Effekt af fødevareforbrug på mikroRNA relateret til metabolisk syndrom (EFCMRNAMS)

Studere design. Dette er en randomiseret undersøgelse. Freshman-studerende ved Universidad Juárez Autónoma de Tabasco (UJAT) udsættes for kliniske laboratorietests som en del af deres tilmeldingsproces til universitetet. 50 kvinder vil blive inviteret til at deltage, fordi DACS' tilmelding er domineret af kvinder. Blodprøver vil blive taget til kliniske og molekylære analyser ved starten og slutningen af ​​protokollen (tre måneder). Antropometriske målinger vil også blive taget ved starten og slutningen af ​​undersøgelsen. I løbet af de 3 måneder vil der blive serveret en ret med traditionel mad 5 dage om ugen. Maden vil i gennemsnit indeholde 600 Kcal, ≤ 50 mg kolesterol, ≥ 10 g fibre, ≥ 130 g grøntsager og ≤ de 200 mg natrium. Hver ret vil blive ledsaget af 3 majstortillas i standardstørrelse. Kontrolgruppen vil modtage sædvanligt indtaget fastfood leveret af cafeteriaet på campus i et tilsvarende kalorieindhold (Muñoz et al., i pressen)

Antropometri. For at bestemme body mass index (BMI) vil der ifølge World Health Organization (2011) retningslinjer blive brugt en klinisk vægt med et stadiometer (Básculas Nuevo León®, Mexico) med en vejekapacitet på 200 kg. Balancen vil blive kalibreret dagligt under hele rekrutteringstiden for studerende. BMI vil blive beregnet i henhold til den mexicanske standard NOM-043-SSA2-2011 (2012). Til måling af hofte- og taljeomkreds vil der blive brugt millimetriske ikke-udvidelige glasfiberbånd med en længde på 1,80 m og en bredde på 1 cm (Vitamex® Mexico). For befolkningen i denne region er det ønskelige hoftemål for kvinder på 80 cm og på 90 cm for mænd (WHO, 2011). Talje/hofteforholdet (WHR) beregnes ved at dividere taljeomkredsen med hofteomkredsen, hvor en værdi på 0,85 for kvinder og på 0,90 for mænd betragtes som afskæringsgrænserne (He et al., 2009). Talje-til-højde-forholdet (WHtR) beregnes ved at dividere taljemålet med højden, hvor en værdi under 0,5 anses for at være ønskelig (WHO, 2011).

Biokemiske parametre. Blodprøver fra deltagere vil blive udtaget af personale fra UJAT's kliniske analyselaboratorium efter en 12-timers fasteperiode. Sterilt udstyr vil blive brugt, og blod vil blive opsamlet i Vacutainer® serumrør (BectonDickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA). Glukose (GPA), triglycerider (TG) og total kolesterol (TC) vil blive målt ved hjælp af en tør analytisk metodologi i et automatiseret udstyr VITROS® 250 (Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson, Rochester, NY, USA). samme udstyr vil blive brugt til at udføre leverfunktionstests, albumin, globuliner, alkalisk fosfatase, mælkesyredehydrogenase, aspartataminotransferase, alaninaminotransferase.

Glykosyleret hæmoglobin. Glycohæmoglobin Pre-Fil af StanbioLab® kit af reagenser (Boerne, Texas, USA) vil blive brugt. For hver standard og prøve vil absorbansområdet blive beregnet i henhold til den formel, producenten har angivet. Omregningsfaktoren vil blive brugt, og resultater vil blive rapporteret som HbA1c. Værdier mellem 4,2 % og 6,2 % vil blive betragtet som normale.

mikroRNA-bestemmelse. Til bestemmelse af miRNA vil reagenssættene af Quiagen® blive brugt. Kittet miRNeasly Serum/Plasma vil blive brugt til at opnå RNA. Når RNA'et er blevet oprenset fra blodprøverne, udføres oligo T retrotranscriptase reaktionen ved hjælp af miScript II RT kit og buffer miScript HiSpec. Bagefter vil amplifikationen af ​​miARN af interesse blive foretaget i en real-time thermocycler med miScript miRNA polimerase chain reaction (PCR) Array Human Diabetes kit. For at visualisere amplikoner vil efterforskerne bruge miScript SYBR Green PCR kit. Resultater vil blive vurderet med softwaren fra real-time thermocycler for at måle forskelle i transkriptionsniveauer. Termocykleren vil analysere stigningerne-fald i signalerne fra det valgte miARN: miR-320, miR-33a/b, miR-145, miR-335 og miR-124a. MiScript Primer Assay fra Quiagen® vil blive brugt. Som kontroller af amplifikationsreaktionerne vil efterforskerne bruge mi-rtc som kontrol af effektiviteten af ​​retrotranskriptasen og mir-3p fra C. elegans som en PCR-kontrol.

Statistisk analyse. Til databehandling vil version 21.0 af Statistics Package for the Social Sciences (SPSS, Chicago, Illinois, USA) blive brugt. Til dataanalyse vil der blive brugt beskrivende statistik med central tendens, samt beredskabstabeller. Testen for relaterede prøver vil blive brugt til at sammenligne variabler i grupperne, afhængigt af de biokemiske markører og deltagernes køn, vil Pearsons korrelationstest også blive brugt til at sammenligne variabler mellem grupper og køn. Statistisk signifikans vil blive sat til p ≤ 0,05.

Etiske overvejelser. Undersøgelsen blev indsendt til godkendelse til DACS's forsknings- og etiske udvalg for at blive registreret ved forskningsafdelingen på Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, kode UJAT-DACS-2015-IA-08. Undersøgelsen er i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen fra World Medical Association. Designet overholder reglerne i Mexicos generelle lov om sundhedsforskning.