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早期排除肺炎的痰液筛查试验 (self-test)

2017年8月19日 更新者:Fariba Nayeri、University Hospital, Linkoeping
在有呼吸道感染临床症状的患者中,快速识别需要抗生素治疗的病例对于避免多重耐药菌的发展至关重要。 识别局部急性期反应物有助于评估宿主对损伤部位细菌感染的反应。 在这里,研究人员开发了一种经济实惠、稳定、可行且准确的诊断工具,该工具基于本地生产的对多糖具有特异性结合亲和力的蛋白质。 研究人员进一步评估了新型试纸排除肺炎的能力。

研究概览

详细说明

下呼吸道感染是一种严重的情况,可突然并发败血症、呼吸衰竭、肺组织坏死和多器官功能障碍。 因此,一旦怀疑感染并进行培养和/或其他诊断测试,通常会立即开始经验性抗生素治疗,这是开抗生素处方的主要原因。 广泛的抗生素过度使用和误用导致出现多种耐药菌株,对健康构成重大威胁。 迫切需要实用的解决方案来防止抗生素过度使用,尤其是在无需处方即可获得抗生素的社区。

病理生理学研究表明,感染不仅仅由细菌或病毒过度生长引起,而是由微生物渗透到宿主免疫系统之外引起的。 因此,感染评估需要调查微生物的存在和患者体内激活的防御机制。 细菌过度生长导致肺组织炎症,白细胞向感染区域募集,趋化因子和细胞因子的产生和释放,可导致肺泡充满液体,导致患者出现咳痰或流脓、发烧、寒战和呼吸困难。

下呼吸道感染的微生物学诊断需要通过使用显微镜检查痰、定量培养和 PCR 来评估入侵的微生物。 然而,此类微生物学调查在肺炎管理中的价值有限。 多种微生物菌群使得难以解读慢性支气管炎患者的培养物。 由于致病菌通常与喉咙菌群中出现的细菌相同,因此也很难评估医院获得性肺炎的培养物。 免疫抑制患者经常产生含有少量白细胞的痰液。 患者的临床体征,如呼吸和循环状态,是确定治疗效果的最可靠标志。

在实践中,大多数医生选择在早期阶段检查其他标志物以密切监测治疗效果,特别是在已入住重症监护病房的高危患者中。 常用的全身指标包括体温、C 反应蛋白 (CRP)、降钙素原 (PCT) 和白细胞介素 6 (IL-6)。 据报道,肝细胞生长因子 (HGF) 浓度在器官损伤期间增加,例如由传染病引起的损伤。 研究表明,肺炎患者血清和呼出气冷凝液中的 HGF 浓度升高,HGF 的存在与生存显着相关。 此外,HGF 水平在开始适当的抗生素治疗后 48 小时内显着降低。 表面等离子共振 (SPR) 结果表明,急性感染期间产生的 HGF 对细胞外基质成分硫酸乙酰肝素蛋白多糖 (HSPG) 具有高亲和力。 这些发现表明,痰液中的 HGF 评估可能是检测损伤部位细菌感染的工具。

可以根据蛋白质与相应抗体的特异性相互作用来检测蛋白质。 然而,这种测量系统依赖于专门的资源,限制了它在非装备中心或作为自测的用途。 异色症是某些苯胺染料在与变色物质结合后表现出的特征性颜色变化。 这种现象已广泛应用于组织学。 亚甲蓝(O-甲苯胺)是一种出色的异染性染料,在与高分子量多糖(例如硫酸化聚糖)结合后会从蓝色变为粉红色。 在添加一定比例的对硫酸化聚糖具有高亲和力的蛋白质(倒置异色性)后,粉红色染料将迅速变回蓝色。

在这里,研究人员使用这种方法开发了一种新的试纸条测试(本文称为索引文本),以评估痰液中是否存在葡聚糖-硫酸盐结合蛋白。 然后,研究人员通过分析被送到林雪平大学医院微生物学系进行检查的剩余痰液样本,评估了这种试纸检测痰液中细菌感染的准确性。

研究类型

观察性的

注册 (实际的)

467

联系人和位置

本节提供了进行研究的人员的详细联系信息,以及有关进行该研究的地点的信息。

学习地点

    • Östergotland
      • Linköping、Östergotland、瑞典、58185
        • Department of Infectious Diseases

参与标准

研究人员寻找符合特定描述的人,称为资格标准。这些标准的一些例子是一个人的一般健康状况或先前的治疗。

资格标准

适合学习的年龄

  • 孩子
  • 成人
  • 年长者

接受健康志愿者

有资格学习的性别

全部

取样方法

概率样本

研究人群

所有在 2015 年 11 月 1 日至 2016 年 1 月 30 日期间因疑似呼吸道感染而在林雪平大学医院的开放式医疗保健专科设施进行搜索或在林雪平大学医院的不同诊所收治病房的所有病例和痰液样本均被收集进行培养在林雪平大学医院微生物学系。

描述

纳入标准:

  • 收集痰标本用于常规诊断,并在收集后 12 小时内送达实验室,并通过显微镜检查视为具有代表性,并在培养后保持 4-8 C。

排除标准:

  • 未按上述方式收集的样本

学习计划

本节提供研究计划的详细信息,包括研究的设计方式和研究的衡量标准。

研究是如何设计的?

设计细节

  • 观测模型:队列
  • 时间观点:追溯

队列和干预

团体/队列
干预/治疗
新鲜的剩痰
2015 年 11 月 1 日至 2016 年 1 月 30 日期间根据认可实验室的痰培养标准要求(ISO 17025 和 15189 从 1993 年开始)送往微生物学系的所有新鲜痰样本在经过后冷藏(4-8 ͦC)通过显微镜和培养分析,直到晚上由研究护士收集和编码(剩余样本)。
总共收集了 467 个来自不同诊所的样本,研究组完全不知道诊断程序和治疗方法。 编码样本储存在 4-8°C,并在采样后 72 小时内使用痰试纸进行分析。 从 2016 年 4 月到 6 月,一名医生和研究护士审查了这些期刊。 年龄、性别、住院时间、临床症状、血、痰培养及PCR结果、X线片、抗生素治疗、CRB-65和最终诊断代码(ICD-10)记录在 Excel 文件中。

研究衡量的是什么?

主要结果指标

结果测量
措施说明
大体时间
排除肺炎的阴性预测值
大体时间:两年内

痰标本是在不了解患者或最终诊断的情况下随机采集的。 诊断是在患者离开诊所后首先确定的。

呼吸道感染 肺炎 以下标准用于定义肺炎诊断

  1. 临床体征和症状
  2. 近期胸片检测到的变化
  3. 接受过抗生素治疗,无论之前是否使用过抗生素。
  4. 最终诊断J13-J18-J690(ICD-10)。 社区获得性肺炎:既往无呼吸道疾病的患者。

医院获得性(医院获得性)肺炎:患者(n=11)在入院后至少 48-72 小时在医院获得性肺炎。

两年内

次要结果测量

结果测量
措施说明
大体时间
与痰液中 HGF 和 S100A8-A9(钙卫蛋白)浓度(ELISA)的相关性
大体时间:样品在-20°C 取样后冷冻保存,然后在 4 个月后解冻,并在 1 天内进行分析。
我们使用市售的 ELISA 试剂盒(Quantikine ELISA;R&D systems, Inc., Minneapolis, MN, USA)通过 ELISA(80 个随机选择的样本)评估免疫反应性人 HGF 和钙卫蛋白(人 S100A8/S100A9 异二聚体)浓度。 该方法测量血清、血浆、培养基和其他生物体液中的 HGF 和钙卫蛋白。 在分析之前,将已储存在 -20C 的痰液样本解冻并以 1000g 离心 10 分钟。 供应商为该测定定义的最小可检测剂量 (MDD) 为 HGF 0.04 ng/ml 和钙卫蛋白 0.086 ng/ml。
样品在-20°C 取样后冷冻保存,然后在 4 个月后解冻,并在 1 天内进行分析。
通过表面等离子体共振与 HGF 分子部分结合亲和力的相关性
大体时间:在 47 个样品中,在取样后 4 个月内对保存在 -20 C 的样品进行 Elisa 和 SPR 分析。
对 47 个随机选择的样本进行了配对分析。 使用 Biacore 2000 系统(GE Healthcare Bio-Sciences AB, Uppsala, Sweden)进行测量和配体固定程序。 三种不同的配体被固定在 SPR 芯片上的不同通道中。 配体是针对人 HGFβ (N-19) N 端、人 HGFα (N-17) N 端和人 HGFα (H) 氨基酸 32-176 的 HGF 肽作图的亲和纯化多克隆抗体-145). 这些配体在 10 mM 醋酸盐缓冲液 (pH 4.5) 中按 1:10 稀释并固定到羧甲基化葡聚糖 CM5 芯片上
在 47 个样品中,在取样后 4 个月内对保存在 -20 C 的样品进行 Elisa 和 SPR 分析。

其他结果措施

结果测量
措施说明
大体时间
林雪坪市感染科近几十年肺炎管理常规
大体时间:数据来自 1970 年、1980 年和 1990 年林雪平传染病科收治(12 月至 3 月)患者的纸质期刊
我们研究了从 1970 年开始入院并因诊断为肺炎/支气管肺炎而出院的患者的存档纸质期刊。 我们旨在确定同一中心使用的对肺炎正确诊断有影响的诊断方法。 患者根据 1 月至 12 月进入病房的日期收到一个代码,并根据该代码在一本书中进行登记。 属于特定诊断的代码被收集在一张卡片上并单独保存在盒子中(一张卡片对应一个诊断和一年)。 我们随机选取1970年、1980年和1990年诊断为肺炎(ICD-9诊断代码486.9)的前40例编码病例,收集论文期刊并确定诊断标准。
数据来自 1970 年、1980 年和 1990 年林雪平传染病科收治(12 月至 3 月)患者的纸质期刊

合作者和调查者

在这里您可以找到参与这项研究的人员和组织。

研究记录日期

这些日期跟踪向 ClinicalTrials.gov 提交研究记录和摘要结果的进度。研究记录和报告的结果由国家医学图书馆 (NLM) 审查,以确保它们在发布到公共网站之前符合特定的质量控制标准。

研究主要日期

学习开始 (实际的)

2015年11月1日

初级完成 (实际的)

2016年2月5日

研究完成 (实际的)

2016年4月1日

研究注册日期

首次提交

2017年8月16日

首先提交符合 QC 标准的

2017年8月19日

首次发布 (实际的)

2017年8月22日

研究记录更新

最后更新发布 (实际的)

2017年8月22日

上次提交的符合 QC 标准的更新

2017年8月19日

最后验证

2017年8月1日

更多信息

与本研究相关的术语

其他研究编号

  • Dexact-resp

计划个人参与者数据 (IPD)

计划共享个人参与者数据 (IPD)?

是的

IPD 计划说明

1970-1980-1990年纳入统计计算的样本、排除的感染病例、肺炎、在我中心进行的肺炎诊断测试的实际费用以及参加可行性测试的志愿者的信息见表A-L

IPD 共享时间框架

数据可用并等待定义 URL 地址。

IPD 共享支持信息类型

  • 研究协议
  • 知情同意书 (ICF)
  • 临床研究报告(CSR)

药物和器械信息、研究文件

研究美国 FDA 监管的药品

研究美国 FDA 监管的设备产品

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残留的痰的临床试验

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