BIFI-OBESE: Klinikai vizsgálat a gyermekkori elhízásban (BIFI-OBESE)

Vizsgálatterv: Egyközpontú, nyílt elrendezésű, randomizált kontrollvizsgálat. Populáció: A vizsgálatban összesen 100 alany vesz részt mindkét nemben, 6 és 18 év közöttiek, elhízottak az IOTF-kritériumok szerint és zsigeri zsírosodásban szenvednek, mivel a derékbőség ≥ 90 százalékos, a pubertás stádiuma ≥ 2 a Tanner szerint. stádiumban, HOMA-IR > 2,5 vagy inzulin > 15 µU/ml, diétázatlan vagy sikertelen fogyás esetén (meghatározása szerint -1 kg/m2 BMI 1 év alatt).

Bevételi/kizárási kritériumok (lásd: Alkalmassági feltételek). Beavatkozás: A vizsgálat első részében (1. vizsgálat, V0-V1) a betegeket egy nyílt elrendezésben randomizálják, két, az alanyok számát és nemét tekintve homogén csoportba. Az egyik csoport Bifidobacterium breve B632-t és Bifidobacterium breve BR03-at tartalmazó probiotikum-kiegészítést kap, 15 gtt/die (3x108 CFU/die), egy csoport pedig placebót kap összesen 2 hónapos kezelésre. Mindkét csoport standard étrendet kap a rutin gondozásnak és gyakorlatnak megfelelően. Azon betegek számára, akik folytatni kívánják a vizsgálatot, egy hónapos kimosódás után keresztezett vizsgálatot végeznek (2. vizsgálat, V2-V3).

Étrend-korlátozás: A standard étrend 55-60% szénhidrátot (45-50% komplex és legfeljebb 10% finomított és feldolgozott cukrot), 25-30% lipideket és 15% fehérjét tartalmaz, és ennek megfelelően kell végrehajtani. az izokalóriás kiegyensúlyozott étrend kalóriáival, amelyeket az olasz LARN-irányelvek szerint számítanak ki életkorra és nemre vonatkozóan.

Fizikai aktivitás: minden tantárgy általános ajánlásokat kap a fizikai tevékenység végzésével kapcsolatban. A gyakorlatokat naponta végezzük, és 30 perc aerob fizikai tevékenységből áll.

Randomizálás: A résztvevőket véletlenszerűen 1:1 arányban osztják be a probiotikus intervenciós csoportba vagy a placebo csoportba.

Időzítés: A betegeket először a beiratkozáskor értékelik (V0), majd a vizsgálat első részének végén (1. vizsgálat, V1) a biokémiai értékeléseket fejezik be. Ezután egy hónapos kimosás következik, amikor a betegek nem szednek probiotikumot vagy placebót. A 2. vizsgálat második részében a betegeket a V2-nél és 2 hónapos kezelés után értékelik (2. vizsgálat, V3). A következő antropometriai méréseket, biokémiai és ultrahangos értékeléseket és kérdőíveket kell beszerezni:

1. Antropometriai mérések:

   • magasság (V0, V1, V2, V3);
   • súly (V0, V1, V2, V3);
   • testtömeg-index (BMI; Kg/m2) (V0, V1, V2, V3);
   • derék- és csípőkörfogatok (V0, V1, V2, V3) a következő arányszámok kiszámításához: derék/csípő, derék/magasság;
   • Tanner fokozat (V0, V1, V2, V3);
   • vérnyomás és pulzusszám (V0, V1, V2, V3). Biokémiai kiértékelések (12 órás éjszakai koplalás után): CBC formulával, szérum inzulinszerű növekedési faktor 1 (IGF1, ng/mL), 25-hidroxi (OH) D-vitamin (ng/mL), húgysav (mg/ dL), alkalikus foszfatáz (U/L), ACTH (pg/ml), kortizol (mikro/dl), TSH (uuI/mL), fT4 (ng/dL) (V0, V1, V2, V3); aszpartát-aminotranszferáz (AST, IU/L), alanin-aminotranszferáz (ALT, IU/L); Az AST-ALT arány az AST (IU/L) és az ALT (IU/L) (V0, V1, V2, V3) arányaként kerül kiszámításra; a szérum kreatinin koncentrációt (mg/dL) enzimes módszerrel mérjük; Az NKF-K/DOQI CKD gyermekek és serdülőkorúak kezelésére vonatkozó irányelvei szerint az eGFR-t a frissített Schwartz-képlet alapján számítják ki: eGFR (mL/perc/1,73). m2) = [0,413 x beteg magassága (cm)] / szérum kreatinin (mg/dL) (V0, V1, V2, V3); glükóz (mg/dl), inzulin (μUI/ml); az inzulinrezisztenciát (IR) a Homeostasis Model Assessment (HOMA)-IR képletével számítjuk ki: (inzulin [mU/L] x glükóz [mmol/l) / 22,5) (V0, V1, V2, V3); lipidprofil: összkoleszterin (mg/dl), nagy sűrűségű lipoprotein (HDL)-koleszterin (mg/dl), trigliceridek (mg/dl); Az alacsony sűrűségű lipoprotein (LDL)-koleszterin kiszámítása a Friedwald-képlet szerint történik, és a nem-HDL (nHDL)-koleszterin is számítandó (V0, V1, V2, V3); orális glükóz tolerancia teszt (OGTT: 1,75 g glükóz oldat kg-onként, maximum 75 g) és 30 percenként mintát veszünk a glükóz és inzulin meghatározásához. Az OGTT utáni paraméterek görbe alatti területe (AUC) a trapézszabály szerint kerül kiszámításra. Az éhgyomri és az OGTT alatti inzulinérzékenységet a kvantitatív inzulinérzékenységi ellenőrzési index (QUICKI) és a Matsuda-index (ISI) képleteként számítják ki. Az inzulinszekréció ingerét a plazma glükóz növekedésében mint inzulinogenitási indexben az inzulin és a glükózkoncentráció 0 és 30 perc közötti változásának arányaként számítjuk ki (InsI). A Βeta-sejtek kompenzációs kapacitását az ISI és az InsI (DI) szorzataként meghatározott diszpozíciós index (V0, V1, V2, V3) alapján kell értékelni; első reggeli vizeletminta nyugalmi állapotban. Fizikai és kémiai vizeletvizsgálat; a vizelet albumint (mg/l) fejlett immunturbidimetriás assay-vel, a vizelet kreatinint (mg/dL) pedig enzimes módszerrel mérik. A vizelet albumin-kreatinin arányát (u-ACR - mg/g) a következő képlet segítségével számítják ki: [vizelet albumin (mg/dL) / vizelet kreatinin (mg/dL)] x 1000. Ezekhez a számításokhoz az albumin és a kreatinin ugyanabban az egységben lesz. Azok az alanyok, akiknek vizelete pozitívnak bizonyul, további két mintavételen esnek át, és ezek u-ACR-átlagértékének számítanak (V0, V1, V2, V3). Az ürülékből mintát vesznek a mikrobaszám meghatározásához (V0, V1, V2, V3). LPS (V0, V1, V2, V3). Az LPS-t kereskedelmi készletekkel (Limulus amoebocyte lysate assay) mérjük standard eljárásokkal. Az IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFα citokinek értékelésére kerül sor (V0, V1, V2, V3) (ELISA kit).
2. A 2 hónapos kezelés alatt egészségügyi naplót készítünk: minden beteg kiegészíti a naplót mellékhatásokkal vagy antibiotikumos kezeléssel stb.
3. Az NGS-t (Next Generation Sequencing) elemezni fogják a széklet elemzéséhez (V0, V1, V2, V3)
4. Az anyagcsere-elemzés tömegspektrometriával történik székletmintákon (V0, V1, V2, V3)
5. SCFA elemzés székletmintákon (V0, V1, V2, V3).

Eredmények (lásd Eredményintézkedések). Információk lekérése: A vizsgálatban szereplő minden egyes alanyról esetjelentési űrlapot (CRF) kell kitölteni. A forrásdokumentumok a kórház vagy az orvos grafikonjai lesznek.

Statisztikai e mintanagyság: A becslések szerint egy 16 egyedből álló minta elegendő 10 mg/dl eltérés kimutatására az alap glükózkoncentrációban 90%-os teljesítménnyel, 95%-os szignifikanciaszinttel és 10%-os lemorzsolódási arány mellett. a kezelés 8. hetében. A becslések szerint minden csoportban 34 személyből álló minta elegendő ahhoz, hogy a HOMA-IR indexben 1,4 pontos különbséget mutasson 90%-os erővel, 95%-os szignifikanciaszinttel és 10%-os lemorzsolódási arány mellett. a kezelés 8. hetében. A statisztikai szignifikanciát P<0,05 értéknél feltételezzük. A statisztikai elemzés az SPSS for Windows 17.0-s verziójával történik (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Szervezeti jellemzők: A vizsgálatot a Gyermek Endokrin Szolgálat Gyermekgyógyászati ​​Osztályán végzik.

Minden vérmintát szabványos módszerekkel értékelnek ki a Kórház Kémiai Laboratóriumában, a novarai Maggiore della Carità kórházban, a korábban leírtak szerint. A székletelemzést a Bolognai Egyetem Tudományok és Technológiák Tanszékén, Bolognában mérik.

Helyes Klinikai Gyakorlat: A protokollt Helsinki nyilatkozatának megfelelően hajtják végre. Az értékelés előtt minden szülőtől tájékozott beleegyezést kell kérni, miután minden betegnek gondos magyarázatot adtak rá.