Konzumace jablečného džusu u hemodialyzovaných pacientů

Předměty a design studia

V této před-po pilotní studii proveditelnosti subjekty sloužily jako jejich vlastní kontroly. Účastníci byli rekrutováni z hemodialyzační kliniky, která se nachází v metropolitní oblasti Florianópolis, stát Santa Catarina (jižní Brazílie), od června do srpna 2015 s následujícími kritérii zařazení: hemodialýza ≥ 3 měsíce, věk ≥ 20 let a index tělesné hmotnosti ( BMI) ≥ 23 kg/m2. Kritéria vyloučení byla alergie na jablko, přítomnost rakoviny nebo syndrom získané imunodeficience, transplantace ledvin méně než 6 měsíců před zařazením do studie, užívání antioxidantů nebo doplňků výživy během 30 dnů před zařazením, hospitalizace během 6 týdnů před začátkem studie. studovat nebo trpí akutním onemocněním.

Subjekty byly instruovány, aby po celou dobu studie dodržovaly své obvyklé stravovací návyky, s výjimkou vyhýbání se konzumaci potravin bohatých na polyfenoly (tj. zeleniny, ovoce a produktů obsahujících ovoce, čokolády, čaje, kávy, medu a jakýchkoli alkoholických nápojů). do 2 dnů před a během zásahu. Ve dvou různých dnech každý dobrovolník zkonzumoval 300 ml Fuji AJ bezprostředně po dialyzační sekci. Po vymývací periodě 3 týdnů dobrovolníci vypili 150 ml Fuji AJ podobným způsobem, jak je popsáno výše. Před a po 30 a 60 minutách konzumace AJ byly odebrány vzorky krve pro biochemickou analýzu. Tento protokol byl zvolen s ohledem na předchozí příznivé účinky konzumace AJ na biomarkery sérového OS popsané u zdravých dobrovolníků.

Základní klinická a biochemická data byla získána z lékařských záznamů. Tato studie byla schválena etickou komisí pro lidský výzkum Federální univerzity v Santa Catarina (UFSC) (číslo protokolu 37090614.6.0000.0118) a všichni účastníci dali písemný a informovaný souhlas.

Jablečná šťáva a analýza

Jablka Fuji byla získána z experimentálních sezónních polí na stanici Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina' ve městě São Joaquin, Santa Catarina, Brazílie (zeměpisná šířka 28º 17' 39", délka 49º 55' 56" a nadmořská výška 1,415 m), sklizené ve fázi komerčního zrání během sklizně v roce 2015. Po sklizni byla jablka skladována při 4 ± 1 °C. Pro umožnění rychlého a snadného příjmu velkých množství jablek bylo použito 300 ml AJ, což odpovídá 3,5 jablkům, a 150 ml AJ, což odpovídá 1,5 jablkům. Před přípravou šťávy byly plody dezinfikovány v chlornanu sodném. Jablka se slupkou a bez semen byla smíchána v odstředivém odšťavňovači bez přidání vody. Každá dávka AJ byla připravena a okamžitě spotřebována.

Obsah sušiny, celkové rozpustné pevné látky, potenciál vodíku (pH) a titrovatelná kyselost AJ byly měřeny podle oficiálních metod. Celkový obsah fenolů v extraktech AJ byl měřen kolorimetricky metodou Folin-Ciocalteu. Celkový obsah flavanolu byl odhadnut pomocí metody p-dimethylaminocinnamaldehydu (DMACA). Celková antioxidační kapacita byla stanovena metodou DPPH (2,2-difenyl-1-pikryl-hydrazyl-hydrát). Pro celkový monomerní anthokyanin byla použita spektrofotometrická pH diferenciální metoda. Analýzy byly provedeny s každou AJ použitou ve dvou intervenčních dnech, v triplikátech.

Odběry krve a laboratorní metody

V každém experimentálním dni byly odebírány vzorky krve účastníků ve třech různých okamžicích. Vzorky žilní krve byly odebírány pomocí vakuového systému (Vacutainer Becton Dickinson BD®, São Paulo, Brazílie) do zkumavek obsahujících heparin, kyselinu ethylendiamintetraoctovou (EDTA) nebo zkumavek bez přísad. Plazma a sérum byly okamžitě získány centrifugací (3000 otáček za minutu (RPM), 10 minut, pokojová teplota) pro měření kyseliny močové, fosforu, glukózy, draslíku, celkového antioxidačního stavu (TAS) a celkového oxidačního stavu (TOS). Aby se kvantifikovaly endogenní antioxidační enzymy, byl lyžován alikvot plné krve. Za účelem měření redukovaného glutathionu (GSH) byl alikvot plné krve uchován v N-ethylmaleimidu (NEM). Všechny vzorky byly okamžitě skladovány při -80 °C pro pozdější analýzu v duplikátech.

Koncentrace kyseliny močové, fosforu a glukózy v séru byly stanoveny pomocí komerčně dostupných souprav (Labtest Diagnóstica SA, Lagoa Santa, Minas Gerais, Brazílie) v automatickém multi-biochemickém analyzátoru (Cobas Miras Plus, Roche®, Německo). Hladiny draslíku v séru byly měřeny v automatizovaném systému Dimension Max (Siemens Healthcare Diagnostics Products®, Německo), podle pokynů výrobce.

Testy TAS a TOS byly měřeny spektrofotometricky podle Erelových metod. Kyselina askorbová a GSH byly stanoveny pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC), jak bylo popsáno dříve. Aktivita superoxiddismutázy (SOD) byla hodnocena pomocí SOD Assay Kit (Sigma Aldrich®, St. Louis, Missouri, USA) podle pokynů výrobce. Aktivita katalázy (CAT) byla stanovena spektrofotometricky podle výše popsané metody. Aktivita glutathionperoxidázy (GPx) byla stanovena pomocí metody rychlosti oxidace NADPH.