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Un test de dépistage des expectorations pour exclure la pneumonie à un stade précoce (self-test)

19 août 2017 mis à jour par: Fariba Nayeri, University Hospital, Linkoeping
Chez les patients présentant des symptômes cliniques d'infection respiratoire, l'identification rapide des cas nécessitant une antibiothérapie est cruciale pour éviter le développement de bactéries multirésistantes. L'identification des réactifs locaux de phase aiguë peut aider à évaluer la réponse de l'hôte à une infection bactérienne sur le site de la blessure. Ici, les chercheurs ont développé un outil de diagnostic abordable, stable, réalisable et précis basé sur une protéine produite localement avec une affinité de liaison spécifique aux polysaccharides. Les enquêteurs ont en outre évalué la capacité de la nouvelle bandelette réactive à exclure la pneumonie.

Aperçu de l'étude

Statut

Complété

Intervention / Traitement

Description détaillée

Une infection des voies respiratoires inférieures est une situation grave qui peut brusquement se compliquer d'une septicémie, d'une insuffisance respiratoire, d'une nécrose des tissus pulmonaires et d'un dysfonctionnement de plusieurs organes. Par conséquent, un traitement antibiotique empirique est généralement initié dès qu'une infection est suspectée et que des cultures et/ou d'autres tests de diagnostic sont obtenus, ce qui représente une raison majeure de prescription d'antibiotiques. La surutilisation et l'abus généralisés d'antibiotiques ont conduit à l'émergence de multiples souches bactériennes résistantes, ce qui constitue une menace majeure pour la santé. Il existe un besoin critique de solutions pratiques pour prévenir la surconsommation d'antibiotiques, en particulier dans les communautés où les antibiotiques sont disponibles sans ordonnance.

Les études physiopathologiques montrent que l'infection ne résulte pas uniquement de la prolifération bactérienne ou virale, mais plutôt de la pénétration des micro-organismes au-delà du système immunitaire de l'hôte. Par conséquent, l'évaluation de l'infection nécessite une enquête à la fois sur la présence de micro-organismes et sur les mécanismes de défense activés dans le corps du patient. La prolifération de bactéries entraîne une inflammation des tissus pulmonaires, le recrutement de globules blancs dans la zone infectée, ainsi que la production et la libération de chimiokines et de cytokines, ce qui peut entraîner le remplissage des alvéoles de liquide, conduisant le patient à développer une toux avec des mucosités ou du pus, de la fièvre , frissons et dyspnée.

Le diagnostic microbiologique des infections des voies respiratoires inférieures nécessite une évaluation du micro-organisme envahisseur par l'examen des crachats par microscopie, culture quantitative et PCR. Cependant, ces investigations microbiologiques ont une valeur limitée dans la prise en charge de la pneumonie. La flore polymicrobienne rend difficile l'interprétation des cultures de patients atteints de bronchite chronique. Il est également difficile d'évaluer les cultures de pneumonies nosocomiales car les bactéries pathogènes sont souvent identiques à celles apparaissant dans la flore pharyngée. Les patients immunodéprimés produisent fréquemment des crachats contenant un faible nombre de globules blancs. Les signes cliniques du patient, tels que l'état respiratoire et circulatoire, sont les marqueurs les plus fiables pour déterminer l'efficacité du traitement.

En pratique, la plupart des médecins choisissent d'examiner des marqueurs supplémentaires à des stades précoces pour surveiller de près les effets du traitement, en particulier chez les patients à haut risque qui ont été admis dans des unités de soins intensifs. Les marqueurs systémiques couramment utilisés comprennent la température corporelle, la protéine C-réactive (CRP), la procalcitonine (PCT) et l'interleukine 6 (IL-6). La concentration du facteur de croissance des hépatocytes (HGF) augmenterait lors de lésions organiques, telles que celles causées par des maladies infectieuses. Des études montrent une augmentation des concentrations de HGF dans le sérum et le condensat expiré de patients atteints de pneumonie, la présence de HGF étant significativement corrélée à la survie. De plus, les niveaux de HGF diminuent nettement dans les 48 heures suivant le début de l'antibiothérapie appropriée. Les résultats de la résonance plasmonique de surface (SPR) indiquent que le HGF produit au cours d'une infection aiguë présente une forte affinité pour le composant de la matrice extracellulaire, l'héparane sulfate, le protéoglycane (HSPG). Ces résultats suggèrent que l'évaluation de l'HGF dans les expectorations pourrait être un outil pour détecter une infection bactérienne sur le site de la blessure.

Les protéines peuvent être détectées sur la base de leur interaction spécifique avec un anticorps correspondant. Cependant, ce système de mesure repose sur des moyens spécialisés, limitant son utilité dans des centres non équipés ou comme autotest. La métachromasie est un changement de couleur caractéristique présenté par certains colorants d'aniline lors de la liaison à des substances chromotropes. Ce phénomène a été largement utilisé en histologie. Le bleu de méthylène (O-toluidine) est un excellent colorant métachromatique qui passe du bleu au rose lors de la liaison à des polysaccharides de poids moléculaire élevé, tels que le glycane sulfaté. Le colorant rose redeviendra alors rapidement bleu suite à l'ajout d'une quantité proportionnelle d'une protéine à haute affinité pour le glycane sulfaté (métachromie inversée).

Ici, les enquêteurs ont utilisé cette approche pour développer une nouvelle bandelette de test, désignée ici comme le texte d'index, pour évaluer la présence de protéines de liaison au dextrane-sulfate dans les expectorations. Les enquêteurs ont ensuite évalué la précision de cette bandelette de test pour détecter une infection bactérienne dans les crachats, en analysant des échantillons de crachats restants qui ont été envoyés pour examen au Département de microbiologie de l'hôpital universitaire de Linköping.

Type d'étude

Observationnel

Inscription (Réel)

467

Contacts et emplacements

Cette section fournit les coordonnées de ceux qui mènent l'étude et des informations sur le lieu où cette étude est menée.

Lieux d'étude

    • Östergotland
      • Linköping, Östergotland, Suède, 58185
        • Department of Infectious Diseases

Critères de participation

Les chercheurs recherchent des personnes qui correspondent à une certaine description, appelée critères d'éligibilité. Certains exemples de ces critères sont l'état de santé général d'une personne ou des traitements antérieurs.

Critère d'éligibilité

Âges éligibles pour étudier

  • Enfant
  • Adulte
  • Adulte plus âgé

Accepte les volontaires sains

Non

Sexes éligibles pour l'étude

Tout

Méthode d'échantillonnage

Échantillon de probabilité

Population étudiée

Tous les cas qui ont fouillé l'établissement ouvert de spécialistes des soins de santé à l'hôpital universitaire de Linkoeping ou qui ont été admis dans le service de différentes cliniques de l'hôpital universitaire de Linkoeping entre le 1er novembre 2015 et le 30 janvier 2016 en raison d'une suspicion d'infection respiratoire et d'échantillons d'expectorations ont été prélevés pour être cultivés au département de microbiologie de l'hôpital universitaire de Linkoeping.

La description

Critère d'intégration:

  • Échantillons d'expectorations prélevés pour le diagnostic de routine et parvenus au laboratoire dans les 12 heures suivant le prélèvement et considérés comme représentatifs par microscopie et conservés à 4-8 C après la culture.

Critère d'exclusion:

  • Échantillons non prélevés comme ci-dessus

Plan d'étude

Cette section fournit des détails sur le plan d'étude, y compris la façon dont l'étude est conçue et ce que l'étude mesure.

Comment l'étude est-elle conçue ?

Détails de conception

  • Modèles d'observation: Cohorte
  • Perspectives temporelles: Rétrospective

Cohortes et interventions

Groupe / Cohorte
Intervention / Traitement
Crachats frais restants
Tous les échantillons de crachats frais qui ont été envoyés au Département de microbiologie entre le 1er novembre 2015 et le 30 janvier 2016 conformément aux exigences standard pour les cultures de crachats au laboratoire accrédité (ISO 17025 et 15189 à partir de 1993) ont été conservés au froid (4-8 ͦC) après analyse au microscope et cultures jusqu'à ce qu'il soit collecté et codé par l'infirmière de l'étude le soir (échantillons restants).
Au total, 467 échantillons ont été recueillis dans différentes cliniques, et les procédures de diagnostic et les approches thérapeutiques étaient complètement inconnues du groupe d'étude. Les échantillons codés ont été conservés à 4-8°C et analysés dans les 72 heures suivant le prélèvement à l'aide du test de la bandelette d'expectoration. D'avril à juin 2016, un médecin et l'infirmière de l'étude ont examiné les journaux. L'âge, le sexe, la durée du séjour dans le service, les symptômes cliniques, les cultures de sang et d'expectoration et la PCR ainsi que les résultats, les radiographies, l'antibiothérapie, le CRB-65 et le code de diagnostic ultime (CIM-10) ont été documenté dans des fichiers Excel.

Que mesure l'étude ?

Principaux critères de jugement

Mesure des résultats
Description de la mesure
Délai
Valeur prédictive négative pour exclure une pneumonie
Délai: Dans les deux ans

Les échantillons d'expectorations ont été prélevés au hasard sans connaître le patient ou le diagnostic final. Les diagnostics ont été établis d'abord après que le patient a été renvoyé de la clinique.

INFECTION RESPIRATOIRE Pneumonie Les critères suivants ont été utilisés pour définir le diagnostic de pneumonie

  1. Signes et symptômes cliniques
  2. Changements détectés par une radiographie thoracique récente
  3. A reçu une antibiothérapie, quelle que soit la consommation antérieure d'antibiotiques.
  4. Le diagnostic ultime J13-J18-J690 (ICD-10). Pneumonie acquise dans la communauté : les patients sans maladie respiratoire antérieure.

Pneumonie nosocomiale acquise à l'hôpital : les patients (n = 11) ont contracté une pneumonie à l'hôpital au moins 48 à 72 heures après leur admission.

Dans les deux ans

Mesures de résultats secondaires

Mesure des résultats
Description de la mesure
Délai
Corrélation avec la concentration de HGF et de S100A8-A9 (Calprotectine) (Elisa) dans les expectorations
Délai: Les échantillons ont été conservés congelés après prélèvement à -20 C puis décongelés après 4 mois et l'analyse a été réalisée en 1 jour.
Nous avons évalué les concentrations de HGF humain immunoréactif et de calprotectine (hétérodimère humain S100A8/S100A9) par ELISA (80 échantillons choisis au hasard) à l'aide de kits ELISA disponibles dans le commerce (Quantikine ELISA ; R&D systems, Inc., Minneapolis, MN, USA). Cette méthode mesure le HGF et la calprotectine dans le sérum, le plasma, les milieux de culture et d'autres fluides biologiques. Les échantillons de crachats qui avaient été stockés à -20°C ont été décongelés et centrifugés à 1000 g pendant 10 minutes avant l'analyse. La dose minimale détectable (MDD) telle que définie par le fournisseur pour ce test était de 0,04 ng/ml pour le HGF et de 0,086 ng/ml pour la calprotectine.
Les échantillons ont été conservés congelés après prélèvement à -20 C puis décongelés après 4 mois et l'analyse a été réalisée en 1 jour.
Corrélation avec l'affinité de liaison aux parties de la molécule HGF par résonance plasmonique de surface
Délai: dans 47 échantillons, une analyse Elisa et SPR appariée a été réalisée sur des échantillons conservés à -20 C dans les 4 mois suivant le prélèvement.
Une analyse appariée a été effectuée sur 47 échantillons choisis au hasard. Les mesures et les procédures d'immobilisation du ligand ont été réalisées à l'aide d'un système Biacore 2000 (GE Healthcare Bio-Sciences AB, Uppsala, Suède). Trois ligands différents ont été immobilisés dans des canaux séparés sur la puce SPR. Les ligands étaient des anticorps polyclonaux purifiés par affinité dirigés contre les peptides HGF cartographiant l'extrémité N-terminale de l'HGFβ humain (N-19), l'extrémité N-terminale de l'HGFα humain (N-17) et les acides aminés 32-176 de l'HGFα humain (H -145). Ces ligands ont été dilués au 1/10 dans du tampon acétate 10 mM (pH 4,5) et immobilisés sur des puces CM5 dextran carboxyméthylé.
dans 47 échantillons, une analyse Elisa et SPR appariée a été réalisée sur des échantillons conservés à -20 C dans les 4 mois suivant le prélèvement.

Autres mesures de résultats

Mesure des résultats
Description de la mesure
Délai
La routine de gestion de la pneumonie à la clinique infectieuse de Linkoeping au cours des dernières décennies
Délai: Les données ont été obtenues à partir de journaux papier de patients admis (de décembre à mars) au Département des maladies infectieuses de Linköping en 1970, 1980 et 1990.
Nous avons étudié les journaux papier archivés de patients admis dans notre service et renvoyés sous diagnostic de pneumonie/bronchopneumonie, à partir de 1970. Nous avons cherché à identifier les approches diagnostiques qui étaient utilisées dans le même centre et avaient un impact sur le diagnostic correct de la pneumonie. Les patients ont reçu un code en fonction de la date d'admission dans le service de janvier à décembre et ont été enregistrés sous le code dans un livre. Les codes appartenant à un diagnostic particulier étaient collectés sur une carte et conservés séparément dans des boîtes (une carte correspondait à un diagnostic et à une année). Nous avons choisi au hasard les 40 premiers cas codés avec un diagnostic de pneumonie (code de diagnostic CIM-9 486.9) en 1970, 1980 et 1990 et avons collecté les revues papier et identifié les critères de diagnostic.
Les données ont été obtenues à partir de journaux papier de patients admis (de décembre à mars) au Département des maladies infectieuses de Linköping en 1970, 1980 et 1990.

Collaborateurs et enquêteurs

C'est ici que vous trouverez les personnes et les organisations impliquées dans cette étude.

Dates d'enregistrement des études

Ces dates suivent la progression des dossiers d'étude et des soumissions de résultats sommaires à ClinicalTrials.gov. Les dossiers d'étude et les résultats rapportés sont examinés par la Bibliothèque nationale de médecine (NLM) pour s'assurer qu'ils répondent à des normes de contrôle de qualité spécifiques avant d'être publiés sur le site Web public.

Dates principales de l'étude

Début de l'étude (Réel)

1 novembre 2015

Achèvement primaire (Réel)

5 février 2016

Achèvement de l'étude (Réel)

1 avril 2016

Dates d'inscription aux études

Première soumission

16 août 2017

Première soumission répondant aux critères de contrôle qualité

19 août 2017

Première publication (Réel)

22 août 2017

Mises à jour des dossiers d'étude

Dernière mise à jour publiée (Réel)

22 août 2017

Dernière mise à jour soumise répondant aux critères de contrôle qualité

19 août 2017

Dernière vérification

1 août 2017

Plus d'information

Termes liés à cette étude

Autres numéros d'identification d'étude

  • Dexact-resp

Plan pour les données individuelles des participants (IPD)

Prévoyez-vous de partager les données individuelles des participants (DPI) ?

Oui

Description du régime IPD

Informations concernant les échantillons qui ont été inclus dans les calculs statistiques, les cas exclus avec infection, la pneumonie 1970-1980-1990, le coût réel des tests effectués dans notre centre pour le diagnostic de la pneumonie et les volontaires rejoignant le test de faisabilité dans les tableaux A-L

Délai de partage IPD

Les données sont disponibles et attendent l'adresse URL à définir.

Type d'informations de prise en charge du partage d'IPD

  • Protocole d'étude
  • Formulaire de consentement éclairé (ICF)
  • Rapport d'étude clinique (CSR)

Informations sur les médicaments et les dispositifs, documents d'étude

Étudie un produit pharmaceutique réglementé par la FDA américaine

Non

Étudie un produit d'appareil réglementé par la FDA américaine

Non

Ces informations ont été extraites directement du site Web clinicaltrials.gov sans aucune modification. Si vous avez des demandes de modification, de suppression ou de mise à jour des détails de votre étude, veuillez contacter register@clinicaltrials.gov. Dès qu'un changement est mis en œuvre sur clinicaltrials.gov, il sera également mis à jour automatiquement sur notre site Web .

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