음식 섭취가 대사증후군과 관련된 microRNA에 미치는 영향 (EFCMRNAMS)

연구 디자인. 이것은 무작위 연구입니다. UJAT(Universidad Juárez Autónoma de Tabasco)의 신입생은 대학 등록 과정의 일부로 임상 실험실 테스트를 받습니다. DACS의 등록은 여성이 압도적이기 때문에 50명의 여성이 참여하도록 초대됩니다. 프로토콜의 시작과 끝(3개월)에 임상 및 분자 분석을 위해 혈액 샘플을 채취합니다. 인체측정학적 측정은 연구 시작과 종료 시에도 수행됩니다. 3개월 동안 주 5일 전통음식을 담은 요리가 제공됩니다. 음식에는 평균 600Kcal, ≤50mg의 콜레스테롤, ≥10g의 섬유질, ≥130g의 야채, ​​≤200mg의 나트륨이 포함됩니다. 각 요리에는 표준 크기의 옥수수 토르티야 3개가 함께 제공됩니다. 통제 그룹은 비슷한 칼로리 비율로 캠퍼스 카페테리아에서 제공하는 습관적으로 소비되는 패스트 푸드를 받게 됩니다(Muñoz et al., in press).

인체 측정학. 세계보건기구(2011) 지침에 따라 체질량 지수(BMI)를 결정하기 위해 체중 200kg의 stadiometer(Básculas Nuevo León®, 멕시코)가 있는 임상 저울이 사용됩니다. 저울은 학생 모집 기간 동안 매일 보정됩니다. BMI는 멕시코 표준 NOM-043-SSA2-2011(2012)에 따라 계산됩니다. 엉덩이와 허리둘레를 측정하기 위해 길이 1.80m, 너비 1cm(Vitamex® Mexico)의 밀리미터 길이의 비신축성 섬유 유리 테이프가 사용됩니다. 이 지역 인구의 경우 여성의 바람직한 고관절 치수는 80cm, 남성의 경우 90cm입니다(WHO, 2011). 허리/엉덩이 비율(WHR)은 허리 둘레를 엉덩이 둘레로 나누어 계산하며, 여기서 여성의 경우 0.85, 남성의 경우 0.90을 컷오프 한계로 간주합니다(He et al., 2009). 허리-신장 비율(WHtR)은 허리둘레를 키로 나누어 계산하며 0.5 미만을 바람직한 것으로 간주합니다(WHO, 2011).

생화학적 매개변수. 참가자의 혈액 샘플은 12시간 금식 후 UJAT의 임상 분석 실험실 직원이 조달합니다. 멸균 장비를 사용하고 Vacutainer® Serum 튜브(BectonDickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA)에 혈액을 채취합니다. 포도당(GPA), 트리글리세리드(TG) 및 총 콜레스테롤(TC)은 자동화 장비 VITROS® 250(Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson, Rochester, NY, USA)에서 건식 분석 방법을 통해 측정됩니다. 동일한 장비를 사용하여 간 기능 검사, 알부민, 글로불린, 알칼리성 인산분해효소, 젖산 탈수소효소, 아스파르테이트 아미노전이효소, 알라닌 아미노전이효소를 수행합니다.

글리코실화된 헤모글로빈. 시약의 StanbioLab® 키트(Boerne, Texas, USA)의 Glycohemoglobin Pre-Fil이 사용됩니다. 각 표준 및 샘플에 대해 흡광도 범위는 제조업체에서 제공한 공식에 따라 계산됩니다. 전환 계수가 사용되며 결과는 HbA1c로 보고됩니다. 4.2%에서 6.2% 사이의 값은 정상으로 간주됩니다.

마이크로RNA 결정. miRNA 측정을 위해 Quiagen®의 시약 키트가 사용됩니다. 키트 miRNeasly Serum/Plasma는 RNA를 얻기 위해 사용됩니다. RNA가 혈액 샘플에서 정제되면 oligo T retrotranscriptase 반응이 miScript II RT 키트와 버퍼 miScript HiSpec을 사용하여 수행됩니다. 그 후 miScript miRNA polimerase chain reaction (PCR) Array Human Diabetes 키트를 사용하여 관심 있는 miARN의 증폭이 실시간 열순환기에서 이루어집니다. 앰플리콘을 시각화하기 위해 조사관은 miScript SYBR Green PCR 키트를 사용합니다. 전사 수준의 차이를 측정하기 위해 실시간 열순환기 소프트웨어로 결과를 평가합니다. 열순환기는 선택한 miARN(miR-320, miR-33a/b, miR-145, miR-335 및 miR-124a)의 신호에서 증가-감소를 분석합니다. Quiagen®의 miScript Primer Assay가 사용됩니다. 증폭 반응의 제어로서 연구자들은 레트로트랜스크립타제의 효율성 제어로서 mi-rtc를 사용하고 PCR 제어로서 C. elegans의 mir-3p를 사용할 것입니다.

통계 분석. 데이터 처리를 위해 사회 과학용 통계 패키지(SPSS, Chicago, Illinois, USA) 버전 21.0이 사용됩니다. 데이터 분석을 위해 분할표뿐만 아니라 중심 경향이 있는 기술 통계가 사용됩니다. 관련 샘플에 대한 테스트는 참가자의 생화학적 마커와 성별에 따라 그룹 내 변수를 비교하는 데 사용되며 Pearson의 상관관계 테스트는 그룹 간 변수와 성별을 비교하는 데 사용됩니다. 통계적 유의성은 p ≤ 0.05로 설정됩니다.

윤리적 고려 사항. 이 연구는 Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, 코드 UJAT-DACS-2015-IA-08의 연구 부서에 등록하기 위해 DACS의 연구 및 윤리 위원회에 승인을 위해 제출되었습니다. 이 연구는 세계 의학 협회의 헬싱키 선언을 준수합니다. 디자인은 멕시코 건강 연구에 관한 일반법에 포함된 규정을 준수합니다.