui quattro denti a radice singola con la tasca iniziale più profonda in ciascun quadrante. Prima del campionamento, i siti sono stati isolati dalla saliva con l'ausilio di rulli di cotone e poi asciugati con aria compressa. Tutta la placca sopragengivale da questi siti è stata dispersa. I campioni sono stati dispersi utilizzando un agitatore a vortice e immediatamente congelati a -20°C fino all'analisi. Sugli stessi denti sono stati raccolti campioni di placca sottogengivale raggruppati per sito. Dopo 10 secondi, i campioni sono stati trasferiti in una provetta Eppendorf sterile, come descritto I campioni di saliva sono stati ottenuti raccogliendo la saliva non stimolata in una tazza sterile. Infine il biofilm della lingua è stato raccolto con un batuffolo di cotone. Questi sono stati asciugati 10 volte sulla lingua partendo dal dorso della lingua.

Elaborazione dei campioni microbici Dopo aver terminato lo studio, i campioni congelati sono stati inviati in ghiaccio secco al reparto di Parodontologia, questi sono stati immediatamente congelati a -80°C all'arrivo. ogni campione è stato successivamente scongelato e centrifugato a 13.000 g. Il DNA batterico è stato estratto. È stato eseguito un test quantitativo per quantificare alcuni batteri.