Effet de la consommation alimentaire sur les microARN liés au syndrome métabolique (EFCMRNAMS)

Étudier le design. Il s'agit d'une étude randomisée. Les étudiants de première année de l'Universidad Juárez Autónoma de Tabasco (UJAT) sont soumis à des tests de laboratoire clinique dans le cadre de leur processus d'inscription à l'Université. Cinquante femmes seront invitées à participer, car les inscriptions à la DACS sont majoritairement féminines. Des prélèvements sanguins seront effectués pour des analyses cliniques et moléculaires au début et à la fin du protocole (trois mois). Des mesures anthropométriques seront également prises au début et à la fin de l'étude. Pendant les 3 mois, un plat contenant des aliments traditionnels sera fourni 5 jours par semaine. L'aliment contiendra en moyenne 600 Kcal, ≤ 50 mg de cholestérol, ≥ 10 g de fibres, ≥ 130 g de légumes et ≤ de 200 mg de sodium. Chaque plat sera accompagné de 3 tortillas de maïs de taille standard. Le groupe témoin recevra de la nourriture rapide consommée habituellement fournie par la cafétéria du campus à une proportion calorique similaire (Muñoz et al., sous presse)

Anthropométrie. Pour déterminer l'indice de masse corporelle (IMC), conformément aux directives de l'Organisation mondiale de la santé (2011), une balance clinique avec un stadiomètre (Básculas Nuevo León®, Mexique) d'une capacité de pesée de 200 kg sera utilisée. La balance sera calibrée quotidiennement pendant toute la durée du recrutement des étudiants. L'IMC sera calculé selon la norme mexicaine NOM-043-SSA2-2011 (2012). Pour mesurer les périmètres des hanches et de la taille, des rubans millimétriques en fibre de verre non extensible seront utilisés, d'une longueur de 1,80 m et d'une largeur de 1 cm (Vitamex® Mexico). Pour la population de cette région, le tour de hanche souhaitable pour les femmes est de 80 cm et de 90 cm pour les hommes (OMS, 2011). Le rapport taille/hanches (WHR) est calculé en divisant le périmètre de la taille par le périmètre des hanches, où une valeur de 0,85 pour les femmes et de 0,90 pour les hommes est considérée comme les limites (He et al., 2009). Le rapport taille-taille (WHtR) est calculé en divisant le tour de taille par celui de la taille, une valeur inférieure à 0,5 étant considérée comme souhaitable (OMS, 2011).

Paramètres biochimiques. Les échantillons de sang des participants seront obtenus par le personnel du laboratoire d'analyses cliniques de l'UJAT après une période de jeûne de 12 heures. Un équipement stérile sera utilisé et le sang sera prélevé dans des tubes Vacutainer® Serum (BectonDickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA). Le glucose (GPA), les triglycérides (TG) et le cholestérol total (TC) seront mesurés au moyen d'une méthodologie analytique sèche dans un équipement automatisé VITROS® 250 (Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson, Rochester, NY, USA). le même équipement sera utilisé pour effectuer des tests de la fonction hépatique, albumine, globulines, phosphatase alcaline, déshydrogénase lactique, aspartate aminotransférase, alanine aminotransférase.

Hémoglobine glycosylée. Le kit de réactifs Glycohemoglobin Pre-Fil de StanbioLab® (Boerne, Texas, USA) sera utilisé. Pour chaque standard et échantillon, la plage d'absorbance sera calculée selon la formule fournie par le fabricant. Le facteur de conversion sera utilisé et les résultats seront rapportés comme HbA1c. Des valeurs comprises entre 4,2 % et 6,2 % seront considérées comme normales.

détermination des microARN. Pour la détermination des miARN, les kits de réactifs de Quiagen® seront utilisés. Le kit miRNeasly Serum/Plasma sera utilisé pour obtenir l'ARN. Une fois l'ARN purifié des échantillons de sang, la réaction de l'oligo T rétrotranscriptase sera réalisée à l'aide du kit miScript II RT et du tampon miScript HiSpec. Par la suite, l'amplification du miARN d'intérêt sera réalisée dans un thermocycleur en temps réel avec le kit miScript miRNA polymerase chain reaction (PCR) Array Human Diabetes. Pour visualiser les amplicons, les enquêteurs utiliseront le kit miScript SYBR Green PCR. Les résultats seront évalués avec le logiciel du thermocycleur en temps réel pour mesurer les différences dans les niveaux de transcription. Le thermocycleur analysera les incréments-décréments dans les signaux du miARN sélectionné : miR-320, miR-33a/b, miR-145, miR-335 et miR-124a. Le test d'amorce miScript de Quiagen® sera utilisé. Comme contrôles des réactions d'amplification, les enquêteurs utiliseront mi-rtc comme contrôle de l'efficacité de la rétrotranscriptase et mir-3p de C. elegans comme contrôle PCR.

Analyses statistiques. Pour le traitement des données, la version 21.0 du Statistics Package for the Social Sciences (SPSS, Chicago, Illinois, USA) sera utilisée. Pour l'analyse des données, des statistiques descriptives à tendance centrale seront utilisées, ainsi que des tableaux de contingence. Le test pour les échantillons liés sera utilisé pour comparer les variables dans les groupes, selon les marqueurs biochimiques et le sexe des participants, le test de corrélation de Pearson sera également utilisé pour comparer les variables entre les groupes et le sexe. La signification statistique sera fixée à p ≤ 0,05.

Considérations éthiques. L'étude a été soumise pour approbation aux comités de recherche et d'éthique du DACS pour être enregistrée à la Division de la recherche de l'Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, code UJAT-DACS-2015-IA-08. L'étude est conforme à la déclaration d'Helsinki de l'Association médicale mondiale. La conception est conforme aux réglementations contenues dans la loi générale sur la recherche en santé du Mexique.