BIFI-OBESE: 小児肥満症の臨床試験 (BIFI-OBESE)

研究デザイン: 単一施設パイロット非盲検無作為対照試験。 母集団: この研究は、IOTF 基準に従って 6 歳から 18 歳までの肥満で、胴囲が 90 パーセンタイル以上、Tanner による思春期ステージが 2 以上の内臓脂肪を伴う合計 100 人の男女の被験者で構成されます。病期、HOMA-IR > 2.5 またはインスリン > 15 µU/ml、ダイエット未経験または減量失敗 (1 年で -1 kg/m2 BMI と定義)。

包含/除外基準 (適格基準を参照)。 介入: 研究の最初の部分 (研究 1、V0-V1) では、患者は非盲検で無作為化され、被験者の数と性別が同種の 2 つのグループに分けられます。 1 つのグループには、ビフィドバクテリウム ブレーベ B632 およびビフィドバクテリウム ブレーベ BR03 を含むプロバイオティクスのサプリメント、15 gtt/die (3x108 CFU/die) が与えられ、もう 1 つのグループには合計 2 か月の治療でプラセボが与えられます。 両方のグループは、日常的なケアと実践に従って標準的な食事を受け取ります。 研究の継続を希望する患者には、1 か月のウォッシュアウト後にクロスオーバー研究 (研究 2、V2-V3) が行われます。

食事制限: 標準的な食事は、55 ～ 60% の炭水化物 (45 ～ 50% の複合体と 10% 以下の精製および加工糖)、25 ～ 30% の脂質、および 15% のタンパク質で配布され、に従って実行されます。年齢と性別に関するイタリアの LARN ガイドライン全体で計算された等カロリーのバランスの取れた食事のカロリーを使用します。

身体活動：すべての被験者は、身体活動の実施に関する一般的な推奨事項を受け取ります。 運動は毎日実施され、30 分間の有酸素運動で構成されます。

無作為化: 参加者は、プロバイオティクス介入グループまたはプラセボ グループに 1:1 でランダムに割り当てられます。

タイミング：患者は最初に登録時（V0）に評価され、研究の最初の部分（研究1、V1）の終わりに、生化学的評価が完了します。 次に、患者がプロバイオティクスまたはプラセボを摂取しない場合、1か月のウォッシュアウトがあります. 研究2の第2部では、患者はV2で評価され、2か月の治療後（研究2、V3）に評価されます。 以下の人体計測測定、生化学的および超音波評価、およびアンケートが取得されます。

1. 人体測定:

   • 高さ (V0、V1、V2、V3);
   • 重み (V0、V1、V2、V3);
   • 体格指数 (BMI; Kg/m2) (V0、V1、V2、V3);
   • 次の比率を計算するためのウエストとヒップの円周 (V0、V1、V2、V3): ウエスト/ヒップ、ウエスト/高さ。
   • タナー段階 (V0、V1、V2、V3);
   • 血圧と心拍数 (V0、V1、V2、V3)。生化学的評価 (12 時間の一晩の絶食後): 血算と式、血清インスリン様成長因子 1 (IGF1、ng/mL)、25-ヒドロキシ (OH) ビタミン D (ng/mL)、尿酸 (mg/mL) dL)、アルカリホスファターゼ (U/L)、ACTH (pg/mL)、コルチゾール (microg/dL)、TSH (uuI/mL)、fT4 (ng/dL) (V0、V1、V2、V3);アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ (AST、IU/L)、アラニンアミノトランスフェラーゼ (ALT、IU/L); AST と ALT の比率は、AST (IU/L) と ALT(IU/L) (V0、V1、V2、V3) の比率として計算されます。血清クレアチニン濃度（mg / dL）は酵素法で測定されます。小児および青年の CKD に関する NKF-K/DOQI ガイドラインに従って、eGFR は更新された Schwartz の式を使用して計算されます: eGFR (mL/min/1.73 m2) = [0.413 x 患者の身長 (cm)] / 血清クレアチニン (mg/dL) (V0、V1、V2、V3);グルコース (mg/dL)、インスリン (μUI/mL);インスリン抵抗性 (IR) は、恒常性モデル評価 (HOMA)-IR の式を使用して計算されます: (インスリン [mU/L] x グルコース [mmol/lL) / 22.5) (V0、V1、V2、V3)。脂質プロファイル: 総コレステロール (mg/dL)、高密度リポタンパク質 (HDL) - コレステロール (mg/dL)、トリグリセリド (mg/dL);低密度リポタンパク質 (LDL) - コレステロールはフリードワルドの式によって計算され、非 HDL (nHDL) - コレステロールも計算されます (V0、V1、V2、V3)。経口ブドウ糖負荷試験 (OGTT: 1kg あたり 1.75 g のブドウ糖溶液、最大 75 g) を実施し、30 分ごとにブドウ糖とインスリンを測定するためにサンプルを収集します。 OGTT 後のパラメータの曲線下面積 (AUC) は、台形則に従って計算されます。 絶食時および OGTT 中のインスリン感受性は、定量的インスリン感受性チェック指数 (QUICKI) および松田指数 (ISI) の式として計算されます。 インスリン生成指数としての血漿グルコースの増加におけるインスリン分泌の刺激は、0から30分（InsI）までのインスリンおよびグルコース濃度の変化の比として計算されます。 β細胞代償能力は、ISIとInsI（DI）（V0、V1、V2、V3）の積として定義される性質指数によって評価されます。最初の朝の尿サンプルの安静時の収集。 物理的および化学的尿検査;尿アルブミン (mg/L) は高度な免疫比濁分析法によって測定され、尿クレアチニン (mg/dL) は酵素法を使用して測定されます。 尿アルブミンとクレアチニンの比率 (u-ACR - mg/g) は、次の式を使用して計算されます: [尿アルブミン (mg/dL) / 尿クレアチニン (mg/dL)] x 1000. これらの計算では、アルブミンとクレアチニンの両方が同じ単位になります。 尿が陽性であることが判明した被験者は、さらに2つのサンプルの収集を受け、これらのu-ACR平均値（V0、V1、V2、V3）と見なされます。 微生物数（V0、V1、V2、V3）のために糞便のサンプルが採取されます。 LPS (V0、V1、V2、V3)。 LPS は、市販のキット (Limulus amoebocyte lysate アッセイ) を使用して標準的な手順で測定されます。 シトカイン IL1、IL1β、IL6、IL10、TNFα を評価します (V0、V1、V2、V3) (ELISA キット)。
2. 健康日記は、2か月の治療中に取られます。各患者は、副作用または抗生物質治療などで日記を完成させます。
3. NGS (Next Generation Sequencing) は、糞便分析 (V0、V1、V2、V3) のために分析されます。
4. メタボロミクス分析は、糞便サンプル (V0、V1、V2、V3) の質量分析で行われます。
5. 糞便サンプル (V0、V1、V2、V3) の SCFA 分析。

結果 (結果測定を参照)。 情報検索: 症例報告書 (CRF) は、研究に含まれる各被験者について記入されます。 ソース文書は、病院または医師のカルテになります。

統計的サンプル サイズ: 16 人のサンプルは、90% 検出力、95% の有意水準、および 10% の脱落率で基礎グルコース濃度の 10 mg/dl の差を示すのに十分であると推定されています。治療の8週間目。 各グループの 34 人のサンプルは、検出力 90%、有意水準 95%、脱落率 10% の HOMA-IR インデックスで 1.4 ポイントの差を示すのに十分であると推定されています。治療8週目。 統計的有意性は P < 0.05 であると見なされます。 統計分析は、SPSS for Windows バージョン 17.0 (SPSS Inc.、シカゴ、イリノイ州、米国) を使用して実行されます。

組織の特徴：この研究は、小児科の小児内分泌サービスで実施されます。

すべての血液サンプルは、前述のノバラのマジョーレ・デッラ・カリタ病院にある病院の化学研究所で標準化された方法を使用して評価されます。 糞便分析は、ボローニャのボローニャ大学科学技術学部で測定されます。

Good Clinical Practice: プロトコルは、ヘルシンキ宣言に従って実施されます。 患者様一人ひとりに丁寧な説明を行った上で、評価前に保護者の皆様からインフォームドコンセントをいただいております。