BIFI-OBESE: Клинические испытания детского ожирения (BIFI-OBESE)

Дизайн исследования: одноцентровое пилотное открытое рандомизированное контролируемое исследование. Население: в исследование войдут в общей сложности 100 субъектов обоего пола в возрасте от 6 до 18 лет, страдающих ожирением в соответствии с критериями IOTF и висцеральным ожирением, с окружностью талии ≥ 90-го процентиля, пубертатной стадией ≥ 2 по шкале Таннера. стадия, HOMA-IR > 2,5 или инсулин > 15 мкЕд/мл, отсутствие диеты или потеря веса (определяется как -1 кг/м2 ИМТ за 1 год).

Критерии включения/исключения (см. Критерии приемлемости). Вмешательство: В первой части исследования (Исследование 1, V0-V1) пациенты будут рандомизированы в открытом режиме на две группы, однородные по количеству и полу субъектов. Одна группа будет получать пробиотик, содержащий Bifidobacterium breve B632 и Bifidobacterium breve BR03, 15 gtt/die (3x108 CFU/die), а другая группа будет получать плацебо в течение 2 месяцев лечения. Обе группы получают стандартную диету в соответствии с обычным уходом и практикой. Для пациентов, которые хотят продолжить исследование, будет проведено перекрестное исследование (исследование 2, V2-V3) после одного месяца вымывания.

Диетическое ограничение: Стандартный рацион будет состоять из 55–60 % углеводов (45–50 % сложных и не более 10 % рафинированных и обработанных сахаров), 25–30 % липидов и 15 % белков и будет выполняться в соответствии с с калориями изокалорийной сбалансированной диеты, рассчитанной в соответствии с итальянскими рекомендациями LARN для возраста и пола.

Физическая активность: все испытуемые получат общие рекомендации по выполнению физической активности. Упражнения будут проводиться ежедневно и будут состоять из 30 минут аэробной физической нагрузки.

Рандомизация: участники будут случайным образом распределены в группу 1: 1 для пробиотической группы вмешательства или группы плацебо.

Сроки: пациенты будут оцениваться в первую очередь во время регистрации (V0), а в конце первой части исследования (исследование 1, V1) будут завершены биохимические оценки. Далее будет один месяц вымывания, когда пациенты не будут принимать ни пробиотиков, ни плацебо. Во второй части исследования 2 пациентов будут оценивать в V2 и через 2 месяца лечения (исследование 2, V3). Будут получены следующие антропометрические показатели, биохимические и ультразвуковые исследования и анкеты:

1. Антропометрические измерения:

   • высота (V0, V1, V2, V3);
   • масса (V0, V1, V2, V3);
   • индекс массы тела (ИМТ; кг/м2) (V0, V1, V2, V3);
   • окружности талии и бедер (V0, V1, V2, V3) для расчета следующих соотношений: талия/бедра, талия/рост;
   • Стадия Таннера (V0, V1, V2, V3);
   • кровяное давление и частота сердечных сокращений (V0, V1, V2, V3). Биохимические оценки (после 12-часового ночного голодания): общий анализ крови с формулой, сывороточный инсулиноподобный фактор роста 1 (IGF1, нг/мл), 25-гидрокси (ОН) витамин D (нг/мл), мочевая кислота (мг/мл). дл), щелочная фосфатаза (ЕД/л), АКТГ (пг/мл), кортизол (мкг/дл), ТТГ (мкг/мл), свТ4 (нг/дл) (V0, V1, V2, V3); аспартатаминотрансфераза (АСТ, МЕ/л), аланинаминотрансфераза (АЛТ, МЕ/л); Отношение АСТ к АЛТ будет рассчитываться как отношение АСТ (МЕ/л) и АЛТ (МЕ/л) (V0, V1, V2, V3); концентрация креатинина в сыворотке (мг/дл) будет измеряться ферментативным методом; в соответствии с рекомендациями NKF-K/DOQI по ХБП у детей и подростков рСКФ будет рассчитываться по обновленной формуле Шварца: рСКФ (мл/мин/1,73 м2) = [0,413 x рост пациента (см)] / креатинин сыворотки (мг/дл) (V0, V1, V2, V3); глюкоза (мг/дл), инсулин (мкМЕ/мл); резистентность к инсулину (IR) будет рассчитываться с использованием формулы оценки модели гомеостаза (HOMA)-IR: (инсулин [мЕд/л] x глюкоза [ммоль/л) / 22,5) (V0, V1, V2, V3); липидный профиль: общий холестерин (мг/дл), липопротеины высокой плотности (ЛПВП)-холестерин (мг/дл), триглицериды (мг/дл); Липопротеины низкой плотности (ЛПНП)-холестерин будут рассчитываться по формуле Фридвальда, а не-ЛПВП (нЛПВП)-холестерин также будет рассчитываться (V0, V1, V2, V3); оральный тест на толерантность к глюкозе (ОГТТ: 1,75 г раствора глюкозы на кг, максимум 75 г) и образцы для определения глюкозы и инсулина будут собираться каждые 30 мин. Площадь под кривой (AUC) для параметров после ОГТТ будет рассчитываться по правилу трапеций. Чувствительность к инсулину натощак и во время ПГТТ будет рассчитываться по формуле Количественного контрольного индекса чувствительности к инсулину (QUICKI) и индекса Мацуда (ISI). Стимул к секреции инсулина в приросте глюкозы плазмы как инсулиногенный индекс будет рассчитываться как отношение изменений концентрации инсулина и глюкозы от 0 до 30 мин (InsI). Компенсаторная способность бета-клеток будет оцениваться по индексу диспозиции, определяемому как произведение ISI и InsI (DI) (V0, V1, V2, V3); сбор в покое образца первой утренней мочи. физико-химический анализ мочи; альбумин мочи (мг/л) будет определяться усовершенствованным иммунотурбидиметрическим анализом, а креатинин мочи (мг/дл) будет измеряться ферментативным методом. Отношение альбумина мочи к креатинину (u-ACR - мг/г) будет рассчитываться по следующей формуле: [альбумин мочи (мг/дл) / креатинин мочи (мг/дл)] x 1000. Для этих расчетов и альбумин, и креатинин будут в одних и тех же единицах. У субъектов, чья моча будет признана положительной, будут взяты еще два образца, и будет считаться их средним значением u-ACR (V0, V1, V2, V3). Образец кала будет взят для микробного подсчета (V0, V1, V2, V3). ЛПС (V0, V1, V2, V3). LPS будет измеряться с помощью коммерческих наборов (анализ лизата амебоцитов Limulus) по стандартным процедурам. Будут оцениваться цитокины IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFα (V0, V1, V2, V3) (набор ELISA).
2. В течение 2 месяцев лечения будет вестись дневник здоровья: каждый пациент будет заполнять дневник побочными эффектами или лечением антибиотиками и т.д.
3. NGS (секвенирование следующего поколения) будет проанализировано для анализа кала (V0, V1, V2, V3).
4. Метаболический анализ будет взят с масс-спектрометрией образцов кала (V0, V1, V2, V3).
5. Анализ SCFA образцов фекалий (V0, V1, V2, V3).

Результаты (см. Показатели результатов). Поиск информации: форма отчета о болезни (CRF) будет заполнена для каждого субъекта, включенного в исследование. Исходными документами будет больничная или врачебная карта.

Статистический размер выборки: выборка из 16 человек была оценена как достаточная, чтобы продемонстрировать разницу в 10 мг/дл в базовой концентрации глюкозы с мощностью 90 %, уровнем значимости 95 % и коэффициентом отсева 10 %. на 8-й неделе лечения. Выборка из 34 человек в каждой группе была оценена как достаточная, чтобы продемонстрировать разницу в 1,4 балла в индексе HOMA-IR с мощностью 90% и уровнем значимости 95% и коэффициентом отсева 10%. 8-я неделя лечения. Статистическая значимость будет принята при P<0,05. Статистический анализ будет выполняться с помощью SPSS для Windows версии 17.0 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США).

Характеристика организации: Исследование будет проводиться в детской эндокринной службе отделения педиатрии.

Все образцы крови будут измерены и оценены с использованием стандартизированных методов в Химической лаборатории больницы в больнице Маджоре делла Карита в Новаре, как описано ранее. Анализ кала будет проводиться в Департаменте наук и технологий Болонского университета в Болонье.

Надлежащая клиническая практика: Протокол будет проводиться в соответствии с Хельсинкской декларацией. Информированное согласие будет получено от всех родителей до оценки после тщательных объяснений каждому пациенту.