BIFI-OBESE : Essai clinique sur l'obésité pédiatrique (BIFI-OBESE)

Conception de l'étude : Essai contrôlé randomisé ouvert pilote monocentrique. Population : L'étude comprendra un total de 100 sujets des deux sexes, âgés de 6 à 18 ans, obèses, selon les critères de l'IOTF et présentant une adiposité viscérale, un tour de taille ≥ 90e centile, un stade pubertaire ≥ 2 selon le Tanner stade, HOMA-IR > 2,5 ou insuline > 15 µU/ml, naïf de régime ou avec échec de perte de poids (défini comme -1 kg/m2 IMC en 1 an).

Critères d'inclusion/exclusion (voir Critères d'éligibilité). Intervention : Dans la première partie de l'étude (Etude 1, V0-V1) les patients seront randomisés en ouvert, en deux groupes homogènes pour le nombre et le sexe des sujets. Un groupe recevra une supplémentation en probiotique contenant Bifidobacterium breve B632 et Bifidobacterium breve BR03, 15 gtt/die (3x108 UFC/die) et un groupe recevra un placebo pour un total de 2 mois de traitement. Les deux groupes reçoivent un régime standard selon les soins et la pratique de routine. Pour les patients qui souhaitent poursuivre l'étude, il y aura une étude croisée (étude 2, V2-V3) après un mois de sevrage.

Restriction alimentaire : le régime standard sera distribué avec 55-60 % de glucides (45-50 % de sucres complexes et pas plus de 10 % de sucres raffinés et transformés), 25-30 % de lipides et 15 % de protéines, et sera effectué conformément avec les calories d'une alimentation équilibrée isocalorique calculées selon les directives italiennes LARN pour l'âge et le sexe.

Activité physique : tous les sujets recevront des recommandations générales sur la pratique d'une activité physique. L'exercice sera effectué quotidiennement et consistera en 30 minutes d'activité physique aérobique.

Randomisation : les participants seront répartis au hasard dans un groupe d'intervention 1:1 à probiotique ou dans un groupe placebo.

Calendrier : Les patients seront d'abord évalués au moment de l'inscription (V0) et, à la fin de la première partie de l'étude (Étude 1, V1), les évaluations biochimiques seront terminées. Ensuite, il y aura un mois de sevrage lorsque les patients ne prendront aucun probiotique ou placebo. Dans la seconde partie de l'étude 2, les patients seront évalués à V2 et, après 2 mois de traitement (Etude 2, V3). Les mesures anthropométriques, les évaluations biochimiques et échographiques et les questionnaires suivants seront obtenus :

1. Mesures anthropométriques :

   • hauteur (V0, V1, V2, V3);
   • poids (V0, V1, V2, V3);
   • indice de masse corporelle (IMC ; Kg/m2) (V0, V1, V2, V3) ;
   • les tours de taille et de hanches (V0, V1, V2, V3) pour le calcul des rapports suivants : taille/hanche, taille/taille ;
   • Stade Tanner (V0, V1, V2, V3);
   • tension artérielle et fréquence cardiaque (V0, V1, V2, V3). Évaluations biochimiques (après un jeûne nocturne de 12 h) : FSC avec formule, facteur de croissance analogue à l'insuline sérique 1 (IGF1, ng/mL), 25-hydroxy (OH) vitamine D (ng/mL), acide urique (mg/ dL), phosphatase alcaline (U/L), ACTH (pg/mL), cortisol (microg/dL), TSH (uuI/mL), fT4 (ng/dL) (V0, V1, V2, V3) ; aspartate aminotransférase (AST, UI/L), alanine aminotransférase (ALT, UI/L); Le rapport AST/ALT sera calculé comme le rapport AST (UI/L) et ALT(UI/L) (V0, V1, V2, V3) ; la concentration de créatinine sérique (mg/dL) sera mesurée avec la méthode enzymatique ; selon les directives NKF-K/DOQI pour l'IRC chez les enfants et les adolescents, le DFGe sera calculé à l'aide de la formule de Schwartz mise à jour : DFGe (mL/min/1,73 m2) = [0,413 x taille du patient (cm)] / créatinine sérique (mg/dL) (V0, V1, V2, V3) ; glucose (mg/dL), insuline (μUI/mL) ; l'insulino-résistance (IR) sera calculée à l'aide de la formule du modèle d'évaluation de l'homéostasie (HOMA)-IR : (insuline [mU/L] x glucose [mmol/lL) / 22,5) (V0, V1, V2, V3) ; profil lipidique : cholestérol total (mg/dL), lipoprotéines de haute densité (HDL)-cholestérol (mg/dL), triglycérides (mg/dL) ; Le cholestérol des lipoprotéines de basse densité (LDL) sera calculé par la formule de Friedwald et le cholestérol non HDL (nHDL) sera également calculé (V0, V1, V2, V3); test de tolérance au glucose par voie orale (OGTT : 1,75 g de solution de glucose par kg, maximum 75 g) et des échantillons seront prélevés pour le dosage du glucose et de l'insuline toutes les 30 minutes. L'aire sous la courbe (AUC) des paramètres après OGTT sera calculée selon la règle trapézoïdale. La sensibilité à l'insuline à jeun et pendant l'OGTT sera calculée selon la formule de l'indice de contrôle quantitatif de la sensibilité à l'insuline (QUICKI) et de l'indice de Matsuda (ISI). Le stimulus de la sécrétion d'insuline dans l'augmentation du glucose plasmatique en tant qu'indice insulinogénique sera calculé comme le rapport des changements de concentration d'insuline et de glucose de 0 à 30 min (InsI). La capacité de compensation des cellules bêta sera évaluée par l'indice de disposition défini comme le produit de l'ISI et de l'InsI (DI) (V0, V1, V2, V3) ; une collecte au repos de l'échantillon d'urine du premier matin. analyse d'urine physique et chimique; l'albumine urinaire (mg/L) sera déterminée par un test immunoturbidimétrique avancé et la créatinine urinaire (mg/dL) sera mesurée à l'aide de la méthode enzymatique. Le rapport albumine urinaire/créatinine (u-ACR - mg/g) sera calculé à l'aide de la formule suivante : [albumine urinaire (mg/dL) / créatinine urinaire (mg/dL)] x 1000. Pour ces calculs, l'albumine et la créatinine seront dans la même unité. Les sujets dont l'urine sera trouvée positive, ils subiront une collecte de deux échantillons supplémentaires et seront considérés comme la valeur moyenne u-ACR de ceux-ci (V0, V1, V2, V3). Un échantillon de matières fécales sera prélevé pour comptage microbien (V0, V1, V2, V3). LPS (V0, V1, V2, V3). Le LPS sera mesuré avec des kits commerciaux (Limulus amoebocyte lysate assay) avec des procédures standard. Les citokines IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFα seront évaluées (V0, V1, V2, V3) (kit ELISA).
2. Un carnet de santé sera tenu pendant les 2 mois de traitement : chaque patient remplira le carnet avec effets collatéraux ou traitement antibiotique etc.
3. Le NGS (Next Generation Sequencing) sera analysé pour l'analyse fécale (V0, V1, V2, V3)
4. L'analyse métabolomique sera effectuée avec spectrométrie de masse sur des échantillons fécaux (V0, V1, V2, V3)
5. Analyse SCFA sur échantillons fécaux (V0, V1, V2, V3).

Résultats (voir Mesures des résultats). Recherche d'informations : Un formulaire de rapport de cas (CRF) sera rempli pour chaque sujet inclus dans l'étude. Les documents sources seront le dossier de l'hôpital ou du médecin.

Taille de l'échantillon statistique : un échantillon de 16 individus a été estimé suffisant pour démontrer une différence de 10 mg/dl dans la concentration basale de glucose avec une puissance de 90 % et un seuil de signification de 95 % et un taux d'abandon de 10 % à la 8ème semaine de traitement. Un échantillon de 34 individus dans chaque groupe a été estimé suffisant pour démontrer une différence de 1,4 point dans l'indice HOMA-IR avec une puissance de 90% et un niveau de signification de 95% et un taux d'abandon de 10% à la 8e semaine de traitement. La signification statistique sera supposée à P < 0,05. L'analyse statistique sera effectuée avec SPSS pour Windows version 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Caractéristiques de l'organisation : L'étude sera menée au Service d'endocrinologie pédiatrique de la Division de pédiatrie.

Tous les échantillons de sang seront mesurés évalués à l'aide de méthodes standardisées dans le laboratoire de chimie de l'hôpital, à l'hôpital Maggiore della Carità, à Novara, décrit précédemment. L'analyse fécale sera mesurée au Département des sciences et technologies de l'Université de Bologne, à Bologne.

Bonnes Pratiques Cliniques : Le protocole sera conduit conformément à la déclaration d'Helsinki. Le consentement éclairé sera obtenu de tous les parents avant les évaluations après des explications détaillées à chaque patient.