Vaccinazione peptidica in combinazione con azacitidina per pazienti con MDS e AML (AZACTA)

INTRODUZIONE

I pazienti con sindrome mielodisplastica ad alto rischio (MDS) e leucemia mieloide acuta (AML), a cui non può essere offerto un trattamento curativo, hanno una prognosi infausta con una sopravvivenza mediana di 11,5 mesi. Attualmente esiste un solo farmaco registrato che ha dimostrato di prolungare la sopravvivenza in questo gruppo di pazienti; l'agente ipometilante azacitidina (noto anche come 5-azacitidina o Vidaza®). Il trattamento non è curativo, ma aumenta la sopravvivenza mediana a circa due anni. La principale causa di morte è la malattia progressiva e c'è un enorme bisogno di nuove opzioni terapeutiche.

In questo studio combineremo l'immunoterapia sperimentale della vaccinazione peptidica con la terapia standard di azacitidina per il trattamento di pazienti con sindrome mielodisplastica ad alto rischio o leucemia mieloide acuta. Il nostro progetto dovrebbe ampliare le conoscenze in merito alla combinazione di immunoterapia e trattamento convenzionale e sarà essenziale per l'ulteriore sviluppo di questa modalità di trattamento.

SINDROME MIELODISPLASTICA (MDS)

L'accumulo di cambiamenti sia genetici che epigenetici nelle cellule staminali ematopoietiche è considerato lo sfondo per lo sviluppo di MDS. Nelle prime fasi della malattia, vi è un aumento dell'apoptosi, ma man mano che la malattia progredisce verso MDS o LMA ad alto rischio, vi è un accumulo di rotture cromosomiche, mutazioni puntiformi e ipermetilazione del promotore dei geni oncosoppressori, che risulta in un tumore più aggressivo e proliferativo. patologia. I sintomi clinici sono anemia, infezioni ripetute ed episodi emorragici associati alla disfunzione del midollo osseo.

Attualmente, l'unica opzione di trattamento curativo per MDS è il trapianto allogenico di midollo osseo. Si tratta di un trattamento ad alto rischio, fattibile solo nei pazienti più giovani con un donatore idoneo. Nel 2009 è stato pubblicato uno studio di fase III (AZA 001), che mostrava che i pazienti con MDS e AML ad alto rischio con

AZACITIDINA

L'effetto dell'azacitidina non è immediato in tutti i pazienti ed è quindi necessario procedere con un minimo di 5-6 cicli per determinare se il paziente risponde al trattamento. Al momento, l'azacitidina è lo standard di cura per tutti i pazienti con MDS e AML ad alto rischio con

Per i partecipanti a questo studio, l'azacitidina è la terapia standard e verrà somministrata secondo regimi di dosaggio standard e i partecipanti saranno valutati per la risposta al trattamento secondo criteri standard.

ANTIGENI ASSOCIATI AL TUMORE

Il principio alla base della vaccinazione contro il cancro si basa sulla capacità del sistema immunitario di discriminare tra cellule normali e maligne. Il sistema immunitario riconosce un modello alterato di espressione del peptide sulla superficie delle cellule maligne. Il modello alterato può comportare l'espressione di proteine ​​cellulari qualitativamente alterate, la semplice sovraespressione di proteine ​​normalmente presenti o l'espressione de novo di proteine/glicoproteine ​​normalmente non espresse in quel tessuto. Questa categoria di proteine ​​immuno-riconosciute è nota come antigeni associati al tumore. Quando le proteine ​​vengono degradate nelle cellule, i peptidi si presentano sulla superficie di queste cellule come un complesso con molecole di tipo tissutale (molecole HLA). Le cellule T possono quindi riconoscere i complessi peptide-HLA, tramite il suo recettore delle cellule T, con conseguente potenziale uccisione delle cellule tumorali, se si verifica un innesco sufficiente.

Per il presente studio, il gruppo degli antigeni del cancro ai testicoli (CTA) è di particolare interesse, poiché è noto che l'espressione di questi antigeni è regolata dalla metilazione e quindi influenzata dal trattamento ipometilante come l'azacitidina. I CTA sono noti per essere immunogenici e sono espressi solo in siti immunoprivilegiati, quindi fuori dalla portata delle risposte immunitarie, e sulle cellule tumorali, rendendoli bersagli ideali per la vaccinazione terapeutica contro il cancro.

PROGETTAZIONE DEL VACCINO

Abbiamo scelto specificamente tre CTA per i quali è stata dimostrata un'abbondante riespressione dopo il trattamento con azacitidina, tra cui NY-ESO-1, MAGE-A3 e PRAME. WT-1 è inoltre incluso poiché questa proteina ha dimostrato di essere un antigene importante nelle neoplasie ematologiche ed è parimenti sovraregolata in risposta al trattamento con azacitidina.

I peptidi che abbiamo scelto non sono mai stati usati insieme in questa particolare combinazione prima, ma il loro uso separatamente come vaccinazione terapeutica è ben studiato. Sono state utilizzate sia sequenze peptidiche più piccole che proteine ​​a lunghezza intera.

L'uso di peptidi lunghi sintetici per l'induzione e le risposte delle cellule T ha mostrato effetti superiori rispetto alle sequenze peptidiche minime sia nei topi che nell'uomo, inoltre è stato dimostrato che il peptide lungo sintetico viene elaborato e presentato in modo efficiente sia alle cellule T CD4 che CD8 del sistema immunitario. Inoltre, i peptidi lunghi hanno il vantaggio di consentire la presentazione di diversi epitopi di cellule T dipendenti dal tipo di HLA dei pazienti. Pertanto, la scelta di peptidi lunghi ridurrà al minimo l'impatto del tipo HLA dei pazienti e quindi nel presente studio consentirà l'inclusione dei partecipanti senza una selezione preventiva basata sull'espressione HLA.

I peptidi che abbiamo scelto sono compresi tra 25 e 29 aminoacidi e saranno miscelati come sospensione con Montanide ISA-51; un coadiuvante per vaccini a base di acqua e olio comunemente usato, coinvolto in oltre 150 studi registrati su Clinicaltrail.gov.

PROGETTAZIONE DI PROVA

Pazienti con MDS e AML ad alto rischio con

METODO DI STUDIO

PREPARAZIONE DEL VACCINO PEPTIDICO

Il vaccino peptidico sarà preparato in condizioni di laboratorio approvate GMP (approvate dall'Agenzia danese per i medicinali), che assicurano la qualità di un medicinale sterile. La produzione avviene nella stanza JM702, Herlev Hospital con il numero di approvazione 24223.

Di seguito una breve descrizione delle varie procedure. Il prodotto vaccino finale conterrà un'etichetta che fornisce informazioni sul contenuto del vaccino e il numero del progetto fornito dal dipartimento.

Peptidi

La vaccinazione sarà mirata contro quattro lunghe sequenze peptidiche delle proteine:

NY-ESO-1 (119-143, 25aa): PGVLLKEFTVSGNILTIRLTAADHR ; PRAME (423-447, 25aa): LQSLLQHLIGLSNLTHVLYPVPLES ; MAGE-A3 (255-279, 25aa): YLEYRQVPGSDPACYEFLWGPRALV ; WT1 (231-259, 29aa): SQLECMTWNQMNLGATLKGVAAGSSSSVK.

I peptidi saranno sintetizzati con una purezza >97% da un fornitore esterno, Pepscan Presto, Paesi Bassi. Prima dell'uso, sarà sciolto in DMSO, miscelato e filtrato sterile attraverso un filtro da 0,22 micron. Sui preparati verranno effettuati test di endotossine e di coltura batterica. I test di sterilità prima del rilascio di peptidi per il trattamento vaccinale vengono eseguiti dal laboratorio ematologico (posizione 54P4).

Adiuvante: Montanide ISA 51

Montanide ISA 51 è acquistato da Seppic Inc., Francia, in forma sterile. Useremo 0,5 ml di Montanide per vaccino.

Preparazione del vaccino

Il vaccino sarà generato come una miscela della preparazione del peptide e dell'adiuvante, sul lato, appena prima dell'iniezione.

Controllo microbiologico

Prima dell'uso, la miscela di peptidi viene sottoposta a test di endotossine e test microbiologici eseguiti dal Dipartimento di Microbiologia, Herlev Hospital.

DESIGN SPERIMENTALE

Questo è uno studio di fase I in aperto progettato per valutare la sicurezza della terapia combinata di azacitidina e vaccinazione peptidica in pazienti con MDS o AML.

Prevediamo di iscrivere tutti i partecipanti entro 24 mesi e di valutare lo studio 12 mesi dopo. I partecipanti continueranno con azacitidina fino alla progressione della malattia e con la vaccinazione fino a 2 anni o fino alla progressione della malattia. I partecipanti possono interrompere il trattamento in qualsiasi momento su loro richiesta o essere ritirati dal trattamento a seguito della progressione della malattia o di una grave tossicità durante il trattamento. Il periodo di inclusione dovrebbe iniziare ad aprile 2016 e concludersi ad aprile 2018. Successivamente segue un periodo di follow-up di massimo 2 anni. L'ultima data della visita protocollata dell'ultimo partecipante sarà al più tardi nell'aprile 2020.

I pazienti con MDS e AML, che ricevono un trattamento con azacitidina, saranno reclutati attraverso il Dipartimento di Ematologia dell'ospedale di Herlev. Poiché tutti i pazienti sono seguiti in regime ambulatoriale, per circa sei mesi prima dell'inclusione durante il trattamento con azacitidina, i possibili candidati possono essere identificati precocemente e adeguatamente informati prima che sia necessario firmare un modulo di consenso.

ASPETTI ETICI

La partecipazione è volontaria ed è preceduta da consenso informato scritto. Il trattamento verrà interrotto in caso di effetti collaterali inaccettabili o su richiesta del paziente in qualsiasi momento. Se un paziente non è interessato a partecipare alla sperimentazione, il trattamento verrà somministrato secondo le consuete linee guida del dipartimento. Lo studio è quindi considerato eticamente corretto.

Lo studio segue le linee guida dell'accordo di Helsinki e il medico responsabile ottiene un permesso dal comitato etico scientifico, dall'agenzia danese per la salute e i medicinali e dall'agenzia danese per la protezione dei dati per condurre lo studio.