Peptidirokotus yhdessä atsasitidiinin kanssa potilaille, joilla on MDS ja AML (AZACTA)

JOHDANTO

Potilailla, joilla on korkean riskin myelodysplastinen oireyhtymä (MDS) ja akuutti myelooinen leukemia (AML), joille ei voida tarjota parantavaa hoitoa, on huono ennuste ja keskimääräinen eloonjäämisaika on 11,5 kuukautta. Tällä hetkellä on vain yksi rekisteröity lääke, jonka on osoitettu pidentävän eloonjäämistä tässä potilasryhmässä; hypometyloiva aine atsasitidiini (tunnetaan myös nimellä 5-atsasytidiini tai Vidaza®). Hoito ei ole parantava, mutta nostaa mediaanieloonjäämisen noin kahteen vuoteen. Yleisin kuolinsyy on etenevä sairaus, ja uusille hoitovaihtoehdoille on valtava tarve.

Tässä tutkimuksessa yhdistämme kokeellisen peptidirokotuksen immunoterapian atsasitidiinin standardihoitoon potilaiden hoidossa, joilla on korkean riskin myelodysplastinen oireyhtymä tai akuutti myelooinen leukemia. Projektimme odotetaan laajentavan tietämystä immunoterapian ja tavanomaisen hoidon yhdistelmästä, ja se on olennainen tämän hoitomuodon kehittämisessä.

MYELODYSPLASTINEN SYNDROME (MDS)

Sekä geneettisten että epigeneettisten muutosten kertymistä hematopoieettisiin kantasoluihin pidetään MDS:n kehittymisen taustana. Taudin alkuvaiheessa apoptoosi lisääntyy, mutta taudin edetessä korkean riskin MDS:ksi tai AML:ksi kromosomaalisia murtumia, pistemutaatioita ja tuumorisuppressorigeenien promoottorin hypermetylaatiota kertyy, mikä johtaa aggressiivisempaan ja proliferatiivisempaan sairaus. Kliiniset oireet ovat anemia, toistuvat infektiot ja verenvuotojaksot, jotka liittyvät luuytimen toimintahäiriöön.

Tällä hetkellä MDS:n ainoa parantava hoitovaihtoehto on allogeeninen luuytimensiirto. Tämä on suuren riskin hoito, joka on mahdollista vain nuoremmille potilaille, joilla on sopiva luovuttaja. Vuonna 2009 julkaistiin vaiheen III tutkimus (AZA 001), joka osoitti, että korkean riskin MDS- ja AML-potilailla

ATSASITIDIINI

Atsasitidiinin vaikutus ei ole välitön kaikilla potilailla, ja siksi on tarpeen jatkaa vähintään 5-6 sykliä sen määrittämiseksi, reagoiko potilas hoitoon. Tällä hetkellä atsasitidiini on hoidon standardi kaikille potilaille, joilla on korkean riskin MDS ja AML

Tämän tutkimuksen osallistujille atsasitidiini on standardihoito, ja sitä annetaan tavanomaisten annostusohjelmien mukaisesti, ja osallistujien hoitovaste arvioidaan standardikriteerien mukaisesti.

Kasvaimeen LIITTYVÄT ANTIGEENIT

Syöpärokotteen taustalla oleva periaate perustuu immuunijärjestelmän kykyyn erottaa normaalit ja pahanlaatuiset solut. Immuunijärjestelmä tunnistaa muuttuneen peptidi-ilmentymismallin pahanlaatuisten solujen pinnalla. Muutettu malli voi sisältää kvalitatiivisesti muuttuneiden soluproteiinien ilmentymisen, normaalisti esiintyvien proteiinien yksinkertaisen yli-ilmentymisen tai sellaisten proteiinien/glykoproteiinien de novo -ilmentymisen, joita ei normaalisti ilmennetä kyseisessä kudoksessa. Tämä immuunijärjestelmän tunnistamien proteiinien luokka tunnetaan kasvaimeen liittyvinä antigeeneinä. Kun proteiinit hajoavat soluissa, peptidit ovat näiden solujen pinnalla kompleksina kudostyyppisten molekyylien (HLA-molekyylien) kanssa. T-solut voivat sitten tunnistaa peptidi-HLA-kompleksit T-solureseptorinsa kautta, mikä saattaa johtaa kasvainsolujen tappamiseen, jos riittävä esikäsittely tapahtuu.

Tässä tutkimuksessa syöpäkivesantigeenien (CTA:iden) ryhmä on erityisen kiinnostava, koska näiden ilmentymisen tiedetään säätelevän metylaation ja siksi hypometyloivan hoidon, kuten atsasitidiinin, vaikuttavat niihin. CTA:iden tiedetään olevan immunogeenisiä ja niitä ekspressoidaan vain immuunivasteissa, eli immuunivasteiden ulottumattomissa, ja syöpäsoluissa, mikä tekee niistä ihanteellisia kohteita terapeuttiselle syöpärokotteelle.

ROKOTEEN SUUNNITTELU

Olemme valinneet erityisesti kolme CTA:ta, joiden on osoitettu uudelleen ilmentyvän runsaasti atsasitidiinihoidon jälkeen, mukaan lukien NY-ESO-1, MAGE-A3 ja PRAME. WT-1 on lisäksi sisällytetty, koska tämä proteiini on osoittautunut tärkeäksi antigeeniksi hematologisissa pahanlaatuisissa kasvaimissa, ja se myös lisääntyy vasteena atsasitidiinihoidolle.

Valitsemiamme peptidejä ei ole aiemmin käytetty yhdessä tässä nimenomaisessa yhdistelmässä, mutta erikseen niiden käyttöä terapeuttisena rokotteena on tutkittu hyvin. Sekä pienempiä peptidisekvenssejä että täyspitkiä proteiineja on käytetty.

Synteettisten pitkien peptidien käyttö induktioon ja T-soluvasteisiin on osoittanut ylivertaisia ​​vaikutuksia verrattuna minimaalisiin peptidisekvensseihin sekä hiirillä että ihmisillä, lisäksi synteettisen pitkän peptidin on osoitettu prosessoituvan tehokkaasti ja esitellään sekä CD4- että CD8-T-soluille. immuunijärjestelmästä. Pitkillä peptideillä on myös se etu, että ne mahdollistavat useiden erilaisten T-soluepitooppien esittämisen potilaan HLA-tyypistä riippuen. Siten pitkien peptidien valinta minimoi potilaiden HLA-tyypin vaikutuksen ja mahdollistaa siksi tässä tutkimuksessa osallistujien sisällyttämisen ilman HLA-ilmentymiseen perustuvaa ennakkovalintaa.

Valitsemamme peptidit ovat 25 - 29 aminohapon pituisia ja ne sekoitetaan suspensiona Montanide ISA-51:n kanssa; yleisesti käytetty vesi- ja öljypohjainen rokoteadjuvantti, joka on mukana yli 150 rekisteröidyssä tutkimuksessa osoitteessa Clinicaltrail.gov.

KOKEISUUNNITTELU

Potilaat, joilla on korkean riskin MDS ja AML

TUTKIMUSMENETELMÄ

PEPTIDIROKOTTEEN VALMISTAMINEN

Peptidirokote valmistetaan GMP-hyväksytyissä laboratorio-olosuhteissa (Tanskan lääkeviraston hyväksymä), mikä takaa steriilin lääkevalmisteen laadun. Tuotanto tapahtuu huoneessa JM702, Herlev Hospital hyväksyntänumerolla 24223.

Alla on lyhyt kuvaus eri menettelyistä. Lopullisessa rokotetuotteessa on tarra, jossa on tiedot rokotteen sisällöstä ja osaston antama hankenumero.

Peptidit

Rokotus kohdistetaan neljää pitkää peptidisekvenssiä vastaan ​​proteiineista:

NY-ESO-1 (119-143, 25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR ; PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279, 25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV; WT1 (231-259, 29aa): SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK.

Ulkoinen toimittaja, Pepscan Presto, Alankomaat, syntetisoi peptidit yli 97 % puhtauteen. Ennen käyttöä se liuotetaan DMSO:hon, sekoitetaan ja steriilisuodatetaan 0,22 mikronin suodattimen läpi. Valmisteille tehdään endotoksiini- ja bakteeriviljelytestit. Hematologisessa laboratoriossa (paikka 54P4) suorittaa steriiliystestit ennen peptidien vapauttamista rokotushoitoa varten.

Adjuvantti: Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 hankitaan yhtiöltä Seppic Inc., Ranska, steriilissä muodossa. Käytämme 0,5 ml Montanidia per rokote.

Rokotteen valmistus

Rokote luodaan peptidivalmisteen ja adjuvantin sekoituksena puolella juuri ennen injektiota.

Mikrobiologinen valvonta

Ennen käyttöä peptidiseokselle tehdään Herlevin sairaalan mikrobiologian laitoksen suorittamat endotoksiinitestit ja mikrobiologiset testit.

KOKEELLINEN SUUNNITTELU

Tämä on avoin vaiheen I tutkimus, joka on suunniteltu arvioimaan atsasitidiinin ja peptidirokotteen yhdistelmähoidon turvallisuutta potilailla, joilla on MDS tai AML.

Odotamme ilmoittavamme kaikki osallistujat 24 kuukauden kuluessa ja arvioivamme tutkimuksen 12 kuukauden kuluttua. Osallistujat jatkavat atsasitidiinia taudin etenemiseen asti ja rokotuksia enintään 2 vuoden ajan tai taudin etenemiseen saakka. Osallistujat voivat lopettaa hoidon milloin tahansa omasta pyynnöstään tai heidät lopetetaan hoidosta taudin etenemisen tai hoidon aikana ilmenneen vakavan toksisuuden vuoksi. Osallistumisjakson odotetaan alkavan huhtikuussa 2016 ja päättyvän huhtikuussa 2018. Sen jälkeen seuraa enintään 2 vuoden seurantajakso. Viimeisen osallistujan viimeinen protokollavierailupäivä on viimeistään huhtikuussa 2020.

MDS- ja AML-potilaat, jotka saavat atsasitidiinihoitoa, rekrytoidaan Herlevin sairaalan hematologian osaston kautta. Koska kaikkia potilaita seurataan avohoidossa noin kuuden kuukauden ajan ennen sisällyttämistä atsasitidiinihoidon aikana, mahdolliset ehdokkaat voidaan tunnistaa varhaisessa vaiheessa ja heille voidaan tiedottaa asianmukaisesti ennen kuin suostumuslomake on allekirjoitettava.

EETTISET NÄKÖKOHDAT

Osallistuminen on vapaaehtoista ja sitä edeltää kirjallinen tietoinen suostumus. Hoito lopetetaan, jos sivuvaikutuksia ei voida hyväksyä, tai potilaan pyynnöstä milloin tahansa. Jos potilas ei ole kiinnostunut osallistumaan tutkimukseen, hoidetaan osaston tavanomaisten ohjeiden mukaan. Siksi tutkimusta pidetään eettisesti järkevänä.

Tutkimus noudattaa Helsinki-sopimuksen ohjeita ja vastuulääkäri saa tutkimuksen suorittamiseen luvan tieteelliseltä eettiseltä komitealta, Tanskan terveys- ja lääkevirastolta sekä Tanskan tietosuojavirastolta.