Effekt av matforbruk på mikroRNA relatert til metabolsk syndrom (EFCMRNAMS)

Studere design. Dette er en randomisert studie. Freshman-studenter ved Universidad Juárez Autónoma de Tabasco (UJAT) blir utsatt for kliniske laboratorietester som en del av påmeldingsprosessen til universitetet. Femti kvinner vil bli invitert til å delta, fordi DACS' påmelding domineres av kvinner. Det vil bli tatt blodprøver for kliniske og molekylære analyser ved starten og slutten av protokollen (tre måneder). Antropometriske målinger vil også bli tatt ved starten og slutten av studien. I løpet av de 3 månedene vil det bli servert en rett som inneholder tradisjonell mat 5 dager i uken. Maten vil inneholde gjennomsnittlig 600 kcal, ≤ 50 mg kolesterol, ≥ 10 g fiber, ≥ 130 g grønnsaker og ≤ de 200 mg natrium. Hver rett vil bli ledsaget av 3 maistortillas i standardstørrelse. Kontrollgruppen vil motta vanlig konsumert hurtigmat levert av kafeteriaen på campus i en lignende kaloriandel (Muñoz et al., i pressen)

Antropometri. For å bestemme kroppsmasseindeksen (BMI), i henhold til retningslinjer fra Verdens helseorganisasjon (2011), vil det brukes en klinisk balanse med et stadiometer (Básculas Nuevo León®, Mexico) med en veiekapasitet på 200 kg. Balansen vil bli kalibrert daglig under hele studentenes rekrutteringstid. BMI vil bli beregnet i henhold til den meksikanske standarden NOM-043-SSA2-2011 (2012). For å måle hofte- og midjeomkrets vil det brukes millimetriske ikke-utvidbare glassfiberbånd, med en lengde på 1,80 m og en bredde på 1 cm (Vitamex® Mexico). For befolkningen i denne regionen er det ønskelige hoftemålet for kvinner på 80 cm og 90 cm for menn (WHO, 2011). Midje/hofte-forholdet (WHR) beregnes ved å dele midjeomkretsen på hofteomkretsen, hvor en verdi på 0,85 for kvinner og på 0,90 for menn regnes som grenseverdiene (He et al., 2009). Midje-til-høyde-forholdet (WHtR) beregnes ved å dele midjemålet med høyden, der en verdi under 0,5 anses som ønskelig (WHO, 2011).

Biokjemiske parametere. Blodprøver fra deltakerne vil bli skaffet av personell ved UJATs kliniske analyselaboratorium etter en 12-timers fasteperiode. Sterilt utstyr vil bli brukt og blod vil bli samlet i Vacutainer® Serum-rør (BectonDickinson, Franklin Lakes, New Jersey, USA). Glukose (GPA), triglyserider (TG) og totalkolesterol (TC) vil bli målt ved hjelp av en tørr analytisk metodikk i et automatisert utstyr VITROS® 250 (Ortho-Clinical Diagnostics Johnson & Johnson, Rochester, NY, USA). samme utstyr vil bli brukt til å utføre leverfunksjonstester, albumin, globuliner, alkalisk fosfatase, melkesyredehydrogenase, aspartataminotransferase, alaninaminotransferase.

Glykosylert hemoglobin. Glycohemoglobin Pre-Fil av StanbioLab®-sett med reagenser (Boerne, Texas, USA) vil bli brukt. For hver standard og prøve vil absorbansområdet beregnes i henhold til formelen gitt av produsenten. Konverteringsfaktoren vil bli brukt, og resultatene vil bli rapportert som HbA1c. Verdier mellom 4,2 % og 6,2 % vil anses som normale.

mikroRNA-bestemmelse. For bestemmelse av miRNA vil reagenssettene til Quiagen® bli brukt. Settet miRNeasly Serum/Plasma vil bli brukt for å oppnå RNA. Når RNA er renset fra blodprøvene, vil oligo T retrotranscriptase-reaksjonen utføres ved å bruke miScript II RT-settet og buffer miScript HiSpec. Etterpå vil amplifiseringen av miARN av interesse gjøres i en sanntids termosykler med miScript miRNA polimerase kjedereaksjon (PCR) Array Human Diabetes kit. For å visualisere amplikoner vil etterforskerne bruke miScript SYBR Green PCR-settet. Resultatene vil bli vurdert med programvaren til sanntids termosykleren for å måle forskjeller i transkripsjonsnivåer. Termosykleren vil analysere inkrementene-reduksjonene i signalene til den valgte miARN: miR-320, miR-33a/b, miR-145, miR-335 og miR-124a. MiScript Primer Assay fra Quiagen® vil bli brukt. Som kontroller av amplifikasjonsreaksjonene vil etterforskerne bruke mi-rtc som kontroll av effektiviteten til retrotranskriptasen og mir-3p fra C. elegans som en PCR-kontroll.

Statistisk analyse. For databehandling vil versjon 21.0 av Statistics Package for the Social Sciences (SPSS, Chicago, Illinois, USA) brukes. For dataanalyse vil det benyttes deskriptiv statistikk med sentral tendens, samt beredskapstabeller. Testen for relaterte prøver vil bli brukt til å sammenligne variabler i gruppene, i henhold til biokjemiske markører og kjønn på deltakerne, vil Pearsons korrelasjonstest også brukes til å sammenligne variabler mellom grupper og kjønn. Statistisk signifikans vil bli satt til p ≤ 0,05.

Etiske vurderinger. Studien ble sendt inn for godkjenning til forsknings- og etikkkomiteene til DACS for å bli registrert ved forskningsavdelingen ved Universidad Juárez Autónoma de Tabasco, kode UJAT-DACS-2015-IA-08. Studien er i samsvar med Helsinki-erklæringen fra World Medical Association. Designet samsvarer med forskriftene i Mexicos generelle lov om helseforskning.