Konsumtion av äppeljuice hos hemodialyspatienter

Ämnen och studiedesign

I denna pre-post pilot genomförbarhetsstudie fungerade ämnen som sina egna kontroller. Deltagarna rekryterades från en hemodialysklinik i Florianópolis storstadsområde, delstaten Santa Catarina (södra Brasilien), från juni till augusti 2015 med följande inklusionskriterier: hemodialysbehandling ≥ 3 månader, ålder ≥ 20 år och body mass index ( BMI) ≥ 23 kg/m2. Uteslutningskriterier var allergi mot äpple, förekomst av cancer eller förvärvat immunbristsyndrom, njurtransplantation mindre än 6 månader innan inskrivningen i studien, intag av antioxidanter eller näringstillskott under de 30 dagarna före inskrivningen, efter att ha varit inlagd på sjukhus inom 6 veckor före början av studien. studier eller lider av en akut sjukdom.

Försökspersonerna instruerades att behålla sina vanliga kostvanor under studiens varaktighet, förutom att undvika intag av polyfenolrika livsmedel (dvs. grönsaker, frukt och produkter innehållande frukt, choklad, te, kaffe, honung och andra alkoholhaltiga drycker) inom 2 dagar före och under intervention. På två olika dagar konsumerade varje frivillig 300 ml Fuji AJ, omedelbart efter en dialyssektion. Efter en uttvättningsperiod på 3 veckor drack de frivilliga 150 ml Fuji AJ på liknande sätt som beskrivits ovan. Före och efter 30 och 60 min av AJ-konsumtion togs blodprover för biokemisk analys. Detta protokoll valdes med hänsyn till de tidigare gynnsamma effekterna av AJ-konsumtion på serum OS-biomarkörer som beskrivs för friska frivilliga.

Kliniska och biokemiska baslinjedata erhölls från medicinska journaler. Denna studie godkändes av etikkommittén för mänsklig forskning vid Federal University of Santa Catarina (UFSC) (protokollnummer 37090614.6.0000.0118) och alla deltagare gav skriftligt och informerat samtycke.

Äppeljuice och analys

Fuji-äpplen erhölls från de experimentella säsongsfälten vid stationen Empresa de Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina' i staden São Joaquin, Santa Catarina, Brasilien (latitud 28º 17' 39", longitud 49º 55' 56" och höjd 1.415 m), skördade i sitt kommersiella mognadsstadium under 2015 års skörd. Efter skörd lagrades äpplen vid 4 ± 1°C. För att möjliggöra ett snabbt och enkelt äppelintag i stora mängder användes 300 mL AJ, motsvarande 3,5 äpplen, och 150 mL AJ, motsvarande 1,5 äpplen. Innan saften bereddes sanerades frukterna i natriumhypoklorit. Äpplen med skal och inga frön blandades i en centrifugaljuicextraktor utan vattentillsats. Varje dos av AJ bereddes och konsumerades omedelbart.

Halten av torrsubstans, totalt lösligt fast material, potential för väte (pH) och titrerbar surhet av AJ mättes enligt officiella metoder. Den totala fenolhalten i AJ-extrakten mättes med Folin-Ciocalteu-metoden kolorimetrisk. Den totala flavanolhalten uppskattades med användning av p-dimetylaminokanelmaldehyd (DMACA)-metoden. Den totala antioxidantkapaciteten bestämdes med användning av DPPH-metoden (2,2-difenyl-1-picryl-hydrazyl-hydrat). För totalt monomert antocyanin användes en spektrofotometrisk pH-skillnadsmetod. Analyser utfördes med varje AJ som användes under de två interventionsdagarna, i tre exemplar.

Blodprovstagning och laboratoriemetoder

Under varje experimentdag samlades blodprover från deltagarna i tre olika ögonblick. Venösa blodprover samlades med hjälp av ett vakuumsystem (Vacutainer Becton Dickinson BD®, São Paulo, Brasilien) i heparin, etylendiamintetraättiksyra (EDTA)-innehållande rör eller tillsatsfria rör. Plasma och serum erhölls omedelbart genom centrifugering (3 000 varv per minut (RPM), 10 min, rumstemperatur) för mätning av urinsyra, fosfor, glukos, kalium, Total Antioxidant Status (TAS) och Total Oxidant Status (TOS). För att kvantifiera de endogena antioxidantenzymerna lyserades en alikvot av helblod. För att mäta reducerat glutation (GSH) bevarades en alikvot av helblod i N-etylmaleimid (NEM). Alla prover lagrades omedelbart vid -80°C för senare analys i duplikat.

Serumurinsyra-, fosfor- och glukoskoncentrationer bestämdes med användning av kommersiellt tillgängliga kit (Labtest Diagnóstica SA, Lagoa Santa, Minas Gerais, Brasilien) i en automatiserad multibiokemisk analysator (Cobas Miras Plus, Roche®, Tyskland). Serumkaliumnivåer mättes i ett automatiserat Dimension Max System (Siemens Healthcare Diagnostics Products®, Tyskland), enligt tillverkarens instruktioner.

TAS- och TOS-analyser mättes spektrofotometriskt, enligt Erels metoder. Askorbinsyra och GSH bestämdes med användning av högpresterande vätskekromatografi (HPLC), som tidigare beskrivits. Superoxiddismutas (SOD)-aktiviteten utvärderades med användning av SOD Assay Kit (Sigma Aldrich®, St. Louis, Missouri, USA) enligt tillverkarens instruktioner. Katalas (CAT) aktivitet bestämdes spektrofotometriskt enligt den tidigare beskrivna metoden. Glutationperoxidas (GPx)-aktiviteten bestämdes med användning av NADPH-oxidationshastighetsmetoden.