Ezt az oldalt automatikusan lefordították, és a fordítás pontossága nem garantált. Kérjük, olvassa el a angol verzió forrásszöveghez.

Köpetszűrő teszt a tüdőgyulladás korai stádiumában történő kizárására (self-test)

2017. augusztus 19. frissítette: Fariba Nayeri, University Hospital, Linkoeping
A légúti fertőzés klinikai tüneteit mutató betegeknél az antibiotikum-kezelést igénylő esetek gyors azonosítása kulcsfontosságú a többszörösen rezisztens baktériumok kialakulásának elkerülése érdekében. A helyi akut fázisú reagensek azonosítása segíthet felmérni a gazdaszervezet bakteriális fertőzésre adott válaszát a sérülés helyén. Itt a kutatók egy megfizethető, stabil, megvalósítható és pontos diagnosztikai eszközt fejlesztettek ki, amely egy helyileg előállított fehérjére épül, amely specifikus kötődési affinitással rendelkezik a poliszacharidokhoz. A kutatók tovább értékelték az új tesztcsík tüdőgyulladás kizárására való képességét.

A tanulmány áttekintése

Részletes leírás

Az alsó légúti fertőzés súlyos helyzet, amely hirtelen szövődményessé válhat szepszissel, légzési elégtelenséggel, tüdőszöveti nekrózissal és több szervi diszfunkcióval. Ezért az empirikus antibiotikum-kezelést általában azonnal megkezdik, amint fertőzés gyanúja merül fel, és tenyészeteket és/vagy egyéb diagnosztikai teszteket szereznek be, ami az antibiotikum felírásának egyik fő oka. Az antibiotikumok széles körben elterjedt túlhasználata és visszaélése több rezisztens baktériumtörzs megjelenéséhez vezetett, ami komoly egészségügyi veszélyt jelent. Nagy szükség van gyakorlati megoldásokra az antibiotikumok túlzott használatának megelőzésére, különösen azokban a közösségekben, ahol az antibiotikumok vény nélkül kaphatók.

Kórélettani vizsgálatok azt mutatják, hogy a fertőzés nem pusztán a baktériumok vagy vírusok túlszaporodásának eredménye, hanem a mikroorganizmusok behatolása a gazdaszervezet immunrendszerén túlra. Ezért a fertőzés felmérése megköveteli mind a mikroorganizmusok jelenlétének, mind a páciens testében aktivált védekező mechanizmusok vizsgálatát. A baktériumok túlszaporodása tüdőszöveti gyulladáshoz, fehérvérsejtek fertőzött területre való felszaporodásához, valamint kemokin és citokin termelődéséhez és felszabadulásához vezet, aminek következtében a léghólyagok megtelnek folyadékkal, aminek következtében a beteg köhögést okoz váladékkal vagy gennyel, lázzal. , hidegrázás és nehézlégzés.

Az alsó légúti fertőzések mikrobiológiai diagnosztikája megköveteli a behatoló mikroorganizmus felmérését a köpet mikroszkóppal, kvantitatív tenyésztéssel és PCR-rel végzett vizsgálatával. Az ilyen mikrobiológiai vizsgálatok azonban korlátozott értékkel bírnak a tüdőgyulladás kezelésében. A polimikrobiális flóra megnehezíti a krónikus bronchitisben szenvedő betegek tenyészeteinek értelmezését. A nozokomiális tüdőgyulladásból származó tenyészetek értékelése is nehéz, mivel a kórokozó baktériumok gyakran azonosak a torokflórában megjelenőkkel. Az immunszupprimált betegek gyakran alacsony számú fehérvérsejtet tartalmazó köpet termelnek. A beteg klinikai tünetei, mint például a légzési és keringési állapot, a legmegbízhatóbb markerek a kezelés hatékonyságának meghatározásához.

A gyakorlatban a legtöbb orvos úgy dönt, hogy a korai szakaszban további markereket is megvizsgál, hogy szorosan nyomon kövesse a terápia hatását, különösen az intenzív osztályra került, magas kockázatú betegeknél. Az általánosan használt szisztémás markerek közé tartozik a testhőmérséklet, a C-reaktív fehérje (CRP), a prokalcitonin (PCT) és az interleukin 6 (IL-6). A hepatocita növekedési faktor (HGF) koncentrációja állítólag nő a szervkárosodás során, például a fertőző betegségek által okozott sérülések során. A vizsgálatok azt mutatják, hogy a tüdőgyulladásban szenvedő betegek szérumában és kilégzési kondenzátumában megnövekedett a HGF-koncentráció, és a HGF jelenléte szignifikánsan korrelál a túléléssel. Ezenkívül a HGF-szint jelentősen csökken a megfelelő antibiotikum-terápia megkezdését követő 48 órán belül. A felszíni plazmonrezonancia (SPR) eredményei azt mutatják, hogy az akut fertőzés során termelődő HGF nagy affinitást mutat az extracelluláris mátrix komponenshez, a heparán-szulfát proteoglikánhoz (HSPG). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a HGF-értékelés a köpetben a bakteriális fertőzés kimutatásának eszköze lehet a sérülés helyén.

A fehérjéket a megfelelő antitesttel való specifikus kölcsönhatásuk alapján lehet kimutatni. Ez a mérési rendszer azonban speciális erőforrásokra támaszkodik, korlátozva a nem felszerelt központokban vagy öntesztként való használhatóságát. A metachromasia jellegzetes színváltozás, amelyet bizonyos anilinfestékek mutatnak ki kromotróp anyagokhoz való kötődéskor. Ezt a jelenséget széles körben alkalmazzák a szövettanban. A metilénkék (O-toluidin) kiváló metakromatikus festék, amely kékről rózsaszínre változik, amikor nagy molekulatömegű poliszacharidokhoz, például szulfatált glikánhoz kötődik. A rózsaszín festék ezután gyorsan visszakékül, miután arányos mennyiségű fehérjét adnak hozzá, amely nagy affinitással rendelkezik a szulfatált glikánhoz (invertált metakromácia).

Itt a kutatók ezt a megközelítést alkalmazták egy új csíkteszt kifejlesztésére, amelyet itt indexszövegnek nevezünk, hogy értékeljék a dextrán-szulfát-kötő fehérjék jelenlétét a köpetben. A nyomozók ezt követően értékelték ennek a csíktesztnek a pontosságát a bakteriális fertőzés kimutatására a köpetben a visszamaradt köpetminták elemzésével, amelyeket vizsgálatra küldtek a Linköpingi Egyetemi Kórház Mikrobiológiai Osztályára.

Tanulmány típusa

Megfigyelő

Beiratkozás (Tényleges)

467

Kapcsolatok és helyek

Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.

Tanulmányi helyek

    • Östergotland
      • Linköping, Östergotland, Svédország, 58185
        • Department of Infectious Diseases

Részvételi kritériumok

A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.

Jogosultsági kritériumok

Tanulmányozható életkorok

  • Gyermek
  • Felnőtt
  • Idősebb felnőtt

Egészséges önkénteseket fogad

Nem

Tanulmányozható nemek

Összes

Mintavételi módszer

Valószínűségi minta

Tanulmányi populáció

Minden olyan esetet, amely a Linköpingi Egyetemi Kórház nyitott egészségügyi szakorvosi rendelőjében átkutatták, vagy a Linköpingi Egyetemi Kórház különböző klinikáinak osztályára kerültek 2015. november 1. és 2016. január 30. között légúti fertőzés gyanúja miatt, és köpetmintát vettek tenyésztésre. a Linköpingi Egyetemi Kórház Mikrobiológiai Osztályán.

Leírás

Bevételi kritériumok:

  • A rutin diagnosztikához gyűjtött köpetminták a begyűjtés után 12 órán belül eljutottak a laboratóriumba, és mikroszkóppal reprezentatívnak tekinthetők, és tenyésztés után 4-8 C-on tartották.

Kizárási kritériumok:

  • A mintákat nem a fentiek szerint gyűjtötték

Tanulási terv

Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.

Hogyan készül a tanulmány?

Tervezési részletek

  • Megfigyelési modellek: Kohorsz
  • Időperspektívák: Visszatekintő

Kohorszok és beavatkozások

Csoport / Kohorsz
Beavatkozás / kezelés
Friss visszamaradt köpet
Minden friss köpetmintát, amelyet 2015. november 1. és 2016. január 30. között a Mikrobiológiai Osztályra küldtek az akkreditált (ISO 17025 és 15189 1993-tól kezdődően ISO 17025 és 15189 szabvány szerinti) laboratórium köpetkultúrákra vonatkozó szabványkövetelményei szerint, hidegen (4-8 ͦC) tartottuk. analízis mikroszkóppal és tenyészetekkel, amíg a vizsgálati nővér este össze nem gyűjtötte és kódolta (maradt minták).
Összesen 467 mintát gyűjtöttek különböző klinikákról, és a diagnosztikai eljárások és a terápiás megközelítések teljesen ismeretlenek voltak a vizsgált csoport számára. A kódolt mintákat 4-8°C-on tároltuk, és a mintavételtől számított 72 órán belül köpetcsík teszttel elemeztük. 2016 áprilisától júniusig egy orvos és a vizsgálati nővér áttekintette a folyóiratokat. Az életkor, a nem, az osztályon való tartózkodás időtartama, a klinikai tünetek, a vér- és köpetkultúra és a PCR, valamint az eredmények, a röntgenfelvételek, az antibiotikum-terápia, a CRB-65 és a végső diagnózis kódja (ICD-10) Excel-fájlokban dokumentálva.

Mit mér a tanulmány?

Elsődleges eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Negatív prediktív érték a tüdőgyulladás kizárására
Időkeret: Két éven belül

A köpetmintákat véletlenszerűen gyűjtöttük, anélkül, hogy a betegről vagy a végső diagnózisról ismertük volna. A diagnózist először azután állították fel, hogy a beteget elbocsátották a klinikáról.

LÉGZŐ FERTŐZÉS Tüdőgyulladás A tüdőgyulladás diagnózisának meghatározásához a következő kritériumokat alkalmaztuk

  1. Klinikai jelek és tünetek
  2. A közelmúltban végzett mellkasröntgen által kimutatott változások
  3. Antibiotikum kezelésben részesült, függetlenül a korábbi antibiotikum fogyasztástól.
  4. A végső diagnózis J13-J18-J690 (ICD-10). Közösségben szerzett tüdőgyulladás: Azok a betegek, akiknél korábban nem volt légúti betegség.

Kórházban szerzett (Nosocomiális) tüdőgyulladás: A betegek (n=11) legalább 48-72 órával a felvétel után tüdőgyulladást kaptak a kórházban.

Két éven belül

Másodlagos eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Korreláció a HGF és az S100A8-A9 (Calprotectin) koncentrációjával (Elisa) a köpetben
Időkeret: A mintákat a mintavétel után fagyasztva tartottuk -20 C-on, majd 4 hónap elteltével felengedtük, és az elemzést 1 napon belül elvégeztük.
Az immunreaktív humán HGF és kalprotektin (Human S100A8/S100A9 heterodimer) koncentrációját ELISA-val (80 véletlenszerűen kiválasztott minta) határoztuk meg a kereskedelemben kapható ELISA készletek (Quantikine ELISA; R&D Systems, Inc., Minneapolis, MN, USA) segítségével. Ez a módszer a HGF-et és a kalprotektint méri szérumban, plazmában, táptalajban és más biológiai folyadékokban. A -20 °C-on tárolt köpetmintákat felolvasztottuk és 1000 g-vel centrifugáltuk 10 percig az elemzés előtt. A szállító által ehhez a vizsgálathoz meghatározott minimális kimutatható dózis (MDD) 0,04 ng/ml volt a HGF és 0,086 ng/ml a kalprotektin esetében.
A mintákat a mintavétel után fagyasztva tartottuk -20 C-on, majd 4 hónap elteltével felengedtük, és az elemzést 1 napon belül elvégeztük.
Összefüggés a HGF-molekula részeihez való kötődési affinitással felületi plazmonrezonanciával
Időkeret: 47 mintában páros Elisa és SPR analízist végeztünk a mintavételt követő 4 hónapon belül -20 C-on tartott mintákon.
Páros elemzést végeztünk 47 véletlenszerűen kiválasztott mintán. A méréseket és a ligandum immobilizálási eljárásokat Biacore 2000 rendszerrel (GE Healthcare Bio-Sciences AB, Uppsala, Svédország) végeztük. Három különböző ligandumot rögzítettünk külön csatornákban az SPR-chipen. A ligandumok affinitástisztított poliklonális antitestek voltak, amelyek a humán HGFβ N-terminálisán (N-19), a humán HGFα N-terminálisán (N-17) és a humán HGFα (H) 32-176. aminosavaiban térképező HGF-peptidek ellen irányultak. -145). Ezeket a ligandumokat 1:10 arányban hígítottuk 10 mM acetát pufferben (pH 4,5), és karboximetilezett dextrán CM5 chipekhez rögzítettük.
47 mintában páros Elisa és SPR analízist végeztünk a mintavételt követő 4 hónapon belül -20 C-on tartott mintákon.

Egyéb eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
A tüdőgyulladás kezelési rutinja a linkoepingi fertőző klinikán az elmúlt évtizedekben
Időkeret: Az adatokat a linköpingi fertőző betegségek osztályára 1970-ben, 1980-ban és 1990-ben (decembertől márciusig) felvett betegek papíralapú folyóirataiból nyertük.
Tanulmányoztuk az osztályunkra felvett és tüdőgyulladás/bronchopneumonia diagnózissal elbocsátott betegek archivált papíralapú folyóiratait 1970-től kezdődően. Célunk volt, hogy azonosítsuk azokat a diagnosztikai módszereket, amelyeket ugyanabban a központban alkalmaztak, és amelyek hatással voltak a tüdőgyulladás helyes diagnózisára. A betegek január-december között kaptak egy kódot az osztályra való felvétel időpontjától függően, és a kóddal regisztrálták őket egy könyvben. Az adott diagnózishoz tartozó kódokat egy kártyára gyűjtöttük, és külön dobozokban tároltuk (egy kártya egy diagnózisnak és egy évnek felelt meg). 1970-ben, 1980-ban és 1990-ben véletlenszerűen választottuk ki az első 40 kódolt pneumonia diagnózisú esetet (ICD-9 diagnózis kódja 486.9), és összegyűjtöttük a papíralapú folyóiratokat, és meghatároztuk a diagnózis kritériumait.
Az adatokat a linköpingi fertőző betegségek osztályára 1970-ben, 1980-ban és 1990-ben (decembertől márciusig) felvett betegek papíralapú folyóirataiból nyertük.

Együttműködők és nyomozók

Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.

Tanulmányi rekorddátumok

Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.

Tanulmány főbb dátumok

Tanulmány kezdete (Tényleges)

2015. november 1.

Elsődleges befejezés (Tényleges)

2016. február 5.

A tanulmány befejezése (Tényleges)

2016. április 1.

Tanulmányi regisztráció dátumai

Először benyújtva

2017. augusztus 16.

Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2017. augusztus 19.

Első közzététel (Tényleges)

2017. augusztus 22.

Tanulmányi rekordok frissítései

Utolsó frissítés közzétéve (Tényleges)

2017. augusztus 22.

Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2017. augusztus 19.

Utolsó ellenőrzés

2017. augusztus 1.

Több információ

A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések

Egyéb vizsgálati azonosító számok

  • Dexact-resp

Terv az egyéni résztvevői adatokhoz (IPD)

Tervezi megosztani az egyéni résztvevői adatokat (IPD)?

Igen

IPD terv leírása

A statisztikai számításokba bevont mintákra vonatkozó információk, a kizárt fertőzéses esetek, tüdőgyulladás 1970-1980-1990, a tüdőgyulladás diagnosztizálására szolgáló központunkban elvégzett vizsgálatok tényleges költsége és a megvalósíthatósági teszthez csatlakozó önkéntesek az A-L táblázatokban

IPD megosztási időkeret

Az adatok rendelkezésre állnak, és az URL-cím meghatározására várnak.

Az IPD megosztását támogató információ típusa

  • Tanulmányi Protokoll
  • Tájékozott hozzájárulási űrlap (ICF)
  • Klinikai vizsgálati jelentés (CSR)

Gyógyszer- és eszközinformációk, tanulmányi dokumentumok

Egy amerikai FDA által szabályozott gyógyszerkészítményt tanulmányoz

Nem

Egy amerikai FDA által szabályozott eszközterméket tanulmányoz

Nem

Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .

Klinikai vizsgálatok a visszamaradt köpet

Iratkozz fel