BIFI-OBESE: Klinisk forsøg i pædiatrisk fedme (BIFI-OBESE)

Studiedesign: Et enkelt-center pilot åbent randomiseret kontrolforsøg. Population: Undersøgelsen vil omfatte i alt 100 forsøgspersoner af begge køn, mellem 6 og 18 år, overvægtige, ifølge IOTF-kriterierne og med visceral fedt, som taljeomkreds ≥ 90. percentil, pubertetsstadium ≥ 2 ifølge Tanner stadium, HOMA-IR > 2,5 eller insulin > 15 µU/ml, diætnaiv eller med svigt af vægttab (defineret som -1 kg/m2 BMI på 1 år).

Inklusions-/udelukkelseskriterier (se Berettigelseskriterier). Intervention: I den første del af undersøgelsen (Studie 1, V0-V1) vil patienter blive randomiseret i en åben-label, i to grupper homogene for antal og køn af forsøgspersonerne. En gruppe vil modtage et tilskud af probiotika indeholdende Bifidobacterium breve B632 og Bifidobacterium breve BR03, 15 gtt/die (3x108 CFU/die), og en gruppe vil modtage en placebo i i alt 2 måneders behandling. Begge grupper modtager en standard diæt i henhold til rutinemæssig pleje og praksis. For patienter, der ønsker at fortsætte undersøgelsen, vil der være en cross-over undersøgelse (undersøgelse 2, V2-V3) efter en måneds udvaskning.

Diætrestriktioner: Standarddiæten vil blive fordelt med 55-60% kulhydrater (45-50% komplekse og højst 10% raffinerede og forarbejdede sukkerarter), 25-30% lipider og 15% proteiner, og vil blive udført i overensstemmelse med med kalorierne fra en isokalorisk afbalanceret diæt beregnet gennem de italienske LARN-retningslinjer for alder og køn.

Fysisk aktivitet: alle forsøgspersoner vil modtage generelle anbefalinger om udførelse af fysisk aktivitet. Træningen vil blive udført dagligt og vil bestå af 30 minutters aerob fysisk aktivitet.

Randomisering: Deltagerne vil blive tilfældigt tildelt i en 1:1 til probiotisk interventionsgruppe eller placebogruppe.

Timing: Patienterne vil først blive evalueret på tidspunktet for indskrivning (V0), og ved afslutningen af ​​den første del af undersøgelsen (Studie 1, V1), vil biokemiske evalueringer blive afsluttet. Dernæst vil der være en måneds udvaskning, når patienterne ikke tager probiotika eller placebo. I anden del af undersøgelse 2 vil patienter blive evalueret ved V2 og efter 2 måneders behandling (Studie 2, V3). Følgende antropometriske målinger, biokemiske og ultralydsevalueringer og spørgeskemaer vil blive opnået:

1. Antropometriske mål:

   • højde (VO, V1, V2, V3);
   • vægt (VO, VI, V2, V3);
   • kropsmasseindeks (BMI; Kg/m2) (V0, V1, V2, V3);
   • talje- og hofteomkreds (V0, V1, V2, V3) til beregning af følgende forhold: talje/hofte, talje/højde;
   • Garvertrin (V0, V1, V2, V3);
   • blodtryk og puls (V0, V1, V2, V3). Biokemiske evalueringer (efter 12 timers faste natten over): CBC med formel, serum insulin-lignende vækstfaktor 1 (IGF1, ng/mL), 25-hydroxy (OH) vitamin D (ng/mL), urinsyre (mg/ dL), alkalisk phosphatase (U/L), ACTH (pg/ml), cortisol (mikrog/dL), TSH (uuI/ml), fT4 (ng/dL) (V0, V1, V2, V3); aspartataminotransferase (AST, IU/L), alaninaminotransferase (ALT, IU/L); AST-til-ALT-forholdet vil blive beregnet som forholdet mellem AST (IU/L) og ALT(IU/L) (V0, V1, V2, V3); serumkreatininkoncentration (mg/dL) vil blive målt med den enzymatiske metode; i henhold til NKF-K/DOQI Guidelines for CKD hos børn og unge, vil eGFR blive beregnet ved hjælp af opdateret Schwartz' formel: eGFR (mL/min/1,73) m2) = [0,413 x patientens højde (cm)] / serumkreatinin (mg/dL) (V0, V1, V2, V3); glucose (mg/dL), insulin (μUI/ml); insulinresistens (IR) vil blive beregnet ved hjælp af formlen for Homeostase Model Assessment (HOMA)-IR: (insulin [mU/L] x glucose [mmol/lL) / 22,5) (V0, V1, V2, V3); lipidprofil: totalt kolesterol (mg/dL), High-Density Lipoprotein (HDL)-kolesterol (mg/dL), triglycerider (mg/dL); Low-Density Lipoprotein (LDL)-kolesterol vil blive beregnet ved Friedwald-formlen og non-HDL (nHDL)-kolesterol vil også blive beregnet (V0, V1, V2, V3); oral glukosetolerancetest (OGTT: 1,75 g glukoseopløsning pr. kg, maksimalt 75 g) og prøver vil blive indsamlet til bestemmelse af glukose og insulin hvert 30. minut. Arealet under kurven (AUC) for parametre efter OGTT vil blive beregnet efter trapezreglen. Insulinfølsomhed ved faste og under OGTT vil blive beregnet som formlen for det kvantitative insulinfølsomhedstjekindeks (QUICKI) og Matsuda-indekset (ISI). Stimulus for insulinsekretion i stigningen i plasmaglucose som insulinogent indeks vil blive beregnet som forholdet mellem ændringerne i insulin og glukosekoncentration fra 0 til 30 min (InsI). Βeta-celle kompenserende kapacitet vil blive evalueret af dispositionsindekset defineret som produktet af ISI og InsI (DI) (V0, V1, V2, V3); en opsamling i resten af ​​første morgenurinprøve. Fysisk og kemisk urinanalyse; urinalbumin (mg/l) vil blive bestemt ved et avanceret immunoturbidimetrisk assay, og urinkreatinin (mg/dL) vil blive målt ved hjælp af den enzymatiske metode. Urin albumin til kreatinin forholdet (u-ACR - mg/g), vil blive beregnet ved hjælp af følgende formel: [urin albumin (mg/dL) / urin creatinin (mg/dL)] x 1000. Til disse beregninger vil både albumin og kreatinin være i samme enhed. De forsøgspersoner, hvis urin vil blive fundet positiv, de vil gennemgå en indsamling af yderligere to prøver og vil blive betragtet som u-ACR-middelværdien af ​​disse (V0, V1, V2, V3). En prøve af afføring vil blive taget til mikrobiel tælling (V0, V1, V2, V3). LPS (V0, V1, V2, V3). LPS vil blive målt med kommercielle kits (Limulus amoebocyte lysate assay) med standardprocedurer. Citokiner IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFa vil blive evalueret (V0, V1, V2, V3) (ELISA-kit).
2. Der vil blive taget en sundhedsdagbog i løbet af de 2 måneders behandling: hver patient udfylder dagbogen med sideeffekter eller antibiotikabehandling mv.
3. NGS (Next Generation Sequencing) vil blive analyseret til fækal analyse (V0, V1, V2, V3)
4. Metabolomisk analyse vil blive taget med massespektrometri på fækale prøver (V0, V1, V2, V3)
5. SCFA-analyse på fækale prøver (V0, V1, V2, V3).

Resultater (se Resultatmål). Informationssøgning: Et case report form (CRF) vil blive udfyldt for hvert emne, der indgår i undersøgelsen. Kildedokumenterne vil være hospitalets eller lægens skema.

Statistisk e prøvestørrelse: En prøve på 16 individer er blevet estimeret til at være tilstrækkelig til at påvise en forskel på 10 mg/dl i den basale glukosekoncentration med 90 % kraft og et signifikansniveau på 95 % og en frafaldsrate på 10 % ved 8. behandlingsuge. En stikprøve på 34 individer i hver gruppe er blevet estimeret til at være tilstrækkelig til at påvise en forskel på 1,4 point i HOMA-IR-indekset med 90 % power og et signifikansniveau på 95 % og en frafaldsrate på 10 % ved 8. uges behandling. Statistisk signifikans vil blive antaget til P<0,05. Den statistiske analyse vil blive udført med SPSS til Windows version 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Organisationskarakteristika: Undersøgelsen vil blive udført på Pediatric Endocrine Service of Division of Pediatrics.

Alle blodprøver vil blive målt evalueret ved hjælp af standardiserede metoder i Hospitalets Kemi Laboratorium, i Maggiore della Carità hospitalet, i Novara, tidligere beskrevet. Fækal analyse vil blive målt i Institut for Videnskaber og Teknologier, University of Bologna, i Bologna.

God klinisk praksis: Protokollen vil blive udført i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen. Informeret samtykke vil blive indhentet fra alle forældre forud for evalueringerne efter omhyggelige forklaringer til hver patient.