Пептидная вакцинация в сочетании с азацитидином для больных МДС и ОМЛ (AZACTA)

ВСТУПЛЕНИЕ

Пациенты с миелодиспластическим синдромом высокого риска (МДС) и острым миелоидным лейкозом (ОМЛ), которым не может быть предложено радикальное лечение, имеют неблагоприятный прогноз с медианой выживаемости 11,5 месяцев. В настоящее время имеется только одно зарегистрированное лекарство, которое, как было показано, продлевает выживаемость в этой группе пациентов; гипометилирующий агент азацитидин (также известный как 5-азацитидин или Vidaza®). Лечение не является излечивающим, но увеличивает медиану выживаемости примерно до двух лет. Основной причиной смерти является прогрессирующее заболевание, и существует огромная потребность в новых вариантах лечения.

В этом исследовании мы объединим экспериментальную иммунотерапию пептидной вакцинацией со стандартной терапией азацитидином для лечения пациентов с миелодиспластическим синдромом высокого риска или острым миелоидным лейкозом. Ожидается, что наш проект расширит знания о сочетании иммунотерапии и традиционного лечения и будет иметь важное значение для дальнейшего развития этого метода лечения.

МИЕЛОДИСПЛАСТИЧЕСКИЙ СИНДРОМ (МДС)

Накопление как генетических, так и эпигенетических изменений в гемопоэтических стволовых клетках считается фоном для развития МДС. На ранних стадиях заболевания наблюдается повышенный апоптоз, но по мере прогрессирования заболевания до МДС или ОМЛ высокого риска происходит накопление хромосомных разрывов, точечных мутаций и гиперметилирования промоторов генов-супрессоров опухолей, что приводит к более агрессивному и пролиферативному заболеванию. болезнь. Клиническими симптомами являются анемия, повторные инфекции и эпизоды кровотечения, связанные с дисфункцией костного мозга.

В настоящее время единственным радикальным методом лечения МДС является аллогенная трансплантация костного мозга. Это лечение высокого риска, возможное только у более молодых пациентов с подходящим донором. В 2009 г. было опубликовано исследование фазы III (AZA 001), показывающее, что пациенты с МДС высокого риска и ОМЛ с

АЗАЦИТИДИН

Эффект азацитидина проявляется не сразу у всех пациентов, поэтому необходимо провести как минимум 5-6 циклов, чтобы определить, есть ли у пациента ответ на лечение. В настоящее время азацитидин является стандартом лечения всех пациентов с МДС высокого риска и ОМЛ с

Для участников этого испытания азацитидин является стандартной терапией и будет вводиться в соответствии со стандартными схемами дозирования, а участники будут оцениваться на предмет ответа на лечение в соответствии со стандартными критериями.

ОПУХОЛЕВЫЕ АНТИГЕНЫ

Принцип вакцинации против рака основан на способности иммунной системы различать нормальные и злокачественные клетки. Иммунная система распознает измененный паттерн экспрессии пептидов на поверхности злокачественных клеток. Измененный паттерн может включать экспрессию качественно измененных клеточных белков, простую сверхэкспрессию нормально встречающихся белков или экспрессию de novo белков/гликопротеинов, которые обычно не экспрессируются в этой ткани. Эта категория иммунораспознаваемых белков известна как опухолеассоциированные антигены. По мере деградации белков в клетках пептиды представлены на поверхности этих клеток в виде комплекса с молекулами тканевого типа (молекулами HLA). Затем Т-клетки могут распознавать комплексы пептид-HLA через свой Т-клеточный рецептор, что может привести к уничтожению опухолевых клеток, если имеет место достаточное праймирование.

Для настоящего исследования особый интерес представляет группа антигенов раковых яичек (CTA), поскольку известно, что их экспрессия регулируется метилированием и, следовательно, на нее влияет гипометилирующее лечение, такое как азацитидин. Известно, что СТА являются иммуногенными и экспрессируются только в иммунопривилегированных участках, то есть вне досягаемости иммунных реакций, и на раковых клетках, что делает их идеальными мишенями для терапевтической противораковой вакцинации.

КОНСТРУКЦИЯ ВАКЦИНЫ

Мы специально выбрали три CTA, для которых была показана обильная повторная экспрессия после обработки азацитидином, включая NY-ESO-1, MAGE-A3 и PRAME. Дополнительно включен WT-1, так как этот белок оказался важным антигеном при гематологических злокачественных новообразованиях, и его активность также повышается в ответ на лечение азацитидином.

Выбранные нами пептиды ранее не применялись вместе в этой конкретной комбинации, но их применение по отдельности в качестве терапевтической вакцины хорошо изучено. Были использованы как более мелкие пептидные последовательности, так и полноразмерные белки.

Использование синтетических длинных пептидов для индукции и ответа Т-клеток продемонстрировало превосходные эффекты по сравнению с минимальными последовательностями пептидов как у мышей, так и у людей, кроме того, было показано, что синтетические длинные пептиды эффективно процессируются и презентируются как CD4, так и CD8 Т-клеткам. иммунной системы. Кроме того, длинные пептиды имеют то преимущество, что позволяют презентировать несколько различных Т-клеточных эпитопов в зависимости от типа HLA пациента. Таким образом, выбор длинных пептидов сведет к минимуму влияние типа HLA пациентов, и поэтому в настоящее исследование допускается включение участников без предварительного отбора на основе экспрессии HLA.

Выбранные нами пептиды содержат от 25 до 29 аминокислот и будут смешаны в виде суспензии с Montanide ISA-51; широко используемый адъювант вакцины на водной и масляной основе, участвовавший в более чем 150 зарегистрированных испытаниях на сайте Clinicaltrail.gov.

ПРОБНЫЙ ДИЗАЙН

Пациенты с МДС высокого риска и ОМЛ с

МЕТОД ИССЛЕДОВАНИЯ

ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПЕПТИДНОЙ ВАКЦИНЫ

Пептидная вакцина будет приготовлена ​​в лабораторных условиях, одобренных GMP (утвержденных Датским агентством по лекарственным средствам), что гарантирует качество стерильного лекарственного средства. Производство осуществляется в кабинете JM702 больницы Херлев под регистрационным номером 24223.

Ниже приводится краткое описание различных процедур. Конечный продукт вакцины будет иметь этикетку с информацией о содержании вакцины и номером проекта, присвоенным департаментом.

пептиды

Вакцинация будет направлена ​​против четырех длинных пептидных последовательностей белков:

NY-ESO-1 (119-143, 25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR; PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279, 25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV ; WT1 (231-259, 29aa): SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK.

Пептиды будут синтезированы с чистотой >97% внешним поставщиком, Pepscan Presto, Нидерланды. Перед использованием его растворяют в ДМСО, смешивают и стерильно фильтруют через фильтр 0,22 микрона. На препаратах будут проведены тесты на эндотоксины и культивирование бактерий. Проверку на стерильность перед выпуском пептидов для вакцинации проводит гематологическая лаборатория (помещение 54Р4).

Адъювант: Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 приобретается у Seppic Inc., Франция, в стерильной форме. Мы будем использовать 0,5 мл монтанида на вакцину.

Приготовление вакцины

Вакцину получают в виде смеси пептидного препарата и адъюванта непосредственно перед инъекцией.

Микробиологический контроль

Перед использованием смесь пептидов подвергается тестам на эндотоксины и микробиологическим тестам, проводимым отделением микробиологии больницы Херлев.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ДИЗАЙН

Это открытое исследование фазы I, предназначенное для оценки безопасности комбинированной терапии азацитидином и пептидной вакцинацией у пациентов с МДС или ОМЛ.

Мы планируем зарегистрировать всех участников в течение 24 месяцев и оценить исследование через 12 месяцев после этого. Участники будут продолжать принимать азацитидин до прогрессирования заболевания и вакцинацию до 2 лет или до прогрессирования заболевания. Участники могут прекратить лечение в любое время по собственному желанию или будут отстранены от лечения после прогрессирования заболевания или тяжелой токсичности во время лечения. Ожидается, что период включения начнется в апреле 2016 года и завершится в апреле 2018 года. После этого следует период наблюдения максимум 2 года. Дата последнего зарегистрированного визита последнего участника будет не позднее апреля 2020 года.

Пациенты с МДС и ОМЛ, получающие лечение азацитидином, будут набираться через отделение гематологии больницы Херлев. Поскольку все пациенты наблюдаются в амбулаторных условиях, примерно за шесть месяцев до включения во время лечения азацитидином, возможные кандидаты могут быть выявлены на ранней стадии и должным образом проинформированы до того, как потребуется подписать форму согласия.

ЭТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ

Участие является добровольным, и ему предшествует письменное информированное согласие. Лечение будет прекращено в случае неприемлемых побочных эффектов или по запросу пациента в любое время. Если пациент не заинтересован в участии в исследовании, лечение будет проводиться в соответствии с обычными рекомендациями отделения. Таким образом, исследование считается этически обоснованным.

Исследование проводится в соответствии с принципами Хельсинкского соглашения, и ответственный врач получает разрешение от Комитета по научной этике, Датского агентства по здравоохранению и лекарственным средствам и Датского агентства по защите данных на проведение исследования.