Vaccination peptidique en association avec l'azacitidine pour les patients atteints de SMD et de LAM (AZACTA)

INTRODUCTION

Les patients atteints d'un syndrome myélodysplasique (SMD) à haut risque et d'une leucémie myéloïde aiguë (LAM), qui ne peuvent se voir proposer un traitement curatif, ont un mauvais pronostic avec une survie médiane de 11,5 mois. Il n'y a actuellement qu'un seul médicament homologué dont il a été démontré qu'il prolonge la survie dans ce groupe de patients; l'agent hypométhylant azacitidine (également connu sous le nom de 5-azacytidine ou Vidaza®). Le traitement n'est pas curatif, mais augmente la survie médiane à environ deux ans. La principale cause de décès est une maladie évolutive, et il existe un énorme besoin de nouvelles options de traitement.

Dans cette étude, nous combinerons une immunothérapie expérimentale de vaccination peptidique avec une thérapie standard d'azacitidine pour le traitement de patients atteints d'un syndrome myélodysplasique à haut risque ou d'une leucémie myéloïde aiguë. Notre projet devrait élargir les connaissances en ce qui concerne la combinaison de l'immunothérapie et du traitement conventionnel et sera essentiel pour le développement ultérieur de cette modalité de traitement.

SYNDROME MYÉLODYSPLASIQUE (SMD)

L'accumulation de changements génétiques et épigénétiques dans les cellules souches hématopoïétiques est considérée comme la base du développement du SMD. Aux premiers stades de la maladie, il y a une apoptose accrue, mais à mesure que la maladie évolue vers un SMD ou une LAM à haut risque, il y a une accumulation de cassures chromosomiques, de mutations ponctuelles et d'hyperméthylation du promoteur des gènes suppresseurs de tumeurs, ce qui entraîne une plus agressive et proliférative. maladie. Les symptômes cliniques sont l'anémie, les infections répétées et les épisodes hémorragiques associés au dysfonctionnement de la moelle osseuse.

Actuellement, la seule option de traitement curatif du SMD est la greffe allogénique de moelle osseuse. Il s'agit d'un traitement à haut risque, réalisable uniquement chez les patients plus jeunes avec un donneur compatible. En 2009, une étude de phase III (AZA 001) a été publiée, montrant que les patients atteints de SMD et de LAM à haut risque avec

AZACITIDINE

L'effet de l'azacitidine n'est pas immédiat chez tous les patients, et il est donc nécessaire de procéder à un minimum de 5 à 6 cycles pour déterminer si le patient a une réponse au traitement. À l'heure actuelle, l'azacitidine est la norme de soins pour tous les patients atteints de SMD et de LAM à haut risque avec

Pour les participants à cet essai, l'azacitidine est un traitement standard et sera administrée selon des schémas posologiques standard, et les participants seront évalués pour la réponse au traitement selon des critères standard.

ANTIGÈNES ASSOCIÉS AUX TUMEURS

Le principe de la vaccination contre le cancer repose sur la capacité du système immunitaire à faire la distinction entre les cellules normales et malignes. Le système immunitaire reconnaît un modèle altéré d'expression peptidique à la surface des cellules malignes. Le motif altéré peut impliquer l'expression de protéines cellulaires qualitativement altérées, une simple surexpression de protéines apparaissant normalement ou l'expression de novo de protéines/glycoprotéines qui ne sont pas normalement exprimées dans ce tissu. Cette catégorie de protéines reconnues par le système immunitaire est connue sous le nom d'antigènes associés aux tumeurs. Au fur et à mesure que les protéines se dégradent dans les cellules, les peptides se présentent à la surface de ces cellules sous la forme d'un complexe avec des molécules de type tissulaire (molécules HLA). Les lymphocytes T peuvent alors reconnaître les complexes peptide-HLA, via son récepteur de lymphocyte T, entraînant potentiellement la destruction des cellules tumorales, si un amorçage suffisant a lieu.

Pour la présente étude, le groupe des antigènes testiculaires du cancer (CTA) présente un intérêt particulier, car l'expression de ceux-ci est connue pour être régulée par la méthylation, et donc affectée par un traitement hypo-méthylant tel que l'azacitidine. Les CTA sont connus pour être immunogènes et ne sont exprimés qu'aux sites immunoprivilégiés, donc hors de portée des réponses immunitaires, et sur les cellules cancéreuses, ce qui en fait des cibles idéales pour la vaccination thérapeutique contre le cancer.

CONCEPTION DES VACCINS

Nous avons choisi spécifiquement trois CTA pour lesquels une réexpression abondante a été démontrée après un traitement à l'azacitidine, notamment NY-ESO-1, MAGE-A3 et PRAME. WT-1 est également inclus car cette protéine s'est avérée être un antigène important dans les hémopathies malignes et est également régulée positivement en réponse au traitement à l'azacitidine.

Les peptides que nous avons choisis n'ont pas été utilisés ensemble dans cette combinaison particulière auparavant, mais séparément, leur utilisation comme vaccin thérapeutique est bien étudiée. Des séquences peptidiques plus petites et des protéines complètes ont été utilisées.

L'utilisation de longs peptides synthétiques pour l'induction et les réponses des cellules T a montré des effets supérieurs par rapport aux séquences peptidiques minimales chez les souris et les humains, en outre, il a été démontré que le peptide long synthétique est traité et présenté efficacement aux cellules T CD4 et CD8. du système immunitaire. De plus, les peptides longs ont l'avantage de permettre la présentation de plusieurs épitopes de lymphocytes T différents en fonction du type HLA des patients. Ainsi, le choix de longs peptides minimisera l'impact du type HLA des patients, et donc dans la présente étude permettra l'inclusion de participants sans sélection préalable basée sur l'expression HLA.

Les peptides que nous avons choisis sont entre 25 et 29 acides aminés et seront mélangés en suspension avec du Montanide ISA-51 ; un adjuvant de vaccin à base d'eau et d'huile couramment utilisé, impliqué dans plus de 150 essais enregistrés sur Clinicaltrail.gov.

CONCEPTION D'ESSAI

Patients atteints de SMD et de LAM à haut risque avec

MÉTHODE D'ÉTUDE

PRÉPARATION DU VACCIN PEPTIDIQUE

Le vaccin peptidique sera préparé dans des conditions de laboratoire approuvées GMP (approuvées par l'Agence danoise des médicaments), ce qui garantit la qualité d'un médicament stérile. La production a lieu dans la salle JM702, hôpital Herlev sous le numéro d'agrément 24223.

Vous trouverez ci-dessous une brève description des différentes procédures. Le produit vaccinal final portera une étiquette fournissant des informations sur le contenu du vaccin et le numéro de projet attribué par le département.

Peptides

La vaccination sera ciblée contre quatre longues séquences peptidiques issues des protéines :

NY-ESO-1 (119-143, 25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR ; PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279, 25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV ; WT1 (231-259, 29aa) : SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK.

Les peptides seront synthétisés à une pureté > 97 % par un fournisseur externe, Pepscan Presto, Pays-Bas. Avant utilisation, il sera dissous dans du DMSO, mélangé et filtré stérilement à travers un filtre de 0,22 micron. Des tests d'endotoxines et de culture bactérienne seront effectués sur les préparations. Des tests de stérilité avant libération des peptides pour le traitement vaccinal sont effectués par le laboratoire d'hématologie (emplacement 54P4).

Adjuvant : Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 est acheté auprès de Seppic Inc., France, sous forme stérile. Nous utiliserons 0,5 ml de Montanide par vaccin.

Préparation du vaccin

Le vaccin sera généré sous la forme d'un mélange de la préparation peptidique et de l'adjuvant, sur place, juste avant l'injection.

Contrôle microbiologique

Avant utilisation, le mélange de peptides est soumis à des tests d'endotoxines et à des tests microbiologiques exécutés par le Département de microbiologie de l'hôpital Herlev.

CONCEPTION EXPÉRIMENTALE

Il s'agit d'une étude ouverte de phase I conçue pour évaluer l'innocuité de la thérapie combinée d'azacitidine et de la vaccination peptidique chez les patients atteints de SMD ou de LAM.

Nous prévoyons de recruter tous les participants dans les 24 mois et d'évaluer l'étude 12 mois plus tard. Les participants continueront avec l'azacitidine jusqu'à la progression de la maladie, et avec la vaccination jusqu'à 2 ans, ou jusqu'à la progression de la maladie. Les participants peuvent arrêter le traitement à tout moment à leur propre demande, ou seront retirés du traitement suite à la progression de la maladie ou à une toxicité sévère pendant le traitement. La période d'inclusion devrait commencer en avril 2016 et se terminer en avril 2018. Par la suite, une période de suivi de maximum 2 ans suit. La date de la dernière visite protocolée du dernier participant sera au plus tard avril 2020.

Les patients atteints de SMD et de LMA, qui reçoivent un traitement à l'azacitidine, seront recrutés par le service d'hématologie de l'hôpital Herlev. Étant donné que tous les patients sont suivis en ambulatoire, pendant environ six mois avant l'inclusion tout en recevant un traitement à l'azacitidine, les candidats potentiels peuvent être identifiés tôt et correctement informés avant qu'un formulaire de consentement ne doive être signé.

ASPECTS ÉTHIQUES

La participation est volontaire et est précédée d'un consentement éclairé écrit. Le traitement sera interrompu en cas d'effets secondaires inacceptables ou à la demande du patient à tout moment. Si un patient n'est pas intéressé à participer à l'essai, le traitement sera administré selon les directives habituelles du service. L'étude est donc considérée comme éthiquement saine.

L'étude suit les directives de l'accord d'Helsinki et le médecin responsable obtient un permis du comité d'éthique scientifique, de l'agence danoise de la santé et des médicaments et de l'agence danoise de protection des données pour mener l'étude.