Потребление яблочного сока у пациентов, находящихся на гемодиализе

Предметы и дизайн исследования

В этом предварительном пилотном технико-экономическом обосновании испытуемые выступали в качестве собственных контролей. Участники были набраны из клиники гемодиализа, расположенной в столичном районе Флорианополиса, штат Санта-Катарина (южная Бразилия), с июня по август 2015 г. со следующими критериями включения: лечение гемодиализом ≥ 3 месяцев, возраст ≥ 20 лет и индекс массы тела ( ИМТ) ≥ 23 кг/м2. Критерии исключения: аллергия на яблоко, наличие рака или синдрома приобретенного иммунодефицита, трансплантация почки менее чем за 6 месяцев до включения в исследование, прием антиоксидантов или пищевых добавок в течение 30 дней до включения, госпитализация в течение 6 недель до начала исследования. учится или страдает от острого заболевания.

Субъекты были проинструктированы придерживаться своих обычных диетических привычек на время исследования, за исключением избегания потребления продуктов, богатых полифенолами (например, овощей, фруктов и фруктово-содержащих продуктов, шоколада, чая, кофе, меда и любых алкогольных напитков). в течение 2 дней до и во время вмешательства. В два разных дня каждый доброволец потреблял 300 мл Fuji AJ сразу после сеанса диализа. После периода вымывания в течение 3 недель добровольцы выпили 150 мл Fuji AJ аналогичным образом, как описано выше. До и через 30 и 60 мин приема ЖЖ брали образцы крови для биохимического анализа. Этот протокол был выбран с учетом предыдущих благоприятных эффектов потребления AJ на биомаркеры OS в сыворотке, описанные для здоровых добровольцев.

Исходные клинические и биохимические данные были получены из медицинских карт. Это исследование было одобрено комитетом по этике исследований на людях Федерального университета Санта-Катарины (UFSC) (номер протокола 37090614.6.0000.0118). и все участники дали письменное и информированное согласие.

Яблочный сок и анализ

Яблоки Фуджи были получены с экспериментальных сезонных полей на станции Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina в городе Сан-Хоакин, Санта-Катарина, Бразилия (28º 17' 39", долгота 49º 55' 56" и высота над уровнем моря). 1,415 м), собранные в стадии товарного созревания во время урожая 2015 года. Яблоки после сбора урожая хранили при температуре 4 ± 1°С. Чтобы обеспечить быстрое и легкое потребление яблок в больших количествах, использовали 300 мл AJ, что эквивалентно 3,5 яблокам, и 150 мл AJ, что эквивалентно 1,5 яблокам. Перед приготовлением сока плоды дезинфицировали гипохлоритом натрия. Яблоки с кожурой и без косточек купажировали в центробежной соковыжималке без добавления воды. Каждая доза AJ готовилась и потреблялась немедленно.

Содержание сухого вещества, общее количество растворимых сухих веществ, потенциал водорода (pH) и титруемую кислотность AJ измеряли в соответствии с официальными методами. Общее содержание фенолов в экстрактах AJ измеряли колориметрическим методом Фолина-Чокальтеу. Общее содержание флаванолов оценивали методом пара-диметиламинокоричного альдегида (ДМАКА). Общую антиоксидантную способность определяли методом DPPH (2,2-дифенил-1-пикрилгидразилгидрат). Для общего количества мономерных антоцианов использовали спектрофотометрический дифференциальный метод pH. Анализы проводились с каждым AJ, использованным в течение двух дней вмешательства, в трех экземплярах.

Забор крови и лабораторные методы

В каждый день эксперимента образцы крови участников собирали в три разных момента. Образцы венозной крови собирали с помощью вакуумной системы (Vacutainer Becton Dickinson BD®, Сан-Паулу, Бразилия) в пробирки, содержащие гепарин, этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА) или пробирки без добавок. Плазму и сыворотку немедленно получали центрифугированием (3000 оборотов в минуту (об/мин), 10 мин, комнатная температура) для измерения мочевой кислоты, фосфора, глюкозы, калия, общего антиоксидантного статуса (ТАС) и общего оксидантного статуса (ОСО). Для количественного определения эндогенных антиоксидантных ферментов лизировали аликвоту цельной крови. Для измерения восстановленного глутатиона (GSH) аликвоту цельной крови сохраняли в N-этилмалеимиде (NEM). Все образцы были немедленно сохранены при -80°C для последующего анализа в двух повторностях.

Концентрации мочевой кислоты, фосфора и глюкозы в сыворотке определяли с использованием имеющихся в продаже наборов (Labtest Diagnóstica SA, Lagoa Santa, Минас-Жерайс, Бразилия) в автоматизированном мультибиохимическом анализаторе (Cobas Miras Plus, Roche®, Германия). Уровни калия в сыворотке измеряли в автоматизированной системе Dimension Max System (Siemens Healthcare Diagnostics Products®, Германия) в соответствии с инструкциями производителя.

Анализы TAS и TOS измеряли спектрофотометрически в соответствии с методами Эреля. Аскорбиновую кислоту и GSH определяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), как описано ранее. Активность супероксиддисмутазы (СОД) оценивали с использованием набора для анализа СОД (Sigma Aldrich®, Сент-Луис, Миссури, США) в соответствии с инструкциями производителя. Активность каталазы (КАТ) определяли спектрофотометрически по ранее описанному методу. Активность глутатионпероксидазы (GPx) определяли методом скорости окисления НАДФН.