Effekt av matkonsumtion på mikroRNA relaterat till metabolt syndrom (EFCMRNAMS)

Studera design. Detta är en randomiserad studie. Nybörjarstudenter vid Universidad Juárez Autónoma de Tabasco (UJAT) utsätts för kliniska laboratorietester som en del av deras registreringsprocess till universitetet. Femtio kvinnor kommer att bjudas in att delta, eftersom DACS registrering domineras av kvinnor. Blodprover kommer att tas för kliniska och molekylära analyser i början och slutet av protokollet (tre månader). Antropometriska mätningar kommer att göras även i början och slutet av studien. Under de tre månaderna kommer en rätt som innehåller traditionell mat att tillhandahållas 5 dagar i veckan. Maten kommer att innehålla i genomsnitt 600 Kcal, ≤ 50 mg kolesterol, ≥ 10 g fiber, ≥ 130 g grönsaker och ≤ de 200 mg natrium. Varje rätt kommer att åtföljas av 3 majstortillas i standardstorlek. Kontrollgruppen kommer att få vanligt konsumerad snabbmat som tillhandahålls av cafeterian på campus i en liknande kaloriandel (Muñoz et al., i pressen)

Antropometri. För att bestämma kroppsmassaindexet (BMI), enligt Världshälsoorganisationens (2011) riktlinjer, kommer en klinisk våg med en stadiometer (Básculas Nuevo León®, Mexiko) med en vägningskapacitet på 200 kg att användas. Saldot kommer att kalibreras dagligen under hela rekryteringstiden. BMI kommer att beräknas enligt den mexikanska standarden NOM-043-SSA2-2011 (2012). För att mäta höft- och midjeomkrets kommer millimetriska icke-töjbara glasfiberband att användas, med en längd på 1,80 m och en bredd på 1 cm (Vitamex® Mexico). För befolkningen i denna region är det önskvärda höftmåttet för kvinnor 80 cm och 90 cm för män (WHO, 2011). Midje/höftkvoten (WHR) beräknas genom att dividera midjeomkretsen med höftomkretsen, där ett värde på 0,85 för kvinnor och på 0,90 för män anses vara gränsvärdena (He et al., 2009). Midje-till-höjd-förhållandet (WHtR) beräknas genom att dividera midjemåttet med höjden, där ett värde under 0,5 anses vara önskvärt (WHO, 2011).

Biokemiska parametrar. Blodprover från deltagarna kommer att tas av personal från UJAT:s kliniska analyslaboratorium efter en 12-timmars fasteperiod. Steril utrustning kommer att användas och blod kommer att samlas in i Vacutainer® serumrör (BectonDickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA). Glukos (GPA), triglycerider (TG) och totalt kolesterol (TC) kommer att mätas med hjälp av en torr analytisk metodik i en automatiserad utrustning VITROS® 250 (Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson, Rochester, NY, USA). Samma utrustning kommer att användas för att utföra leverfunktionstester, albumin, globuliner, alkaliskt fosfatas, mjölksyradehydrogenas, aspartataminotransferas, alaninaminotransferas.

Glykosylerat hemoglobin. Glycohemoglobin Pre-Fil av StanbioLab®-kit med reagenser (Boerne, Texas, USA) kommer att användas. För varje standard och prov kommer absorbansintervallet att beräknas enligt formeln som tillhandahålls av tillverkaren. Omvandlingsfaktorn kommer att användas och resultaten kommer att rapporteras som HbA1c. Värden mellan 4,2 % och 6,2 % anses vara normala.

mikroRNA-bestämning. För bestämning av miRNA kommer reagenssatserna av Quiagen® att användas. Kitet miRNeasly Serum/Plasma kommer att användas för att erhålla RNA. När RNA har renats från blodproverna kommer oligo T retrotranskriptasreaktionen att utföras med hjälp av miScript II RT kit och bufferten miScript HiSpec. Efteråt kommer amplifieringen av miARN av intresse att göras i en realtids termocykler med miScript miRNA polimerase chain reaction (PCR) Array Human Diabetes kit. För att visualisera amplikoner kommer utredarna att använda miScript SYBR Green PCR-kit. Resultaten kommer att bedömas med programvaran för realtidstermocyklern för att mäta skillnader i transkriptionsnivåer. Termocyklern kommer att analysera inkrement-minskningarna i signalerna för den valda miARN: miR-320, miR-33a/b, miR-145, miR-335 och miR-124a. MiScript Primer Assay från Quiagen® kommer att användas. Som kontroller av amplifieringsreaktionerna kommer utredarna att använda mi-rtc som kontroll av effektiviteten av retrotranskriptaset och mir-3p från C. elegans som en PCR-kontroll.

Statistisk analys. För databehandling kommer version 21.0 av Statistics Package for the Social Sciences (SPSS, Chicago, Illinois, USA) att användas. För dataanalys kommer deskriptiv statistik med central tendens att användas, samt beredskapstabeller. Testet för relaterade prover kommer att användas för att jämföra variabler i grupperna, beroende på de biokemiska markörerna och kön på deltagarna kommer Pearsons korrelationstest också att användas för att jämföra variabler mellan grupper och kön. Statistisk signifikans sätts till p ≤ 0,05.

Etiska betänkligheter. Studien lämnades in för godkännande till DACS:s forsknings- och etikkommittéer för att registreras vid forskningsavdelningen vid Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, kod UJAT-DACS-2015-IA-08. Studien överensstämmer med Helsingforsdeklarationen från World Medical Association. Designen överensstämmer med bestämmelserna i Mexikos allmänna lag om hälsoforskning.