血液透析患者におけるリンゴジュースの消費

被験者と研究デザイン

この事前事後パイロットの実現可能性調査では、被験者が独自のコントロールとして機能しました。 参加者は、2015 年 6 月から 8 月まで、フロリアノポリスの大都市圏、サンタ カタリーナ州 (ブラジル南部) にある血液透析クリニックから、次の選択基準で募集されました: 血液透析治療 3 か月以上、年齢 20 歳以上、肥満指数 ( BMI) ≥ 23 kg/m2。 除外基準は、リンゴに対するアレルギー、がんまたは後天性免疫不全症候群の存在、研究に登録する前の6か月未満の腎臓移植、登録前の30日間の酸化防止剤または栄養補助食品の摂取、開始前の6週間以内の入院でした。勉強したり、急病にかかったり。

被験者は、ポリフェノールが豊富な食品（すなわち、野菜、果物および果物を含む製品、チョコレート、紅茶、コーヒー、蜂蜜、およびあらゆるアルコール飲料）の摂取を避けることを除いて、研究期間中は通常の食生活を維持するように指示されました.介入前および介入中の2日以内。 2 つの異なる日に、各ボランティアは、透析セクションの直後に 300 mL の Fuji AJ を消費しました。 3 週間のウォッシュアウト期間の後、ボランティアは上記と同様の方法で 150 mL の Fuji AJ を飲みました。 AJ摂取の30分および60分前後に、生化学分析のために血液サンプルを採取しました。 このプロトコルは、健康なボランティアについて説明されている血清 OS バイオマーカーに対する AJ 消費の以前の好ましい効果を考慮して選択されました。

ベースラインの臨床および生化学データは、医療記録から取得されました。 この研究は、サンタカタリーナ連邦大学 (UFSC) の人間研究の倫理委員会によって承認されました (プロトコル番号 37090614.6.0000.0118)。 すべての参加者は、書面によるインフォームド コンセントを与えた。

りんごジュースと分析

富士りんごは、ブラジル、サンタカタリーナ州サンホアキン市 (緯度 28º 17' 39"、経度 49º 55' 56"、高度1.415 m)、2015 年の収穫時に商業的成熟段階で収穫されます。 収穫後、リンゴは 4 ± 1 °C で保存されました。 リンゴを素早く簡単に大量に摂取できるように、3.5 個のリンゴに相当する 300 mL の AJ と、1.5 個のリンゴに相当する 150 mL の AJ を使用しました。 ジュースを作る前に、果物は次亜塩素酸ナトリウムで消毒されました。 皮付きで種なしのリンゴを、水を加えずに遠心搾汁機でブレンドしました。 AJ の各用量が準備され、すぐに消費されました。

乾燥物質の含有量、総可溶性固形物、水素の可能性（pH）、およびAJの滴定可能な酸性度は、公式の方法に従って測定されました。 AJ 抽出物の総フェノール含有量は、Folin-Ciocalteu 比色法を使用して測定しました。 総フラバノール含有量は、p-ジメチルアミノシンナムアルデヒド (DMACA) メソッドを使用して推定されました。 総抗酸化能は、DPPH (2,2-ジフェニル-1-ピクリル-ヒドラジル-水和物) 法を使用して決定されました。 総単量体アントシアニンについては、分光光度法による pH 微分法を使用しました。 分析は、2 つの介入日に使用された各 AJ を 3 回繰り返して実施されました。

採血と実験方法

各実験日に、参加者からの血液サンプルが 3 つの異なる時点で収集されました。 静脈血サンプルは、真空システム (Vacutaner Becton Dickinson BD®、サンパウロ、ブラジル) を使用して、ヘパリン、エチレンジアミン四酢酸 (EDTA) を含むチューブ、または無添加のチューブに採取しました。 尿酸、リン、グルコース、カリウム、総抗酸化状態（TAS）および総酸化状態（TOS）を測定するために、血漿および血清を遠心分離（毎分3,000回転（RPM）、10分間、室温）によって直ちに得た。 内因性抗酸化酵素を定量化するために、全血のアリコートを溶解しました。 還元型グルタチオン (GSH) を測定するために、全血のアリコートを N-エチルマレイミド (NEM) で保存しました。 すべてのサンプルは、後で分析するために-80°Cですぐに保存されました。

血清尿酸、リン、およびグルコース濃度は、自動マルチ生化学分析装置（Cobas Miras Plus、Roche®、ドイツ）で市販のキット（Labtest Diagnostica SA、Lagoa Santa、Minas Gerais、ブラジル）を使用して決定しました。 製造元の指示に従って、血清カリウムレベルを自動化されたDimension Max System（Siemens Healthcare Diagnostics Products®、ドイツ）で測定しました。

Erelの方法に従って、TASおよびTOSアッセイを分光光度法で測定しました。 アスコルビン酸とGSHは、前述のように、高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を使用して決定されました 。 スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）活性は、ＳＯＤアッセイキット（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標）、セントルイス、ミズーリ州、米国）を製造業者の指示に従って使用して評価した。 カタラーゼ（CAT）活性は、前述の方法に従って分光測光法で決定されました。 グルタチオン ペルオキシダーゼ (GPx) 活性は、NADPH 酸化速度法を使用して決定されました。