BIFI-FETMA: Klinisk prövning i pediatrisk fetma (BIFI-OBESE)

Studiedesign: En öppen, öppen, randomiserad kontrollstudie med ett enda center. Population: Studien kommer att omfatta totalt 100 försökspersoner av båda könen, mellan 6 och 18 år, överviktiga, enligt IOTF-kriterierna och med visceral fett, som midjemått ≥ 90:e percentilen, pubertetsstadium ≥ 2 enligt Tanner stadium, HOMA-IR > 2,5 eller insulin > 15 µU/ml, dietnaiv eller med misslyckad viktminskning (definierad som -1 kg/m2 BMI på 1 år).

Kriterier för inkludering/uteslutning (se Behörighetskriterier). Intervention: I den första delen av studien (Studie 1, V0-V1) kommer patienter att randomiseras i en öppen märkning, i två grupper homogena för antal och kön på försökspersonerna. En grupp kommer att få ett tillskott av probiotika innehållande Bifidobacterium breve B632 och Bifidobacterium breve BR03, 15 gtt/dö (3x108 CFU/dö) och en grupp kommer att få placebo under totalt 2 månaders behandling. Båda grupperna får en standarddiet enligt rutinvård och praxis. För patienter som vill fortsätta studien kommer det att finnas en cross-over-studie (studie 2, V2-V3) efter en månads tvättning.

Dietrestriktioner: Standarddieten kommer att fördelas med 55-60% kolhydrater (45-50% komplexa och högst 10% raffinerade och bearbetade sockerarter), 25-30% lipider och 15% proteiner, och kommer att utföras i enlighet med med kalorierna i en isokalorisk balanserad kost beräknad genom de italienska LARN-riktlinjerna för ålder och kön.

Fysisk aktivitet: alla försökspersoner kommer att få allmänna rekommendationer om att utföra fysisk aktivitet. Träningen kommer att utföras dagligen och kommer att bestå av 30 minuters aerob fysisk aktivitet.

Randomisering: Deltagarna kommer att slumpmässigt fördelas i en 1:1 till probiotisk interventionsgrupp eller placebogrupp.

Tidpunkt: Patienterna kommer att utvärderas först vid tidpunkten för inskrivningen (V0) och i slutet av den första delen av studien (Studie 1, V1), kommer biokemiska utvärderingar att slutföras. Därefter kommer det att bli en månads tvättning när patienterna inte tar några probiotika eller placebo. I den andra delen av studie 2 kommer patienter att utvärderas vid V2 och efter 2 månaders behandling (Studie 2, V3). Följande antropometriska mätningar, biokemiska och ultraljudsutvärderingar och frågeformulär kommer att erhållas:

1. Antropometriska mått:

   • höjd (VO, VI, V2, V3);
   • vikt (VO, VI, V2, V3);
   • body mass index (BMI; Kg/m2) (V0, V1, V2, V3);
   • midje- och höftomkretsar (V0, V1, V2, V3) för beräkning av följande förhållanden: midja/höft, midja/höjd;
   • Garvningssteg (VO, V1, V2, V3);
   • blodtryck och hjärtfrekvens (V0, V1, V2, V3). Biokemiska utvärderingar (efter 12 timmars fasta över natten): CBC med formel, seruminsulinliknande tillväxtfaktor 1 (IGF1, ng/mL), 25-hydroxi (OH) vitamin D (ng/mL), urinsyra (mg/ dL), alkaliskt fosfatas (U/L), ACTH (pg/ml), kortisol (mikrog/dL), TSH (uuI/ml), fT4 (ng/dL) (V0, V1, V2, V3); aspartataminotransferas (AST, IU/L), alaninaminotransferas (ALT, IU/L); AST-till-ALT-förhållandet kommer att beräknas som förhållandet mellan AST (IU/L) och ALT(IU/L) (V0, V1, V2, V3); serumkreatininkoncentrationen (mg/dL) kommer att mätas med den enzymatiska metoden; enligt NKF-K/DOQI riktlinjer för CKD hos barn och ungdomar kommer eGFR att beräknas med den uppdaterade Schwartz formel: eGFR (mL/min/1,73) m2) = [0,413 x patientens längd (cm)] / serumkreatinin (mg/dL) (V0, V1, V2, V3); glukos (mg/dL), insulin (μUI/ml); insulinresistens (IR) kommer att beräknas med hjälp av formeln för Homeostas Model Assessment (HOMA)-IR: (insulin [mU/L] x glukos [mmol/lL) / 22,5) (V0, V1, V2, V3); lipidprofil: totalt kolesterol (mg/dL), High-Density Lipoprotein (HDL)-kolesterol (mg/dL), triglycerider (mg/dL); Low-Density Lipoprotein (LDL)-kolesterol kommer att beräknas med Friedwald-formeln och icke-HDL (nHDL)-kolesterol kommer också att beräknas (V0, V1, V2, V3); oralt glukostoleranstest (OGTT: 1,75 g glukoslösning per kg, max 75 g) och prover kommer att samlas in för bestämning av glukos och insulin var 30:e minut. Arean under kurvan (AUC) för parametrar efter OGTT kommer att beräknas enligt trapetsregeln. Insulinkänslighet vid fasta och under OGTT kommer att beräknas som formeln för det kvantitativa insulinkänslighetskontrollindexet (QUICKI) och Matsuda-indexet (ISI). Stimulansen för insulinutsöndring i ökningen av plasmaglukos som insulinogent index kommer att beräknas som förhållandet mellan förändringarna i insulin och glukoskoncentration från 0 till 30 min (InsI). Βeta-cells kompensationskapacitet kommer att utvärderas av dispositionsindexet definierat som produkten av ISI och InsI (DI) (V0, V1, V2, V3); en uppsamling i vila av första morgonurinprovet. Fysisk och kemisk urinanalys; urinalbumin (mg/l) kommer att bestämmas med en avancerad immunoturbidimetrisk analys och urinkreatinin (mg/dL) kommer att mätas med hjälp av den enzymatiska metoden. Urin albumin till kreatinin förhållandet (u-ACR - mg/g), kommer att beräknas med följande formel: [urin albumin (mg/dL) / urin kreatinin (mg/dL)] x 1000. För dessa beräkningar kommer både albumin och kreatinin att vara i samma enhet. De försökspersoner vars urin kommer att befinnas positiv, de kommer att genomgå en insamling av ytterligare två prover och kommer att betraktas som medelvärdet för u-ACR för dessa (V0, V1, V2, V3). Ett prov av avföring kommer att tas för mikrobräkning (V0, V1, V2, V3). LPS (V0, V1, V2, V3). LPS kommer att mätas med kommersiella kit (Limulus amoebocyte lysate assay) med standardprocedurer. Citokiner IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFa kommer att utvärderas (V0, V1, V2, V3) (ELISA-kit).
2. En hälsodagbok kommer att tas under de två månaderna av behandlingen: varje patient kommer att fylla i dagboken med biverkningar eller antibiotikabehandling ecc.
3. NGS (Next Generation Sequencing) kommer att analyseras för fekal analys (V0, V1, V2, V3)
4. Metabolomisk analys kommer att göras med masspektrometri på fekala prover (V0, V1, V2, V3)
5. SCFA-analys på fekala prover (V0, V1, V2, V3).

Utfall (se Utfallsmått). Informationssökning: Ett fallrapportformulär (CRF) kommer att fyllas i för varje ämne som ingår i studien. Källdokumenten kommer att vara sjukhusets eller läkarens diagram.

Statistisk e provstorlek: Ett prov på 16 individer har uppskattats vara tillräckligt för att visa en skillnad på 10 mg/dl i basalglukoskoncentrationen med 90 % kraft och en signifikansnivå på 95 % och en bortfallsfrekvens på 10 % vid 8:e behandlingsveckan. Ett urval av 34 individer i varje grupp har uppskattats vara tillräckligt för att visa en skillnad på 1,4 poäng i HOMA-IR-indexet med 90 % kraft och en signifikansnivå på 95 % och en bortfallsfrekvens på 10 % vid den 8:e behandlingsveckan. Statistisk signifikans kommer att antas vara P<0,05. Den statistiska analysen kommer att utföras med SPSS för Windows version 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Organisationsegenskaper: Studien kommer att genomföras vid Pediatric Endocrine Service of Division of Pediatrics.

Alla blodprover kommer att mätas utvärderade med hjälp av standardiserade metoder i sjukhusets kemilaboratorium, på sjukhuset Maggiore della Carità, i Novara, som tidigare beskrivits. Fekal analys kommer att mätas vid Institutionen för vetenskaper och teknologier, University of Bologna, i Bologna.

God klinisk praxis: Protokollet kommer att genomföras i enlighet med Helsingforsdeklarationen. Informerat samtycke kommer att erhållas från alla föräldrar före utvärderingarna efter noggranna förklaringar till varje patient.