Vacunación con péptidos en combinación con azacitidina para pacientes con MDS y AML (AZACTA)

INTRODUCCIÓN

Los pacientes con síndrome mielodisplásico (SMD) de alto riesgo y leucemia mieloide aguda (LMA), a los que no se les puede ofrecer un tratamiento curativo, tienen un mal pronóstico con una mediana de supervivencia de 11,5 meses. Actualmente solo hay un fármaco registrado que ha demostrado prolongar la supervivencia en este grupo de pacientes; el agente hipometilante azacitidina (también conocido como 5-azacitidina o Vidaza®). El tratamiento no es curativo, pero aumenta la mediana de supervivencia a aproximadamente dos años. La principal causa de muerte es la enfermedad progresiva y existe una gran necesidad de nuevas opciones de tratamiento.

En este estudio combinaremos la inmunoterapia experimental de vacunación con péptidos con la terapia estándar de azacitidina para el tratamiento de pacientes con síndrome mielodisplásico de alto riesgo o leucemia mieloide aguda. Se espera que nuestro proyecto amplíe el conocimiento con respecto a la combinación de inmunoterapia y tratamiento convencional y será esencial para un mayor desarrollo de esta modalidad de tratamiento.

SÍNDROME MIELODISPLÁSICO (SMD)

La acumulación de cambios tanto genéticos como epigenéticos en las células madre hematopoyéticas se considera el trasfondo para el desarrollo de SMD. En las primeras etapas de la enfermedad, hay un aumento de la apoptosis, pero a medida que la enfermedad progresa a MDS o AML de alto riesgo, hay una acumulación de ruptura cromosómica, mutaciones puntuales e hipermetilación del promotor de los genes supresores de tumores, lo que da como resultado una forma más agresiva y proliferativa. enfermedad. Los síntomas clínicos son anemia, infecciones repetidas y episodios de sangrado asociados con la médula ósea disfuncional.

Actualmente, la única opción de tratamiento curativo para MDS es el trasplante alogénico de médula ósea. Este es un tratamiento de alto riesgo, solo factible en pacientes más jóvenes con un donante adecuado. En 2009, se publicó un estudio de Fase III (AZA 001), que mostró que los pacientes con SMD de alto riesgo y LMA con

AZACITIDINA

El efecto de la azacitidina no es inmediato en todos los pacientes, por lo que es necesario proceder con un mínimo de 5-6 ciclos para determinar si el paciente responde al tratamiento. En la actualidad, la azacitidina es el tratamiento estándar para todos los pacientes con SMD de alto riesgo y LMA con

Para los participantes en este ensayo, la azacitidina es la terapia estándar y se administrará según los regímenes de dosificación estándar, y se evaluará la respuesta al tratamiento de los participantes según los criterios estándar.

ANTÍGENOS ASOCIADOS A TUMOR

El principio detrás de la vacunación contra el cáncer se basa en la capacidad del sistema inmunitario para discriminar entre células normales y malignas. El sistema inmunitario reconoce un patrón alterado de expresión de péptidos en la superficie de las células malignas. El patrón alterado puede implicar la expresión de proteínas celulares cualitativamente alteradas, la simple sobreexpresión de proteínas que se producen normalmente o la expresión de novo de proteínas/glucoproteínas que normalmente no se expresan en ese tejido. Esta categoría de proteínas reconocidas por el sistema inmunitario se conoce como antígenos asociados a tumores. A medida que las proteínas se degradan en las células, los péptidos se presentan en la superficie de estas células como un complejo con moléculas tipo tejido (moléculas HLA). Las células T pueden entonces reconocer los complejos de péptido-HLA, a través de su receptor de células T, lo que puede resultar en la destrucción de células tumorales, si se lleva a cabo un cebado suficiente.

Para el presente estudio, el grupo de antígenos de cáncer de testículo (CTA's) son de especial interés, ya que se sabe que su expresión está regulada por metilación, y por lo tanto afectada por tratamientos hipometilantes como la azacitidina. Se sabe que los CTA son inmunogénicos y solo se expresan en sitios inmunoprivilegiados, por lo tanto, fuera del alcance de las respuestas inmunitarias, y en las células cancerosas, lo que los convierte en objetivos ideales para la vacunación terapéutica contra el cáncer.

DISEÑO DE VACUNA

Hemos elegido específicamente tres CTA para los que se ha demostrado una reexpresión abundante después del tratamiento con azacitidina, incluidos NY-ESO-1, MAGE-A3 y PRAME. WT-1 también se incluye porque esta proteína ha demostrado ser un antígeno importante en las neoplasias malignas hematológicas y también se regula positivamente en respuesta al tratamiento con azacitidina.

Los péptidos que hemos elegido no se han usado juntos antes en esta combinación particular, pero por separado su uso como vacunación terapéutica está bien estudiado. Se han utilizado secuencias peptídicas más pequeñas y proteínas de longitud completa.

El uso de péptidos largos sintéticos para la inducción y las respuestas de células T ha mostrado efectos superiores en contraste con las secuencias peptídicas mínimas tanto en ratones como en humanos; además, se ha demostrado que el péptido largo sintético se procesa y se presenta de manera eficiente a las células T CD4 y CD8. del sistema inmunológico. Además, los péptidos largos tienen la ventaja de permitir la presentación de varios epítopos de células T diferentes que dependen del tipo de HLA de los pacientes. Por lo tanto, la elección de péptidos largos minimizará el impacto del tipo de HLA de los pacientes y, por lo tanto, en el presente estudio permitirá la inclusión de participantes sin una selección previa basada en la expresión de HLA.

Los péptidos que hemos elegido tienen entre 25 y 29 aminoácidos y se mezclarán en suspensión con Montanide ISA-51; un adyuvante de vacuna a base de agua y aceite de uso común, involucrado en más de 150 ensayos registrados en Clinicaltrail.gov.

DISEÑO DE PRUEBAS

Pacientes con MDS de alto riesgo y AML con

MÉTODO DE ESTUDIO

PREPARACIÓN DE LA VACUNA DE PÉPTIDOS

La vacuna peptídica se preparará en condiciones de laboratorio aprobadas por GMP (aprobadas por la Agencia Danesa de Medicamentos), lo que garantiza la calidad de un medicamento estéril. La producción se lleva a cabo en la sala JM702, Hospital Herlev con el número de aprobación 24223.

A continuación se muestra una breve descripción de los distintos procedimientos. El producto final de la vacuna tendrá una etiqueta con información sobre el contenido de la vacuna y el número de proyecto proporcionado por el departamento.

péptidos

La vacunación estará dirigida contra cuatro secuencias peptídicas largas de las proteínas:

NY-ESO-1 (119-143, 25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR; PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279, 25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV ; WT1 (231-259, 29aa): SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK.

Los péptidos serán sintetizados con una pureza >97 % por un proveedor externo, Pepscan Presto, Países Bajos. Antes de su uso, se disolverá en DMSO, se mezclará y se filtrará de forma estéril a través de un filtro de 0,22 micras. Se realizarán pruebas de cultivo de endotoxinas y bacterias a los preparados. Las pruebas de esterilidad antes de la liberación de péptidos para el tratamiento de vacunación se llevan a cabo en un laboratorio hematológico (ubicación 54P4).

Adyuvante: Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 se adquiere de Seppic Inc., Francia, en forma estéril. Usaremos 0,5 ml de Montanide por vacuna.

Preparación de la vacuna

La vacuna se generará como una mezcla de la preparación peptídica y el adyuvante, solo, justo antes de la inyección.

Control microbiológico

Antes de su uso, la mezcla de péptidos se somete a pruebas de endotoxinas y pruebas microbiológicas realizadas por el Departamento de Microbiología del Hospital Herlev.

DISEÑO EXPERIMENTAL

Este es un estudio abierto de Fase I diseñado para evaluar la seguridad de la terapia combinada de azacitidina y vacunación con péptidos en pacientes con MDS o AML.

Esperamos inscribir a todos los participantes dentro de los 24 meses y evaluar el estudio 12 meses después. Los participantes continuarán con azacitidina hasta la progresión de la enfermedad y con la vacunación hasta por 2 años o hasta la progresión de la enfermedad. Los participantes pueden interrumpir el tratamiento en cualquier momento a petición propia, o se les retirará del tratamiento tras la progresión de la enfermedad o toxicidad grave durante el tratamiento. Se espera que el período de inclusión comience en abril de 2016 y finalice en abril de 2018. A partir de entonces sigue un período de seguimiento de un máximo de 2 años. La fecha de la última visita protocolizada del último participante será a más tardar en abril de 2020.

Los pacientes con MDS y AML, que reciben tratamiento con azacitidina, serán reclutados a través del Departamento de Hematología del Hospital Herlev. Dado que todos los pacientes son seguidos en un entorno ambulatorio, durante aproximadamente seis meses antes de la inclusión mientras reciben tratamiento con azacitidina, los posibles candidatos pueden identificarse temprano e informarse adecuadamente antes de que se deba firmar un formulario de consentimiento.

ASPECTOS ÉTICOS

La participación es voluntaria y está precedida por el consentimiento informado por escrito. El tratamiento se dará por terminado en los casos de efectos secundarios inaceptables, oa petición del paciente en cualquier momento. Si un paciente no está interesado en participar en el ensayo, se le dará tratamiento de acuerdo con las pautas habituales del departamento. Por lo tanto, el estudio se considera éticamente sólido.

El estudio sigue las directrices del Acuerdo de Helsinki y el médico responsable obtiene un permiso del Comité Ético Científico, la Agencia Danesa de Salud y Medicamentos y la Agencia Danesa de Protección de Datos para realizar el estudio.