Consumo de jugo de manzana en pacientes en hemodiálisis

Temas y diseño del estudio

En este estudio de viabilidad piloto previo y posterior, los sujetos sirvieron como sus propios controles. Los participantes fueron reclutados de una clínica de hemodiálisis, ubicada en el área metropolitana de Florianópolis, estado de Santa Catarina (sur de Brasil), de junio a agosto de 2015 con los siguientes criterios de inclusión: tratamiento de hemodiálisis ≥ 3 meses, edad ≥ 20 años e índice de masa corporal ( IMC) ≥ 23 kg/m2. Los criterios de exclusión fueron alergia a la manzana, presencia de cáncer o síndrome de inmunodeficiencia adquirida, trasplante de riñón menos de 6 meses antes de la inclusión en el estudio, tomar suplementos antioxidantes o nutricionales durante los 30 días anteriores a la inclusión, haber sido hospitalizado dentro de las 6 semanas anteriores al inicio del estudio. estudiar o padecer una enfermedad aguda.

Se instruyó a los sujetos para que mantuvieran sus hábitos dietéticos habituales durante la duración del estudio, excepto evitar la ingesta de alimentos ricos en polifenoles (es decir, verduras, frutas y productos que contengan frutas, chocolate, té, café, miel y cualquier bebida alcohólica) dentro de los 2 días antes y durante la intervención. En dos días diferentes, cada voluntario consumió 300 ml de Fuji AJ, inmediatamente después de una sección de diálisis. Después de un período de lavado de 3 semanas, los voluntarios bebieron 150 ml de Fuji AJ de manera similar a la descrita anteriormente. Antes y después de 30 y 60 min de consumo de AJ, se extrajeron muestras de sangre para análisis bioquímico. Este protocolo se eligió teniendo en cuenta los efectos favorables anteriores del consumo de AJ en los biomarcadores séricos de OS descritos para voluntarios sanos.

Los datos clínicos y bioquímicos basales se obtuvieron de las historias clínicas. Este estudio fue aprobado por el comité de ética de investigaciones en seres humanos de la Universidad Federal de Santa Catarina (UFSC) (número de protocolo 37090614.6.0000.0118) y todos los participantes dieron su consentimiento por escrito e informado.

Jugo de manzana y análisis.

Las manzanas Fuji se obtuvieron de los Campos Experimentales Estacionales de la Estación de la Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina en la ciudad de São Joaquín, Santa Catarina, Brasil (latitud 28º 17' 39", longitud 49º 55' 56" y altitud 1.415 m), recolectados en su etapa de maduración comercial durante la cosecha 2015. Después de la cosecha, las manzanas se almacenaron a 4 ± 1°C. Para permitir una ingesta rápida y fácil de manzanas en grandes cantidades, se utilizaron 300 mL de AJ, equivalentes a 3,5 manzanas, y 150 mL de AJ, equivalentes a 1,5 manzanas. Antes de preparar el jugo, las frutas se higienizaron en hipoclorito de sodio. Se mezclaron manzanas con cáscara y sin semillas en un extractor de jugo centrífugo sin adición de agua. Cada dosis de AJ fue preparada y consumida inmediatamente.

Los contenidos de materia seca, sólidos solubles totales, potencial de hidrógeno (pH) y acidez titulable de AJ se midieron siguiendo métodos oficiales. El contenido fenólico total de los extractos de AJ se midió mediante el método colorimétrico de Folin-Ciocalteu. El contenido total de flavonoides se estimó utilizando el método de p-dimetilaminocinamaldehído (DMACA). La capacidad antioxidante total se determinó mediante el método DPPH (2,2-difenil-1-picril-hidrazil-hidrato). Para la antocianina monomérica total, se utilizó un método espectrofotométrico de diferencial de pH. Los análisis se realizaron con cada AJ utilizado en los dos días de intervención, por triplicado.

Muestreo de sangre y métodos de laboratorio.

En cada día de experimento, se recolectaron muestras de sangre de los participantes en tres momentos diferentes. Las muestras de sangre venosa se recogieron mediante un sistema de vacío (Vacutainer Becton Dickinson BD®, São Paulo, Brasil) en tubos que contenían heparina, ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) o tubos sin aditivos. El plasma y el suero se obtuvieron inmediatamente por centrifugación (3000 revoluciones por minuto (RPM), 10 min, temperatura ambiente) para la medición de ácido úrico, fósforo, glucosa, potasio, estado antioxidante total (TAS) y estado oxidante total (TOS). Para cuantificar las enzimas antioxidantes endógenas, se lisó una alícuota de sangre entera. Para medir el glutatión reducido (GSH), se conservó una alícuota de sangre entera en N-etilmaleimida (NEM). Todas las muestras se almacenaron inmediatamente a -80°C para su posterior análisis por duplicado.

Las concentraciones séricas de ácido úrico, fósforo y glucosa se determinaron utilizando kits disponibles comercialmente (Labtest Diagnóstica SA, Lagoa Santa, Minas Gerais, Brasil) en un analizador multibioquímico automatizado (Cobas Miras Plus, Roche®, Alemania). Los niveles de potasio sérico se midieron en un sistema automatizado Dimension Max (Siemens Healthcare Diagnostics Products®, Alemania), de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Los ensayos de TAS y TOS se midieron espectrofotométricamente, según los métodos de Erel. El ácido ascórbico y el GSH se determinaron mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), como se describió anteriormente. La actividad de superóxido dismutasa (SOD) se evaluó utilizando SOD Assay Kit (Sigma Aldrich®, St. Louis, Missouri, EE. UU.) de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La actividad de catalasa (CAT) se determinó espectrofotométricamente según el método descrito anteriormente. La actividad de la glutatión peroxidasa (GPx) se determinó utilizando el método de tasa de oxidación de NADPH.