BIFI-OBESE: Klinische proef bij pediatrische obesitas (BIFI-OBESE)

Onderzoeksopzet: een single-center pilot open-label gerandomiseerde controleproef. Populatie: De studie zal in totaal 100 proefpersonen van beide geslachten omvatten, tussen 6 en 18 jaar oud, zwaarlijvig, volgens de IOTF-criteria en met viscerale adipositas, aangezien middelomtrek ≥ 90e percentiel, puberteitsstadium ≥ 2 volgens de Tanner stadium, HOMA-IR > 2,5 of insuline > 15 µU/ml, dieet-naïef of bij uitblijven van gewichtsverlies (gedefinieerd als -1 kg/m2 BMI in 1 jaar).

In-/uitsluitingscriteria (zie Geschiktheidscriteria). Interventie: In het eerste deel van de studie (Studie 1, V0-V1) zullen patiënten gerandomiseerd worden in een open-label, in twee groepen die homogeen zijn qua aantal en geslacht van de proefpersonen. De ene groep krijgt een probioticumsupplement met Bifidobacterium breve B632 en Bifidobacterium breve BR03, 15 gtt/die (3x108 CFU/die) en de andere groep krijgt een placebo voor een behandeling van in totaal 2 maanden. Beide groepen krijgen een standaarddieet volgens de gebruikelijke zorg en praktijk. Voor patiënten die de studie willen voortzetten is er na één maand wash-out een cross-over studie (studie 2, V2-V3).

Dieetbeperking: Het standaarddieet wordt verdeeld met 55-60% koolhydraten (45-50% complexe en niet meer dan 10% geraffineerde en bewerkte suikers), 25-30% lipiden en 15% eiwitten, en wordt uitgevoerd in overeenstemming met met de calorieën van een isocalorisch uitgebalanceerd dieet berekend volgens de Italiaanse Larn-richtlijnen voor leeftijd en geslacht.

Fysieke activiteit: alle proefpersonen krijgen algemene aanbevelingen over het uitvoeren van fysieke activiteit. Oefening zal dagelijks worden uitgevoerd en zal bestaan ​​uit 30 minuten aerobe fysieke activiteit.

Randomisatie: Deelnemers worden willekeurig toegewezen in een 1:1 probiotische interventiegroep of placebogroep.

Timing: Patiënten worden eerst geëvalueerd op het moment van inschrijving (V0) en aan het einde van het eerste deel van de studie (Studie 1, V1) zullen biochemische evaluaties worden voltooid. Vervolgens is er een maand wash-out wanneer de patiënten geen probioticum of placebo nemen. In het tweede deel van studie 2 worden patiënten geëvalueerd bij V2 en na 2 maanden behandeling (studie 2, V3). De volgende antropometrische metingen, biochemische en ultrasone evaluaties en vragenlijsten zullen worden verkregen:

1. Antropometrische maatregelen:

   • hoogte (V0, V1, V2, V3);
   • gewicht (V0, V1, V2, V3);
   • body mass index (BMI; Kg/m2) (V0, V1, V2, V3);
   • taille- en heupomtrek (V0, V1, V2, V3) voor de berekening van de volgende verhoudingen: taille/heup, taille/lengte;
   • Leerlooierstrap (V0, V1, V2, V3);
   • bloeddruk en hartslag (V0, V1, V2, V3). Biochemische evaluaties (na 12 uur 's nachts vasten): CBC met formule, serum insuline-achtige groeifactor 1 (IGF1, ng/ml), 25-hydroxy (OH) vitamine D (ng/ml), urinezuur (mg/ dL), alkalische fosfatase (U/L), ACTH (pg/mL), cortisol (microg/dL), TSH (uuI/mL), fT4 (ng/dL) (V0, V1, V2, V3); aspartaataminotransferase (AST, IU/L), alanineaminotransferase (ALT, IU/L); De AST-tot-ALT-verhouding wordt berekend als de verhouding van AST (IU/L) en ALT(IU/L) (V0, V1, V2, V3); de serumcreatinineconcentratie (mg/dL) wordt gemeten met de enzymatische methode; volgens de NKF-K/DOQI-richtlijnen voor CKD bij kinderen en adolescenten wordt de eGFR berekend met behulp van de bijgewerkte formule van Schwartz: eGFR (ml/min/1,73 m²) = [0,413 x lengte patiënt (cm)] / serumcreatinine (mg/dl) (V0, V1, V2, V3); glucose (mg/dL), insuline (μUI/mL); insulineresistentie (IR) wordt berekend met behulp van de formule van Homeostasis Model Assessment (HOMA)-IR: (insuline [mU/L] x glucose [mmol/lL) / 22,5) (V0, V1, V2, V3); lipidenprofiel: totaal cholesterol (mg/dL), High-Density Lipoprotein (HDL)-cholesterol (mg/dL), triglyceriden (mg/dL); Low-Density Lipoprotein (LDL)-cholesterol wordt berekend met de Friedwald-formule en non-HDL (nHDL)-cholesterol wordt ook berekend (V0, V1, V2, V3); orale glucosetolerantietest (OGTT: 1,75 g glucose-oplossing per kg, maximaal 75 g) en er worden om de 30 minuten monsters genomen voor de bepaling van glucose en insuline. De oppervlakte onder de curve (AUC) voor parameters na OGTT wordt berekend volgens de trapeziumregel. De insulinegevoeligheid bij vasten en tijdens OGTT wordt berekend als de formule van de Quantitative Insulin-Sensitivity Check Index (QUICKI) en Matsuda-index (ISI). De stimulans voor insulinesecretie in de toename van plasmaglucose als insulinogene index zal worden berekend als de verhouding van de veranderingen in insuline- en glucoseconcentratie van 0 tot 30 min (InsI). Βeta-cel compenserende capaciteit zal worden geëvalueerd door de dispositie-index gedefinieerd als het product van de ISI en InsI (DI) (V0, V1, V2, V3); een verzameling in rust van het eerste ochtendurinemonster. Fysisch en chemisch urineonderzoek; albumine in urine (mg/L) zal worden bepaald met een geavanceerde immunoturbidimetrische test en creatinine in urine (mg/dL) zal worden gemeten met behulp van de enzymatische methode. De verhouding urinealbumine tot creatinine (u-ACR - mg/g) wordt berekend met de volgende formule: [urinealbumine (mg/dL) / urinecreatinine (mg/dL)] x 1000. Voor deze berekeningen zullen zowel albumine als creatinine in dezelfde eenheid zitten. De proefpersonen van wie de urine positief wordt bevonden, ondergaan een verzameling van nog twee monsters en worden beschouwd als de u-ACR gemiddelde waarde hiervan (V0, V1, V2, V3). Er wordt een ontlastingsmonster genomen voor microbiële telling (V0, V1, V2, V3). LPS (V0, V1, V2, V3). LPS zal worden gemeten met commerciële kits (Limulus amoebocyte lysate assay) met standaardprocedures. Citokines IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFα zullen worden geëvalueerd (V0, V1, V2, V3) (ELISA-kit).
2. Tijdens de 2 maanden van de behandeling wordt een gezondheidsdagboek bijgehouden: elke patiënt vult het dagboek in met neveneffecten of antibioticabehandeling ecc.
3. NGS (Next Generation Sequencing) wordt geanalyseerd voor fecale analyse (V0, V1, V2, V3)
4. Metabolomische analyse zal worden uitgevoerd met massaspectrometrie op fecale monsters (V0, V1, V2, V3)
5. SCFA-analyse op fecale monsters (V0, V1, V2, V3).

Uitkomsten (zie Uitkomstmaten). Informatie ophalen: voor elk onderwerp dat deel uitmaakt van het onderzoek wordt een case report-formulier (CRF) ingevuld. De brondocumenten zijn het dossier van het ziekenhuis of de arts.

Statistische en steekproefomvang: Een steekproef van 16 personen is naar schatting voldoende om een ​​verschil van 10 mg/dl in de basale glucoseconcentratie aan te tonen met een vermogen van 90% en een significantieniveau van 95% en een uitvalpercentage van 10% in de 8e weken van de behandeling. Een steekproef van 34 individuen in elke groep is naar schatting voldoende om een ​​verschil van 1,4 punt in de HOMA-IR-index aan te tonen met 90% power en een significantieniveau van 95% en een uitvalpercentage van 10% bij de 8e weken van de behandeling. Statistische significantie wordt aangenomen bij P < 0,05. De statistische analyse wordt uitgevoerd met SPSS voor Windows versie 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, VS).

Kenmerken van de organisatie: Het onderzoek zal worden uitgevoerd bij de Pediatrische Endocriene Dienst van de afdeling Kindergeneeskunde.

Alle bloedmonsters zullen worden gemeten en geëvalueerd met behulp van gestandaardiseerde methoden in het Chemielaboratorium van het ziekenhuis, in het Maggiore della Carità-ziekenhuis in Novara, eerder beschreven. Fecale analyse zal worden gemeten in het Departement Wetenschappen en Technologieën, Universiteit van Bologna, in Bologna.

Goede klinische praktijk: het protocol zal worden uitgevoerd in overeenstemming met de verklaring van Helsinki. Geïnformeerde toestemming zal worden verkregen van alle ouders voorafgaand aan de evaluaties na zorgvuldige uitleg aan elke patiënt.