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肺炎を早期に除外するための喀痰スクリーニング検査 (self-test)

2017年8月19日 更新者:Fariba Nayeri、University Hospital, Linkoeping
呼吸器感染症の臨床症状がある患者では、複数の耐性菌の発生を避けるために、抗生物質による治療が必要な症例を迅速に特定することが重要です。 局所的な急性期反応物質の同定は、損傷部位での細菌感染に対する宿主の反応を評価するのに役立ちます。 今回、研究者らは、多糖類に対する特異的結合親和性を有する局所的に生成されたタンパク質に基づいて、手頃な価格で安定した実行可能かつ正確な診断ツールを開発した。 研究者らはさらに、新規のテストストリップが肺炎を除外する能力を評価した。

調査の概要

詳細な説明

下気道感染症は、敗血症、呼吸不全、肺組織壊死、および多臓器不全によって突然悪化する可能性がある深刻な状況です。 したがって、経験的な抗生物質治療は、感染が疑われ、培養物および/またはその他の診断検査が入手されるとすぐに開始されるのが一般的であり、これが抗生物質処方の主な理由となっています。 広範な抗生物質の過剰使用と誤用により、複数の耐性菌株が出現し、健康に重大な脅威をもたらしています。 特に抗生物質が処方箋なしで入手できる地域では、抗生物質の過剰使用を防ぐための実用的な解決策が非常に必要とされています。

病態生理学的な研究では、感染は細菌やウイルスの異常増殖のみによって生じるのではなく、むしろ微生物が宿主の免疫系を超えて侵入することによって生じることが示されています。 したがって、感染の評価には、微生物の存在と患者の体内で活性化される防御機構の両方を調査する必要があります。 細菌の異常増殖は、肺組織の炎症、感染領域への白血球の補充、ケモカインとサイトカインの産生と放出を引き起こし、肺胞が液体で満たされる可能性があり、患者は痰や膿を伴う咳、発熱を発症します。 、悪寒、呼吸困難。

下気道感染症の微生物学的診断には、顕微鏡、定量培養、および PCR を使用した喀痰検査による侵入微生物の評価が必要です。 しかし、そのような微生物学的研究は、肺炎の管理においては限定的な価値しかありません。 複数の微生物叢により、慢性気管支炎患者の培養物の解釈が困難になります。 また、病原性細菌は喉の細菌叢に出現する細菌と同一であることが多いため、院内肺炎の培養物を評価することも困難です。 免疫抑制患者は、白血球数が少ない喀痰を頻繁に出します。 呼吸や循環の状態などの患者の臨床徴候は、治療効果を判断するための最も信頼できるマーカーです。

実際には、ほとんどの医師は、特に集中治療室に入院している高リスク患者において、治療の効果を注意深く監視するために、初期段階で追加のマーカーを検査することを選択します。 一般的に使用される全身マーカーには、体温、C 反応性タンパク質 (CRP)、プロカルシトニン (PCT)、インターロイキン 6 (IL-6) などがあります。 肝細胞増殖因子(HGF)濃度は、感染症などによる臓器損傷時に増加すると報告されています。 研究では、肺炎患者の血清および呼気凝縮液中の HGF 濃度が増加し、HGF の存在が生存と有意に相関していることが示されています。 さらに、HGF レベルは、適切な抗生物質治療を開始してから 48 時間以内に著しく減少します。 表面プラズモン共鳴 (SPR) の結果は、急性感染中に産生される HGF が細胞外マトリックス成分ヘパラン硫酸プロテオグリカン (HSPG) に対して高い親和性を示すことを示しています。 これらの発見は、喀痰中の HGF 評価が損傷部位での細菌感染を検出するためのツールとなり得ることを示唆しています。

タンパク質は、対応する抗体との特異的な相互作用に基づいて検出できます。 ただし、この測定システムは専門的なリソースに依存しているため、設備のないセンターやセルフテストとしての有用性は限られています。 異色症は、特定のアニリン色素が発色性物質に結合したときに示す特徴的な色の変化です。 この現象は組織学で広く使用されています。 メチレンブルー (O-トルイジン) は、硫酸化グリカンなどの高分子量多糖類に結合すると青からピンクに変化する優れた異染性色素です。 硫酸化グリカンに対して高い親和性を持つタンパク質を比例量添加すると、ピンクの色素はすぐに青に戻ります (逆性異色腫)。

今回、研究者らはこのアプローチを使用して、喀痰中のデキストラン硫酸結合タンパク質の存在を評価するための新しいストリップテスト(本明細書ではインデックステキストと呼ぶ)を開発した。 次に研究者らは、リンシェーピングの大学病院微生物学部に検査のために送られた残りの喀痰サンプルを分析することにより、喀痰中の細菌感染を検出するためのこのストリップ検査の精度を評価した。

研究の種類

観察的

入学 (実際)

467

連絡先と場所

このセクションには、調査を実施する担当者の連絡先の詳細と、この調査が実施されている場所に関する情報が記載されています。

研究場所

    • Östergotland
      • Linköping、Östergotland、スウェーデン、58185
        • Department of Infectious Diseases

参加基準

研究者は、適格基準と呼ばれる特定の説明に適合する人を探します。これらの基準のいくつかの例は、人の一般的な健康状態または以前の治療です。

適格基準

就学可能な年齢

  • 大人
  • 高齢者

健康ボランティアの受け入れ

いいえ

受講資格のある性別

全て

サンプリング方法

確率サンプル

調査対象母集団

2015年11月1日から2016年1月30日までに、呼吸器感染症の疑いでリンシェーピング大学病院のオープンな医療専門施設を検索したか、リンシェーピング大学病院の別の診療所の病棟に入院したすべての症例と喀痰サンプルが培養のために採取された。リンシェーピングの大学病院微生物学部にて。

説明

包含基準:

  • 喀痰サンプルはルーチン診断のために収集され、収集後 12 時間以内に検査室に到着し、顕微鏡検査により代表的なものと見なされ、培養後 4 ~ 8℃ に保たれました。

除外基準:

  • 上記のようにサンプルが収集されなかった

研究計画

このセクションでは、研究がどのように設計され、研究が何を測定しているかなど、研究計画の詳細を提供します。

研究はどのように設計されていますか?

デザインの詳細

  • 観測モデル:コホート
  • 時間の展望:回顧

コホートと介入

グループ/コホート
介入・治療
残った新鮮な喀痰
2015 年 11 月 1 日から 2016 年 1 月 30 日までの間に、認定 (1993 年から ISO 17025 および 15189) 認定検査室での喀痰培養の標準要件に基づいて微生物部門に送信されたすべての新鮮な喀痰サンプルは、検査後冷蔵 (4 ~ 8 ℃) で保管されました。顕微鏡による分析と、夕方に研究看護師によって収集されコード化されるまで培養されました(残りのサンプル)。
合計 467 のサンプルがさまざまな診療所から収集されましたが、診断手順と治療アプローチは研究グループにはまったく知られていませんでした。 コード化されたサンプルは 4 ~ 8°C で保存され、サンプリング後 72 時間以内に喀痰ストリップ検査を使用して分析されました。 2016 年 4 月から 6 月にかけて、医師と研究看護師がジャーナルをレビューしました。 年齢、性別、入院期間、臨床症状、血液および喀痰の培養およびPCR、その結果、X線、抗生物質による治療、CRB-65および最終診断コード(ICD-10)が記録された。 Excel ファイルで文書化されています。

この研究は何を測定していますか?

主要な結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
肺炎を除外する陰性的中率
時間枠:2年以内

喀痰サンプルは、患者や最終的な診断についての知識なしに無作為に収集されました。 診断は、患者が診療所から退院した後に初めて確立されました。

呼吸器感染症 肺炎 肺炎の診断を定義するために次の基準が使用されました。

  1. 臨床徴候と症状
  2. 最近の胸部X線検査で検出された変化
  3. 以前の抗生物質の摂取に関係なく、抗生物質による治療を受けた。
  4. 究極の診断名 J13-J18-J690 (ICD-10)。 市中肺炎:過去に呼吸器疾患を患っていない患者。

院内感染(院内)肺炎:患者(n=11)は入院後少なくとも48~72時間以内に病院で肺炎を発症した。

2年以内

二次結果の測定

結果測定
メジャーの説明
時間枠
喀痰中のHGFおよびS100A8-A9(カルプロテクチン)濃度(Elisa)との相関
時間枠:サンプルはサンプリング後-20℃で冷凍保存され、4か月後に解凍され、1日以内に分析が行われました。
免疫反応性のヒト HGF およびカルプロテクチン (ヒト S100A8/S100A9 ヘテロ二量体) の濃度を、市販の ELISA キット (Quantikine ELISA; R&D Systems, Inc.、ミネアポリス、ミネソタ州、米国) を使用した ELISA (ランダムに選択した 80 サンプル) によって評価しました。 この方法では、血清、血漿、培地、およびその他の体液中の HGF およびカルプロテクチンを測定します。 -20℃で保存されていた喀痰サンプルを解凍し、分析前に1000gで10分間遠心分離しました。 このアッセイに関して供給者によって定義された最小検出可能用量 (MDD) は、HGF については 0.04 ng/ml、カルプロテクチンについては 0.086 ng/ml でした。
サンプルはサンプリング後-20℃で冷凍保存され、4か月後に解凍され、1日以内に分析が行われました。
表面プラズモン共鳴によるHGF分子部位への結合親和性との相関
時間枠:47 個のサンプルにおいて、Elisa と SPR のペア分析は、サンプリング後 4 か月以内に -20℃ に保管されたサンプルに対して実行されました。
ランダムに選択された 47 個のサンプルに対してペア分析が実行されました。 測定およびリガンド固定化手順は、Biacore 2000 システム (GE Healthcare Bio-Sciences AB、スウェーデン、ウプサラ) を使用して実施されました。 3 つの異なるリガンドが SPR チップ上の別々のチャネルに固定化されました。 リガンドは、ヒト HGFβ の N 末端 (N-19)、ヒト HGFα の N 末端 (N-17)、およびヒト HGFα のアミノ酸 32 ~ 176 (H -145)。 これらのリガンドを 10 mM 酢酸緩衝液 (pH 4.5) で 1:10 に希釈し、カルボキシメチル化デキストラン CM5 チップに固定化しました。
47 個のサンプルにおいて、Elisa と SPR のペア分析は、サンプリング後 4 か月以内に -20℃ に保管されたサンプルに対して実行されました。

その他の成果指標

結果測定
メジャーの説明
時間枠
リンシェーピングの感染症診療所における過去数十年間の肺炎の管理ルーティン
時間枠:データは、1970年、1980年、1990年にリンシェーピングの感染症科に入院した患者(12月から3月)の論文雑誌から得たものです。
私たちは、1970年から病棟に入院し、肺炎/気管支肺炎の診断で退院した患者のアーカイブされた論文ジャーナルを研究しました。 私たちは、同じセンターで使用され、肺炎の正確な診断に影響を与えた診断アプローチを特定することを目的としました。 患者は1月から12月までの病棟への入院日に応じてコードを受け取り、そのコードに従って帳簿に登録された。 特定の診断に属するコードはカードに集められ、箱に別々に保管されました (1 枚のカードが 1 つの診断と 1 年に対応しました)。 われわれは、1970年、1980年、1990年に肺炎と診断されたコード化された最初の40例(ICD-9診断コード486.9)を無作為に選択し、論文誌を収集して診断基準を特定した。
データは、1970年、1980年、1990年にリンシェーピングの感染症科に入院した患者(12月から3月)の論文雑誌から得たものです。

協力者と研究者

ここでは、この調査に関係する人々や組織を見つけることができます。

研究記録日

これらの日付は、ClinicalTrials.gov への研究記録と要約結果の提出の進捗状況を追跡します。研究記録と報告された結果は、国立医学図書館 (NLM) によって審査され、公開 Web サイトに掲載される前に、特定の品質管理基準を満たしていることが確認されます。

主要日程の研究

研究開始 (実際)

2015年11月1日

一次修了 (実際)

2016年2月5日

研究の完了 (実際)

2016年4月1日

試験登録日

最初に提出

2017年8月16日

QC基準を満たした最初の提出物

2017年8月19日

最初の投稿 (実際)

2017年8月22日

学習記録の更新

投稿された最後の更新 (実際)

2017年8月22日

QC基準を満たした最後の更新が送信されました

2017年8月19日

最終確認日

2017年8月1日

詳しくは

本研究に関する用語

追加の関連 MeSH 用語

その他の研究ID番号

  • Dexact-resp

個々の参加者データ (IPD) の計画

個々の参加者データ (IPD) を共有する予定はありますか?

はい

IPD プランの説明

統計計算に含まれたサンプル、1970~1980~1990年の感染症、肺炎の除外症例、肺炎の診断のために当センターで実施された検査の実際の費用、および表A~Lの実現可能性テストに参加したボランティアに関する情報。

IPD 共有時間枠

データは利用可能であり、URL アドレスが定義されるのを待っています。

IPD 共有サポート情報タイプ

  • 研究プロトコル
  • インフォームド コンセント フォーム (ICF)
  • 臨床試験報告書(CSR)

医薬品およびデバイス情報、研究文書

米国FDA規制医薬品の研究

いいえ

米国FDA規制機器製品の研究

いいえ

この情報は、Web サイト clinicaltrials.gov から変更なしで直接取得したものです。研究の詳細を変更、削除、または更新するリクエストがある場合は、register@clinicaltrials.gov。 までご連絡ください。 clinicaltrials.gov に変更が加えられるとすぐに、ウェブサイトでも自動的に更新されます。

残った痰の臨床試験

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