Consumo de Suco de Maçã em Pacientes em Hemodiálise

Sujeitos e desenho do estudo

Neste estudo de viabilidade pré-pós-piloto, os sujeitos serviram como seus próprios controles. Os participantes foram recrutados em uma clínica de hemodiálise, localizada na região metropolitana de Florianópolis, Santa Catarina, no período de junho a agosto de 2015, com os seguintes critérios de inclusão: tratamento hemodialítico ≥ 3 meses, idade ≥ 20 anos e índice de massa corporal ( IMC) ≥ 23 kg/m2. Os critérios de exclusão foram alergia à maçã, presença de câncer ou síndrome da imunodeficiência adquirida, transplante renal há menos de 6 meses antes da inclusão no estudo, uso de suplementos antioxidantes ou nutricionais nos 30 dias anteriores à inscrição, internação hospitalar nas 6 semanas anteriores ao início do estudo estudar ou sofrer de uma doença aguda.

Os indivíduos foram instruídos a manter seus hábitos alimentares habituais durante o estudo, exceto para evitar a ingestão de alimentos ricos em polifenóis (ou seja, vegetais, frutas e produtos que contenham frutas, chocolate, chá, café, mel e qualquer bebida alcoólica). dentro de 2 dias antes e durante a intervenção. Em dois dias diferentes, cada voluntário consumiu 300 mL de Fuji AJ, imediatamente após a sessão de diálise. Após um período de washout de 3 semanas, os voluntários beberam 150 mL de Fuji AJ de maneira semelhante à descrita acima. Antes e após 30 e 60 min de consumo de AJ, amostras de sangue foram retiradas para análises bioquímicas. Este protocolo foi escolhido levando em consideração os efeitos favoráveis ​​anteriores do consumo de AJ nos biomarcadores séricos de OS descritos para voluntários saudáveis.

Os dados clínicos e bioquímicos basais foram obtidos dos prontuários médicos. Este estudo foi aprovado pelo comitê de ética em pesquisa com seres humanos da Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC) (número do protocolo 37090614.6.0000.0118) e todos os participantes deram consentimento por escrito e informado.

Sumo de maçã e análise

Maçãs Fuji foram obtidas dos Campos Experimentais Sazonais da Estação da Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina na cidade de São Joaquim, Santa Catarina, Brasil (latitude 28º 17' 39", longitude 49º 55' 56" e altitude 1.415 m), colhidas em estágio de maturação comercial durante a safra de 2015. Após a colheita, as maçãs foram armazenadas a 4 ± 1°C. Para permitir uma ingestão rápida e fácil de maçã em grandes quantidades, foram utilizados 300 mL de AJ, equivalente a 3,5 maçãs, e 150 mL de AJ, equivalente a 1,5 maçãs. Antes do preparo do suco, as frutas foram higienizadas em hipoclorito de sódio. Maçãs com casca e sem sementes foram misturadas em centrífuga sem adição de água. Cada dose de AJ foi preparada e consumida imediatamente.

Os teores de matéria seca, sólidos solúveis totais, potencial de hidrogênio (pH) e acidez titulável do AJ foram medidos seguindo métodos oficiais. O conteúdo fenólico total dos extratos de AJ foi medido pelo método colorimétrico de Folin-Ciocalteu. O teor total de flavonoides foi estimado pelo método do p-dimetilaminocinamaldeído (DMACA). A capacidade antioxidante total foi determinada pelo método DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazil-hidrato). Para a antocianina monomérica total, foi utilizado um método espectrofotométrico de pH diferencial. As análises foram realizadas com cada AJ utilizado nos dois dias de intervenção, em triplicata.

Amostragem de sangue e métodos laboratoriais

Em cada dia de experimento, amostras de sangue dos participantes foram coletadas em três momentos diferentes. Amostras de sangue venoso foram coletadas usando um sistema de vácuo (Vacutainer Becton Dickinson BD®, São Paulo, Brasil) em tubos contendo heparina, ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) ou tubos sem aditivos. Plasma e soro foram imediatamente obtidos por centrifugação (3.000 revoluções por minuto (RPM), 10 min, temperatura ambiente) para medição de ácido úrico, fósforo, glicose, potássio, Status Antioxidante Total (TAS) e Status Oxidante Total (TOS). Para quantificar as enzimas antioxidantes endógenas, uma alíquota de sangue total foi lisada. Para medir a glutationa reduzida (GSH), uma alíquota de sangue total foi preservada em N-etilmaleimida (NEM). Todas as amostras foram imediatamente armazenadas a -80°C para análise posterior em duplicata.

As concentrações séricas de ácido úrico, fósforo e glicose foram determinadas usando kits disponíveis comercialmente (Labtest Diagnóstica SA, Lagoa Santa, Minas Gerais, Brasil) em um analisador multibioquímico automatizado (Cobas Miras Plus, Roche®, Alemanha). Os níveis séricos de potássio foram medidos em um Dimension Max System automatizado (Siemens Healthcare Diagnostics Products®, Alemanha), de acordo com as instruções do fabricante.

Os ensaios TAS e TOS foram medidos espectrofotometricamente, de acordo com os métodos de Erel. Ácido ascórbico e GSH foram determinados por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC), conforme descrito anteriormente. A atividade da superóxido dismutase (SOD) foi avaliada com o SOD Assay Kit (Sigma Aldrich®, St. Louis, Missouri, EUA) de acordo com as instruções do fabricante. A atividade da catalase (CAT) foi determinada espectrofotometricamente de acordo com o método descrito anteriormente. A atividade da glutationa peroxidase (GPx) foi determinada pelo método da taxa de oxidação do NADPH.