肽疫苗联合阿扎胞苷治疗 MDS 和 AML 患者 (AZACTA)

介绍

患有高危骨髓增生异常综合征 (MDS) 和急性髓系白血病 (AML) 的患者无法获得治愈性治疗，预后较差，中位生存期为 11.5 个月。 目前只有一种注册药物被证明可以延长该患者群体的生存期；去甲基化剂阿扎胞苷（也称为 5-氮杂胞苷或 Vidaza®）。 治疗不是治愈性的，但将中位生存期增加到大约两年。 死亡的主要原因是进行性疾病，因此迫切需要新的治疗方案。

在这项研究中，我们将结合肽疫苗接种的实验性免疫疗法和阿扎胞苷标准疗法来治疗高危骨髓增生异常综合征或急性髓性白血病患者。 我们的项目有望扩展有关免疫疗法和常规治疗相结合的知识，并且对于进一步发展这种治疗方式至关重要。

骨髓增生异常综合征 (MDS)

造血干细胞中遗传和表观遗传变化的积累被认为是 MDS 发展的背景。 在疾病的早期阶段，细胞凋亡增加，但随着疾病进展为高危MDS或AML，染色体断裂、点突变和抑癌基因启动子高甲基化的积累，导致更具侵袭性和增殖性疾病。 临床症状是贫血、反复感染和与功能障碍的骨髓相关的出血事件。

目前，MDS 唯一的治愈性治疗选择是同种异体骨髓移植。 这是一种高风险治疗，只有在有合适供体的年轻患者中才可行。 2009 年，一项 III 期研究 (AZA 001) 发表，表明患有高危 MDS 和 AML 的患者具有

阿扎胞苷

阿扎胞苷的作用并非对所有患者都是立竿见影的，因此有必要进行至少 5-6 个周期以确定患者是否对治疗有反应。 目前，阿扎胞苷是所有高危 MDS 和 AML 患者的标准治疗

对于本试验的参与者，阿扎胞苷是标准疗法，将根据标准给药方案进行给药，参与者将根据标准标准评估治疗反应。

肿瘤相关抗原

癌症疫苗接种背后的原理是基于免疫系统区分正常细胞和恶性细胞的能力。 免疫系统识别恶性细胞表面肽表达模式的改变。 改变的模式可能涉及质量改变的细胞蛋白质的表达、正常存在的蛋白质的简单过度表达，或通常不在该组织中表达的蛋白质/糖蛋白的从头表达。 这类免疫识别蛋白被称为肿瘤相关抗原。 当蛋白质在细胞中降解时，肽作为与组织型分子（HLA 分子）的复合物呈现在这些细胞的表面上。 然后，T 细胞可能会通过其 T 细胞受体识别肽-HLA 复合物，如果发生足够的引发，可能会导致肿瘤细胞死亡。

对于本研究，癌症睾丸抗原 (CTA) 组特别令人感兴趣，因为已知这些抗原的表达受甲基化调节，因此受到低甲基化治疗（如阿扎胞苷）的影响。 已知 CTA 具有免疫原性，并且仅在免疫豁免位点表达，因此免疫反应无法触及，并且在癌细胞上表达，使其成为治疗性癌症疫苗接种的理想目标。

疫苗设计

我们特别选择了三种 CTA，在阿扎胞苷治疗后，这些 CTA 表现出丰富的再表达，包括 NY-ESO-1、MAGE-A3 和 PRAME。 另外还包括 WT-1，因为该蛋白质已被证明是血液恶性肿瘤中的重要抗原，并且同样响应于阿扎胞苷治疗而上调。

我们选择的肽以前没有在这个特定的组合中一起使用过，但是它们作为治疗性疫苗接种的单独使用已经得到很好的研究。 较小的肽序列和全长蛋白质都已被利用。

与小鼠和人类的最小肽序列相比，使用合成长肽进行诱导和 T 细胞反应显示出优越的效果，此外，合成长肽已被证明可以有效加工并呈递给 CD4 和 CD8 T 细胞的免疫系统。 此外，长肽的优势在于能够根据患者的 HLA 类型呈现几种不同的 T 细胞表位。 因此，长肽的选择将最大限度地减少患者 HLA 类型的影响，因此在本研究中允许纳入参与者，而无需事先根据 HLA 表达进行选择。

我们选择的肽介于 25 到 29 个氨基酸之间，将作为悬浮液与 Montanide ISA-51 混合；一种常用的水基和油基疫苗佐剂，参与了 Clinicaltrail.gov 上的 150 多项注册试验。

试验设计

高危 MDS 和 AML 患者

学习方法

肽疫苗的制备

肽疫苗将在 GMP 批准的实验室条件下（经丹麦药品管理局批准）制备，以确保无菌医药产品的质量。 生产在 Herlev 医院 JM702 室进行，批准号为 24223。

以下是各种程序的简要说明。 最终的疫苗产品将贴有标签，提供有关疫苗内容的信息和该部门提供的项目编号。

胜肽

疫苗接种将针对来自蛋白质的四种长肽序列：

NY-ESO-1 (119-143, 25aa)：PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR； PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ； MAGE-A3（255-279、25aa）：YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV； WT1（231-259、29aa）：SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK。

这些肽将由荷兰的外部供应商 Pepscan Presto 合成至 >97% 的纯度。 使用前，将其溶解在 DMSO 中，混合并通过 0.22 微米过滤器进行无菌过滤。 对制剂进行内毒素和细菌培养试验。 用于疫苗接种治疗的肽释放前的无菌测试由血液学实验室（位置 54P4）进行。

佐剂：Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 以无菌形式购自法国 Seppic Inc.。 每个疫苗我们将使用 0.5 毫升的 Montanide。

疫苗制备

疫苗将作为肽制剂和佐剂的混合物产生，就在注射之前。

微生物控制

使用前，肽混合物要经过 Herlev 医院微生物科进行的内毒素测试和微生物测试。

实验设计

这是一项开放标签的 I 期研究，旨在评估阿扎胞苷和肽疫苗联合治疗对 MDS 或 AML 患者的安全性。

我们希望在 24 个月内招募所有参与者，并在 12 个月后评估研究。 参与者将继续服用阿扎胞苷直至疾病进展，并接种疫苗长达 2 年，或直至疾病进展。 参与者可以根据自己的要求随时停止治疗，或者在治疗期间出现疾病进展或严重毒性后退出治疗。 纳入期预计将于 2016 年 4 月开始，并于 2018 年 4 月完成。 之后是最长 2 年的随访期。 最后一位参与者的最后一次协议访问日期最晚为 2020 年 4 月。

接受阿扎胞苷治疗的 MDS 和 AML 患者将通过 Herlev 医院血液科招募。 由于所有患者都在门诊进行随访，在接受阿扎胞苷治疗前约六个月，因此可以及早确定可能的候选人并在需要签署同意书之前适当告知。

道德方面

参与是自愿的，并且在获得书面知情同意书之前。 如果出现不可接受的副作用，或应患者的要求随时终止治疗。 如果患者对参与试验不感兴趣，将根据该部门的常规指南进行治疗。 因此，该研究被认为在伦理上是合理的。

该研究遵循赫尔辛基协议的指导方针，负责的医生获得了科学伦理委员会、丹麦卫生和药物管理局以及丹麦数据保护局的许可，可以进行该研究。