Szczepienie peptydowe w skojarzeniu z azacytydyną dla pacjentów z MDS i AML (AZACTA)

PRZEDSTAWIENIE SIĘ

Pacjenci z zespołem mielodysplastycznym wysokiego ryzyka (MDS) i ostrą białaczką szpikową (AML), którym nie można zaoferować leczenia, mają złe rokowanie z medianą przeżycia wynoszącą 11,5 miesiąca. Obecnie istnieje tylko jeden zarejestrowany lek, który wydłuża przeżycie w tej grupie pacjentów; środek hipometylujący azacytydyna (znana również jako 5-azacytydyna lub Vidaza®). Leczenie nie jest lecznicze, ale zwiększa medianę przeżycia do około dwóch lat. Dominującą przyczyną śmierci jest postępująca choroba i istnieje ogromne zapotrzebowanie na nowe opcje leczenia.

W tym badaniu połączymy eksperymentalną immunoterapię szczepionką peptydową ze standardową terapią azacytydyną w leczeniu pacjentów z zespołem mielodysplastycznym wysokiego ryzyka lub ostrą białaczką szpikową. Oczekuje się, że nasz projekt poszerzy wiedzę w zakresie łączenia immunoterapii i leczenia konwencjonalnego i będzie niezbędny do dalszego rozwoju tej metody leczenia.

ZESPÓŁ MIELODYSPLASTICZNY (MDS)

Akumulacja zarówno genetycznych, jak i epigenetycznych zmian w hematopoetycznych komórkach macierzystych jest uważana za tło rozwoju MDS. We wczesnych stadiach choroby dochodzi do zwiększonej apoptozy, ale wraz z postępem choroby do MDS lub AML wysokiego ryzyka dochodzi do kumulacji pęknięć chromosomów, mutacji punktowych i hipermetylacji promotora genów supresorowych nowotworów, co skutkuje bardziej agresywnym i proliferacyjnym choroba. Objawy kliniczne to niedokrwistość, nawracające infekcje i epizody krwawień związane z dysfunkcją szpiku kostnego.

Obecnie jedyną opcją leczenia MDS jest allogeniczny przeszczep szpiku kostnego. Jest to leczenie wysokiego ryzyka, możliwe tylko u młodszych pacjentów z odpowiednim dawcą. W 2009 roku opublikowano badanie fazy III (AZA 001), wykazujące, że pacjenci z MDS wysokiego ryzyka i AML z

AZACYTYDYNA

Działanie azacytydyny nie jest natychmiastowe u wszystkich pacjentów, dlatego konieczne jest wykonanie co najmniej 5-6 cykli w celu ustalenia, czy u pacjenta występuje odpowiedź na leczenie. Obecnie azacytydyna jest standardem postępowania u wszystkich pacjentów z MDS i AML wysokiego ryzyka

W przypadku uczestników tego badania azacytydyna jest terapią standardową i będzie podawana zgodnie ze standardowymi schematami dawkowania, a uczestnicy będą oceniani pod kątem odpowiedzi na leczenie zgodnie ze standardowymi kryteriami.

ANTYGENY ZWIĄZANE Z GUZAMI

Zasada szczepienia przeciwko rakowi opiera się na zdolności układu odpornościowego do rozróżniania komórek prawidłowych od złośliwych. Układ odpornościowy rozpoznaje zmieniony wzorzec ekspresji peptydów na powierzchni komórek nowotworowych. Zmieniony wzór może obejmować ekspresję białek komórkowych zmienionych jakościowo, prostą nadekspresję normalnie występujących białek lub ekspresję de novo białek/glikoprotein, które normalnie nie ulegają ekspresji w tej tkance. Ta kategoria białek rozpoznawanych przez układ odpornościowy jest znana jako antygeny związane z nowotworem. Ponieważ białka są rozkładane w komórkach, peptydy są prezentowane na powierzchni tych komórek jako kompleks z cząsteczkami typu tkankowego (cząsteczki HLA). Komórki T mogą następnie rozpoznawać kompleksy peptyd-HLA poprzez swój receptor komórek T, potencjalnie powodując zabijanie komórek nowotworowych, jeśli nastąpi wystarczające przygotowanie.

W niniejszym badaniu szczególnie interesująca jest grupa antygenów raka jąder (CTA), ponieważ wiadomo, że ich ekspresja jest regulowana przez metylację, a zatem wpływa na nią leczenie hipometylujące, takie jak azacytydyna. Wiadomo, że CTA są immunogenne i ulegają ekspresji tylko w miejscach uprzywilejowanych immunologicznie, a więc poza zasięgiem odpowiedzi immunologicznej, oraz na komórkach rakowych, co czyni je idealnymi celami dla terapeutycznych szczepień przeciwnowotworowych.

PROJEKT SZCZEPIONKI

Wybraliśmy konkretnie trzy CTA, dla których wykazano obfitą ponowną ekspresję po leczeniu azacytydyną, w tym NY-ESO-1, MAGE-A3 i PRAME. WT-1 jest dodatkowo włączony, ponieważ białko to okazało się ważnym antygenem w nowotworach hematologicznych i podobnie jest regulowane w górę w odpowiedzi na leczenie azacytydyną.

Wybrane przez nas peptydy nie były wcześniej stosowane razem w tej konkretnej kombinacji, ale osobno ich zastosowanie jako szczepionki terapeutycznej jest dobrze zbadane. Zastosowano zarówno mniejsze sekwencje peptydowe, jak i białka pełnej długości.

Zastosowanie syntetycznych długich peptydów do indukcji i odpowiedzi komórek T wykazało lepsze efekty w przeciwieństwie do minimalnych sekwencji peptydowych zarówno u myszy, jak i ludzi, ponadto wykazano, że syntetyczny długi peptyd jest skutecznie przetwarzany i prezentowany zarówno komórkom T CD4, jak i CD8 układu odpornościowego. Ponadto długie peptydy mają tę zaletę, że umożliwiają prezentację kilku różnych epitopów komórek T w zależności od typu HLA pacjenta. Zatem wybór długich peptydów zminimalizuje wpływ typu HLA pacjentów, a zatem w niniejszym badaniu umożliwi włączenie uczestników bez wcześniejszej selekcji opartej na ekspresji HLA.

Wybrane przez nas peptydy mają od 25 do 29 aminokwasów i zostaną zmieszane jako zawiesina z Montanide ISA-51; powszechnie stosowany adiuwant szczepionkowy na bazie wody i oleju, biorący udział w ponad 150 badaniach zarejestrowanych na stronie Clinicaltrail.gov.

PROJEKT PRÓBNY

Pacjenci z MDS i AML wysokiego ryzyka z

METODA STUDIÓW

PRZYGOTOWANIE SZCZEPIONKI PEPTYDOWEJ

Szczepionka peptydowa zostanie przygotowana w warunkach laboratoryjnych zatwierdzonych przez GMP (zatwierdzonych przez Duńską Agencję Leków), co zapewnia jakość sterylnego produktu leczniczego. Produkcja odbywa się w sali JM702, Herlev Hospital pod numerem homologacji 24223.

Poniżej znajduje się krótki opis różnych procedur. Gotowy produkt szczepionkowy będzie posiadał etykietę z informacją o zawartości szczepionki oraz nadanym przez wydział numerem projektu.

Peptydy

Szczepienie będzie skierowane przeciwko czterem długim sekwencjom peptydowym z białek:

NY-ESO-1 (119-143, 25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR ; PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279, 25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV ; WT1 (231-259, 29aa): SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK.

Peptydy zostaną zsyntetyzowane do czystości >97% przez zewnętrznego dostawcę, Pepscan Presto, Holandia. Przed użyciem zostanie rozpuszczony w DMSO, wymieszany i sterylnie przefiltrowany przez filtr 0,22 mikrona. Na preparatach zostaną przeprowadzone testy endotoksynowe i hodowli bakteryjnej. Badania sterylności przed uwolnieniem peptydów do szczepienia przeprowadza laboratorium hematologiczne (lokalizacja 54P4).

Adiuwant: Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 zakupiono od Seppic Inc., Francja, w sterylnej postaci. Użyjemy 0,5 ml Montanide na szczepionkę.

Przygotowanie szczepionki

Szczepionka zostanie wytworzona jako mieszanka preparatu peptydowego i adiuwanta, bezpośrednio przed wstrzyknięciem.

Kontrola mikrobiologiczna

Mieszanka peptydów przed użyciem poddawana jest badaniom endotoksynowym oraz badaniom mikrobiologicznym wykonywanym przez Oddział Mikrobiologii Szpitala Herlev.

EKSPERYMENTALNY PROJEKT

Jest to otwarte badanie fazy I, którego celem jest ocena bezpieczeństwa terapii skojarzonej azacytydyną i szczepionką peptydową u pacjentów z MDS lub AML.

Oczekujemy, że zapiszemy wszystkich uczestników w ciągu 24 miesięcy i ocenimy badanie 12 miesięcy później. Uczestnicy będą kontynuować podawanie azacytydyny do czasu progresji choroby i szczepień przez okres do 2 lat lub do progresji choroby. Uczestnicy mogą przerwać leczenie w dowolnym momencie na własną prośbę lub zostaną wycofani z leczenia w przypadku progresji choroby lub ciężkiej toksyczności podczas leczenia. Oczekuje się, że okres włączenia rozpocznie się w kwietniu 2016 r., a zakończy w kwietniu 2018 r. Następnie następuje okres obserwacji trwający maksymalnie 2 lata. Ostatnia protokołowana data wizyty ostatniego uczestnika przypada najpóźniej na kwiecień 2020 r.

Pacjenci z MDS i AML, którzy otrzymują leczenie azacytydyną, będą rekrutowani przez oddział hematologii szpitala Herlev. Ponieważ wszyscy pacjenci są obserwowani w warunkach ambulatoryjnych przez około sześć miesięcy przed włączeniem do leczenia azacytydyną, potencjalni kandydaci mogą zostać wcześnie zidentyfikowani i odpowiednio poinformowani przed podpisaniem formularza zgody.

ASPEKTY ETYCZNE

Udział jest dobrowolny i poprzedzony pisemną świadomą zgodą. Leczenie zostanie przerwane w przypadku wystąpienia nieakceptowalnych działań niepożądanych lub na życzenie pacjenta w dowolnym momencie. Jeśli pacjent nie jest zainteresowany udziałem w badaniu, leczenie będzie prowadzone zgodnie z wytycznymi oddziału. Badanie jest zatem uważane za etycznie uzasadnione.

Badanie odbywa się zgodnie z wytycznymi Porozumienia Helsińskiego, a odpowiedzialny lekarz uzyskuje pozwolenie Naukowej Komisji Etycznej, Duńskiej Agencji Zdrowia i Leków oraz Duńskiej Agencji Ochrony Danych na przeprowadzenie badania.