MDSおよびAML患者に対するアザシチジンと組み合わせたペプチドワクチン接種 (AZACTA)

前書き

根治治療を提供できない高リスクの骨髄異形成症候群 (MDS) および急性骨髄性白血病 (AML) の患者は、予後が悪く、生存期間の中央値は 11.5 か月です。 現在、この患者グループの生存期間を延長することが示されている登録薬は 1 つだけです。低メチル化剤アザシチジン (5-アザシチジンまたは Vidaza® としても知られています)。 この治療は治癒的ではありませんが、生存期間の中央値を約 2 年に延ばします。 主な死亡原因は進行性疾患であり、新しい治療オプションに対する大きなニーズがあります。

この研究では、高リスク骨髄異形成症候群または急性骨髄性白血病患者の治療のために、ペプチドワクチン接種の実験的免疫療法とアザシチジンの標準療法を組み合わせます。 私たちのプロジェクトは、免疫療法と従来の治療法の組み合わせに関する知識を拡大することが期待されており、この治療法をさらに発展させるために不可欠です。

骨髄異形成症候群（MDS）

造血幹細胞における遺伝的変化とエピジェネティックな変化の両方の蓄積は、MDSの発症の背景と考えられています。 疾患の初期段階では、アポトーシスが増加しますが、疾患が高リスクの MDS または AML に進行するにつれて、染色体の切断、点突然変異、および腫瘍抑制遺伝子のプロモーターの過剰メチル化が蓄積され、より攻撃的で増殖性が高くなります。疾患。 臨床症状は、貧血、繰り返される感染症、および機能不全の骨髄に関連する出血エピソードです。

現在、MDS の唯一の根治治療オプションは、同種骨髄移植です。 これはリスクの高い治療であり、適切なドナーを持つ若い患者にのみ実行可能です。 2009 年に第 III 相試験 (AZA 001) が発表され、高リスクの MDS および AML 患者が

アザシチジン

アザシチジンの効果は、すべての患者で即時に現れるわけではないため、患者が治療に反応するかどうかを判断するには、最低でも 5 ～ 6 サイクル続ける必要があります。 現在、アザシチジンは、高リスクMDSおよびAMLのすべての患者に対する標準治療です。

この試験の参加者にとって、アザシチジンは標準療法であり、標準的な投薬計画に従って投与され、参加者は標準的な基準に従って治療反応について評価されます。

腫瘍関連抗原

がんワクチンの背後にある原理は、正常細胞と悪性細胞を区別する免疫系の能力に基づいています。 免疫系は、悪性細胞の表面で変化したパターンのペプチド発現を認識します。 変化したパターンには、質的に変化した細胞タンパク質の発現、正常に存在するタンパク質の単純な過剰発現、またはその組織で通常発現しないタンパク質/糖タンパク質の新規発現が含まれる場合があります。 このカテゴリーの免疫認識タンパク質は、腫瘍関連抗原として知られています。 タンパク質が細胞内で分解されると、ペプチドは組織型分子 (HLA 分子) との複合体としてこれらの細胞の表面に提示されます。 次に、T細胞は、そのT細胞受容体を介してペプチド-HLA複合体を認識し、十分なプライミングが行われると、腫瘍細胞を殺す可能性があります.

本研究では、がん精巣抗原 (CTA) のグループが特に注目されています。これは、これらの発現がメチル化によって調節されることが知られており、アザシチジンなどの低メチル化治療の影響を受けるためです。 CTA は免疫原性であることが知られており、免疫特権部位でのみ発現するため、免疫応答の範囲外で、癌細胞上で発現するため、治療上の癌ワクチン接種の理想的な標的となっています。

ワクチンの設計

NY-ESO-1、MAGE-A3、および PRAME を含む、アザシチジン治療後に豊富な再発現が示されている 3 つの CTA を具体的に選択しました。 WT-1 は、このタンパク質が血液悪性腫瘍における重要な抗原であることが証明されており、同様にアザシチジン治療に応答してアップレギュレートされるため、さらに含まれています。

私たちが選択したペプチドは、以前にこの特定の組み合わせで一緒に使用されたことはありませんでしたが、治療用ワクチン接種として個別に使用することはよく研究されています. より小さなペプチド配列と全長タンパク質の両方が利用されています。

誘導および T 細胞応答のための合成長いペプチドの使用は、マウスとヒトの両方で最小ペプチド配列とは対照的に優れた効果を示し、さらに合成長いペプチドは効率的に処理され、CD4 および CD8 T 細胞の両方に提示されることが示されています。免疫系の。 また、長いペプチドには、患者の HLA タイプに応じて、いくつかの異なる T 細胞エピトープを提示できるという利点があります。 したがって、長いペプチドの選択は、患者の HLA タイプの影響を最小限に抑えるため、本研究では、HLA 発現に基づく事前の選択なしで参加者を含めることができます。

選択したペプチドは 25 から 29 アミノ酸であり、懸濁液として Montanide ISA-51 と混合されます。 Clinicaltrail.gov で登録された 150 件を超える試験に関与している、一般的に使用される水および油ベースのワクチン アジュバントです。

トライアルデザイン

ハイリスクMDSおよびAML患者

研究方法

ペプチドワクチンの調製

ペプチドワクチンは、無菌医薬品の品質を保証する GMP 承認の実験室条件 (デンマーク医薬品庁によって承認) の下で調製されます。 生産は承認番号 24223 の下、Herlev 病院の部屋 JM702 で行われます。

以下、各種手続きについて簡単に説明します。 最終的なワクチン製品には、ワクチンの内容と部門から与えられたプロジェクト番号に関する情報を提供するラベルが付いています。

ペプチド

ワクチン接種は、タンパク質の 4 つの長いペプチド配列を標的とします。

NY-ESO-1 (119-143、25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR ; PRAME (423-447、25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279、25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV ; WT1 (231-259、29aa): SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSSVK。

ペプチドは、オランダのペプスキャン プレストの外部提供者によって純度 97% 以上に合成されます。 使用前にDMSOに溶解し、混合し、0.22ミクロンのフィルターで滅菌ろ過します。 エンドトキシンおよび細菌培養試験は、調製物に対して実施されます。 ワクチン接種治療のためのペプチドの放出前の無菌試験は、血液検査室 (場所 54P4) によって行われます。

アジュバント：Montanide ISA 51

Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ５１は、フランスのＳｅｐｐｉｃ Ｉｎｃ．から無菌形態で購入する。 ワクチンあたり 0.5 ml のモンタニドを使用します。

ワクチンの調製

ワクチンは、注射の直前に、ペプチド調製物とアジュバントの混合物として生成されます。

微生物制御

使用前に、ペプチド混合物は、Herlev 病院の微生物学部門によって実行されるエンドトキシン テストおよび微生物学的テストにかけられます。

実験計画

これは、MDSまたはAML患者におけるアザシチジンとペプチドワクチン接種の併用療法の安全性を評価するために設計された非盲検第I相試験です。

24か月以内にすべての参加者を登録し、その後12か月で研究を評価する予定です。 参加者は、病気が進行するまでアザシチジンを継続し、最大2年間、または病気が進行するまでワクチン接種を続けます。 参加者は、自分の要求に応じていつでも治療を中止することができます。また、治療中の疾患の進行または重度の毒性の後に治療を中止することもできます。 包含期間は 2016 年 4 月に始まり、2018 年 4 月に完了する予定です。 その後、最大 2 年間の追跡調査期間が続きます。 最後の参加者の最後のプロトコルによる訪問日は、遅くとも 2020 年 4 月になります。

アザシチジンによる治療を受ける MDS および AML の患者は、Herlev 病院の血液科を通じて募集されます。 すべての患者は、アザシチジン治療を受けている間に含める前の約6か月間、外来で追跡されるため、同意書に署名する必要がある前に、候補者を早期に特定し、適切に通知することができます。

倫理的側面

参加は任意であり、事前に書面によるインフォームド コンセントが必要です。 治療は、許容できない副作用の場合、または患者の要求に応じていつでも終了されます。 患者が試験への参加に関心がない場合は、部門の通常のガイドラインに従って治療が行われます。 したがって、この研究は倫理的に健全であると見なされます。

この研究はヘルシンキ協定のガイドラインに従い、担当医師は科学倫理委員会、デンマーク保健医療庁、デンマーク データ保護庁から研究実施の許可を得ています。