Efecto del consumo de alimentos en el microARN relacionado con el síndrome metabólico (EFCMRNAMS)

Diseño del estudio. Este es un estudio aleatorizado. Los estudiantes de primer año de la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco (UJAT) se someten a pruebas de laboratorio clínico como parte de su proceso de ingreso a la Universidad. Cincuenta mujeres serán invitadas a participar, porque la inscripción de DACS es predominantemente femenina. Se tomarán muestras de sangre para análisis clínicos y moleculares al inicio y al final del protocolo (tres meses). También se tomarán medidas antropométricas al inicio y al final del estudio. Durante los 3 meses, se proporcionará un plato con comida tradicional 5 días a la semana. El alimento contendrá una media de 600 Kcal, ≤ 50 mg de colesterol, ≥ 10 g de fibra, ≥ 130 g de vegetales y ≤ de 200 mg de sodio. Cada plato se acompañará con 3 tortillas de maíz tamaño estándar. El grupo control recibirá comida rápida de consumo habitual proporcionada por la cafetería del campus en una proporción calórica similar (Muñoz et al., en prensa)

Antropometría. Para la determinación del índice de masa corporal (IMC), según lineamientos de la Organización Mundial de la Salud (2011), se utilizará una balanza clínica con estadiómetro (Básculas Nuevo León®, México) con capacidad de pesaje de 200 kg. El saldo se calibrará diariamente durante todo el tiempo de contratación de los alumnos. El IMC se calculará de acuerdo a la norma mexicana NOM-043-SSA2-2011 (2012). Para la medición de perímetros de cadera y cintura se utilizarán cintas milimétricas de fibra de vidrio no extensibles, de 1.80 m de largo y 1 cm de ancho (Vitamex® México). Para la población de esta región, la medida de cadera deseable para las mujeres es de 80 cm y de 90 cm para los hombres (OMS, 2011). El índice cintura/cadera (RCC) se calcula dividiendo el perímetro de la cintura por el perímetro de la cadera, donde se consideran como límites de corte un valor de 0,85 para mujeres y de 0,90 para hombres (He et al., 2009). La relación cintura-altura (WHtR) se calcula dividiendo la medida de la cintura por la de la altura, donde se considera deseable un valor inferior a 0,5 (OMS, 2011).

Parámetros bioquímicos. Las muestras de sangre de los participantes serán obtenidas por personal del laboratorio de análisis clínicos de la UJAT luego de un período de ayuno de 12 horas. Se utilizará equipo estéril y la sangre se recolectará en tubos Vacutainer® Serum (BectonDickinson, Franklin Lakes, New Jersey, EE. UU.). La glucosa (GPA), los triglicéridos (TG) y el colesterol total (CT) se medirán mediante metodología analítica en seco en un equipo automatizado VITROS® 250 (Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson, Rochester, NY, EE. UU.). mismo equipo se utilizará para realizar pruebas de función hepática, albúmina, globulinas, fosfatasa alcalina, deshidrogenasa láctica, aspartato aminotransferasa, alanina aminotransferasa.

Hemoglobina glicosilada. Se utilizará el kit de reactivos Glycohemoglobin Pre-Fil of StanbioLab® (Boerne, Texas, EE. UU.). Para cada estándar y muestra, el rango de absorbancia se calculará según la fórmula proporcionada por el fabricante. Se utilizará el factor de conversión y los resultados se informarán como HbA1c. Valores entre 4,2% y 6,2% se considerarán normales.

determinación de microARN. Para la determinación de miARN se utilizarán los kits de reactivos de Quiagen®. Para la obtención del ARN se utilizará el kit miRNeasly Serum/Plasma. Una vez que se haya purificado el ARN de las muestras de sangre, se realizará la reacción de retrotranscriptasa de oligo T utilizando el kit miScript II RT y el tampón miScript HiSpec. Posteriormente, se realizará la amplificación del miARN de interés en un termociclador en tiempo real con el kit miScript miRNA polimerase chain react (PCR) Array Human Diabetes. Para visualizar los amplicones, los investigadores utilizarán el kit miScript SYBR Green PCR. Los resultados se evaluarán con el software del termociclador en tiempo real para medir las diferencias en los niveles de transcripción. El termociclador analizará los incrementos-decrementos en las señales de los miARN seleccionados: miR-320, miR-33a/b, miR-145, miR-335 y miR-124a. Se utilizará el ensayo de imprimación miScript de Quiagen®. Como controles de las reacciones de amplificación, los investigadores utilizarán mi-rtc como control de la eficacia de la retrotranscriptasa y mir-3p de C. elegans como control de PCR.

Análisis estadístico. Para el procesamiento de datos se utilizará la versión 21.0 del Paquete Estadístico para las Ciencias Sociales (SPSS, Chicago, Illinois, EE. UU.). Para el análisis de datos se utilizará estadística descriptiva con tendencia central, así como tablas de contingencia. Se utilizará la prueba para muestras relacionadas para comparar variables en los grupos, según los marcadores bioquímicos y género de los participantes, también se utilizará la prueba de correlación de Pearson para comparar variables entre grupos y género. La significación estadística se fijará en p ≤ 0,05.

Consideraciones éticas. El estudio fue sometido a aprobación de los Comités de Investigación y Ética de la DACS para ser registrado en la División de Investigación de la Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, código UJAT-DACS-2015-IA-08. El estudio cumple con la Declaración de Helsinki de la Asociación Médica Mundial. El diseño cumple con las normas contenidas en la Ley General de Investigaciones en Salud de México.