メタボリックシンドロームに関連するマイクロRNAに対する食物摂取の影響 (EFCMRNAMS)

デザインを研究します。 これはランダム化された研究です。 Universidad Juárez Autónoma de Tabasco (UJAT) の新入生は、大学への入学手続きの一環として臨床検査を受けます。 DACS の登録者は女性が圧倒的に多いため、50 人の女性が参加するよう招待されます。 血液サンプルは、プロトコルの開始時と終了時に臨床的および分子分析のために採取されます（3か月）。 人体測定は、調査の開始時と終了時にも行われます。 3か月間、伝統的な料理を含む料理が週5日提供されます。 食品には、平均 600 Kcal、≤ 50 mg のコレステロール、≥ 10 g の繊維、≥ 130 g の野菜、および ≤ de 200 mg のナトリウムが含まれます。 各料理には、標準サイズのコーントルティーヤが 3 枚付いてきます。 対照群は、キャンパスのカフェテリアから提供される同様のカロリー比率で習慣的に消費されるファーストフードを受け取ります (Muñoz et al., 印刷中)。

人体測定学。 体格指数 (BMI) を決定するために、世界保健機関 (2011) のガイドラインに従って、体重計 (Básculas Nuevo León®、メキシコ) を備えた 200 kg の計量容量を持つ臨床天秤が使用されます。 天びんは、生徒募集中、毎日校正されます。 BMI は、メキシコの標準 NOM-043-SSA2-2011 (2012) に従って計算されます。 ヒップとウエストの周囲を測定するために、長さ 1.80 m、幅 1 cm のミリ単位の非伸縮性グラスファイバー テープが使用されます (Vitamex® Mexico)。 この地域の人口の場合、望ましい股関節の測定値は女性で 80 cm、男性で 90 cm です (WHO、2011 年)。 ウエスト/ヒップ比 (WHR) は、ウエストの周囲をヒップの周囲で割って計算されます。ここで、女性の場合は 0.85、男性の場合は 0.90 の値がカットオフ限界と見なされます (He et al., 2009)。 ウエストと身長の比率 (WHtR) は、ウエストの測定値を身長の測定値で割って計算され、0.5 未満の値が望ましいと見なされます (WHO、2011 年)。

生化学的パラメーター。 参加者からの血液サンプルは、12 時間の絶食期間の後、UJAT の臨床分析ラボの担当者によって入手されます。 滅菌器具を使用し、血液をVacutainer(登録商標)血清チューブ(BectonDickinson、フランクリン・レイクス、ニュージャージー、米国)に採取する。 グルコース (GPA)、トリグリセリド (TG)、および総コレステロール (TC) は、自動化された機器 VITROS® 250 (Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson、Rochester、NY、USA) で乾式分析法によって測定されます。同じ機器を使用して、肝機能検査、アルブミン、グロブリン、アルカリホスファターゼ、乳酸脱水素酵素、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ、アラニンアミノトランスフェラーゼを実施します。

糖化ヘモグロビン。 ＳｔａｎｂｉｏＬａｂ（登録商標）試薬キット（Ｂｏｅｒｎｅ、Ｔｅｘａｓ、ＵＳＡ）のＧｌｙｃｏｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎ Ｐｒｅ−Ｆｉｌを使用する。 各標準およびサンプルの吸光度範囲は、メーカーが提供する式に従って計算されます。 変換係数が使用され、結果は HbA1c として報告されます。 4.2% から 6.2% の間の値は正常と見なされます。

マイクロRNAの決定。 miRNA の測定には、Quiagen® の試薬キットを使用します。 キット miRNeasly Serum/Plasma を使用して RNA を取得します。 血液サンプルから RNA を精製したら、miScript II RT キットとバッファ miScript HiSpec を使用してオリゴ T レトロトランスクリプターゼ反応を行います。 その後、目的の miARN の増幅は、miScript miRNA ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) Array Human Diabetes キットを使用してリアルタイム サーモサイクラーで行われます。 アンプリコンを視覚化するために、研究者は miScript SYBR Green PCR キットを使用します。 結果は、転写レベルの違いを測定するリアルタイム サーモサイクラーのソフトウェアで評価されます。 サーモサイクラーは、選択した miARN: miR-320、miR-33a/b、miR-145、miR-335、および miR-124a の信号の増減を分析します。 Quiagen® の miScript Primer Assay を使用します。 増幅反応のコントロールとして、研究者はレトロトランスクリプターゼの効率のコントロールとして mi-rtc を使用し、線虫からの mir-3p を PCR コントロールとして使用します。

統計分析。 データ処理には、社会科学用統計パッケージのバージョン 21.0 (SPSS、シカゴ、イリノイ、米国) が使用されます。 データ分析には、中心傾向を持つ記述統計と分割表が使用されます。 関連サンプルの検定は、グループ内の変数を比較するために使用され、参加者の生化学的マーカーと性別に応じて、ピアソンの相関検定もグループと性別の間で変数を比較するために使用されます。 統計的有意性は p ≤ 0.05 に設定されます。

倫理的配慮。 この研究は、DACSの研究および倫理委員会に承認のために提出され、フアレス自治大学の研究部門、コードUJAT-DACS-2015-IA-08に登録されました。 この研究は、世界医師会のヘルシンキ宣言に準拠しています。 設計は、メキシコの健康研究に関する一般法に含まれる規制に準拠しています。