BIFI-OBESE: Kliininen tutkimus lasten liikalihavuudesta (BIFI-OBESE)

Tutkimuksen suunnittelu: Yhden keskuksen pilotti avoin satunnaistettu kontrollikoe. Väestö: Tutkimukseen osallistuu yhteensä 100 henkilöä molemmista sukupuolista, 6-18-vuotiaita, lihavia, IOTF-kriteerien mukaan ja sisäelinten rasvaisuutta, vyötärön ympärysmitta ≥ 90. persentiili, murrosikä ≥ 2 Tannerin mukaan vaihe, HOMA-IR > 2,5 tai insuliini > 15 µU/ml, laihduttamaton tai laihtumaton (määritelty -1 kg/m2 BMI 1 vuodessa).

Sisällyttämis-/poissulkemiskriteerit (katso kelpoisuusehdot). Interventio: Tutkimuksen ensimmäisessä osassa (tutkimus 1, V0-V1) potilaat satunnaistetaan avoimessa tutkimuksessa kahteen ryhmään, jotka ovat homogeenisia koehenkilöiden lukumäärän ja sukupuolen suhteen. Yksi ryhmä saa lisäravinteena probioottia, joka sisältää Bifidobacterium breve B632:ta ja Bifidobacterium breve BR03:a, 15 gtt/die (3 x 108 CFU/kuolema) ja yksi ryhmä saa lumelääkettä yhteensä 2 kuukauden hoidon ajan. Molemmat ryhmät saavat normaalin ruokavalion rutiinihoidon ja käytännön mukaisesti. Potilaille, jotka haluavat jatkaa tutkimusta, suoritetaan ylikuormitustutkimus (tutkimus 2, V2-V3) kuukauden huuhtoutumisen jälkeen.

Ruokavaliorajoitus: Vakioruokavalio sisältää 55-60 % hiilihydraatteja (45-50 % monimutkaisia ​​ja enintään 10 % puhdistettuja ja prosessoituja sokereita), 25-30 % lipidejä ja 15 % proteiineja, ja se suoritetaan Isokalorisen tasapainoisen ruokavalion kalorit on laskettu kaikkialla Italian LARN-ohjeissa ikään ja sukupuoleen.

Fyysinen aktiivisuus: kaikki oppiaineet saavat yleisiä suosituksia liikunnan suorittamisesta. Harjoitusta tehdään päivittäin ja se koostuu 30 minuutin aerobisesta liikunnasta.

Satunnaistaminen: Osallistujat jaetaan satunnaisesti 1:1 probioottiinterventioryhmään tai lumelääkeryhmään.

Ajoitus: Potilaat arvioidaan ensin ilmoittautumishetkellä (V0) ja biokemialliset arvioinnit suoritetaan tutkimuksen ensimmäisen osan lopussa (tutkimus 1, V1). Seuraavaksi on yksi kuukausi huuhtoutumisaikaa, jolloin potilaat eivät käytä probioottia tai lumelääkettä. Tutkimuksen 2 toisessa osassa potilaat arvioidaan vaiheessa V2 ja 2 kuukauden hoidon jälkeen (tutkimus 2, V3). Seuraavat antropometriset mittaukset, biokemialliset ja ultraääniarvioinnit sekä kyselylomakkeet hankitaan:

1. Antropometriset mitat:

   • korkeus (V0, V1, V2, V3);
   • paino (V0, V1, V2, V3);
   • painoindeksi (BMI; Kg/m2) (V0, V1, V2, V3);
   • vyötärön ja lantion ympärysmitat (V0, V1, V2, V3) seuraavien suhteiden laskemiseksi: vyötärö/lantio, vyötärö/pituus;
   • Tanner-aste (V0, V1, V2, V3);
   • verenpaine ja syke (V0, V1, V2, V3). Biokemialliset arvioinnit (12 tunnin yön paaston jälkeen): CBC kaavan kanssa, seerumin insuliinin kaltainen kasvutekijä 1 (IGF1, ng/mL), 25-hydroksi (OH) D-vitamiini (ng/ml), virtsahappo (mg/ml) dL), alkalinen fosfataasi (U/L), ACTH (pg/ml), kortisoli (mikro/dl), TSH (uuI/ml), fT4 (ng/dl) (V0, V1, V2, V3); aspartaattiaminotransferaasi (AST, IU/L), alaniiniaminotransferaasi (ALT, IU/L); AST-ALT-suhde lasketaan AST:n (IU/L) ja ALT:n (IU/L) (V0, V1, V2, V3) suhteena; seerumin kreatiniinipitoisuus (mg/dl) mitataan entsymaattisella menetelmällä; NKF-K/DOQI-ohjeiden mukaan lasten ja nuorten kroonista munuaistautia varten eGFR lasketaan käyttämällä päivitettyä Schwartzin kaavaa: eGFR (mL/min/1,73) m2) = [0,413 x potilaan pituus (cm)] / seerumin kreatiniini (mg/dl) (V0, V1, V2, V3); glukoosi (mg/dl), insuliini (μUI/ml); insuliiniresistenssi (IR) lasketaan käyttämällä kaavaa Homeostasis Model Assessment (HOMA)-IR: (insuliini [mU/L] x glukoosi [mmol/l) / 22,5) (V0, V1, V2, V3); lipidiprofiili: kokonaiskolesteroli (mg/dl), korkeatiheyksinen lipoproteiini (HDL)-kolesteroli (mg/dl), triglyseridit (mg/dl); Matalatiheyksinen lipoproteiini (LDL)-kolesteroli lasketaan Friedwaldin kaavalla ja ei-HDL (nHDL)-kolesteroli lasketaan myös (V0, V1, V2, V3); suun kautta otettava glukoositoleranssitesti (OGTT: 1,75 g glukoosiliuosta/kg, enintään 75 g) ja näytteet kerätään glukoosin ja insuliinin määritystä varten 30 minuutin välein. Käyrän alla oleva pinta-ala (AUC) parametreille OGTT:n jälkeen lasketaan puolisuunnikkaan säännön mukaisesti. Insuliiniherkkyys paaston aikana ja OGTT:n aikana lasketaan kvantitatiivisen insuliiniherkkyyden tarkistusindeksin (QUICKI) ja Matsuda-indeksin (ISI) kaavana. Insuliinin erityksen ärsyke plasman glukoosin lisäyksessä insulinogeenisenä indeksinä lasketaan insuliinin ja glukoosipitoisuuden muutosten suhteena 0 - 30 min (InsI). Βeta-solujen kompensointikykyä arvioidaan sijoitusindeksillä, joka määritellään ISI:n ja InsI:n (DI) tulona (V0, V1, V2, V3); ensimmäisen aamun virtsanäyte levossa. Fysikaalinen ja kemiallinen virtsan analyysi; virtsan albumiini (mg/l) määritetään edistyneellä immunoturbidimetrisellä määrityksellä ja virtsan kreatiniini (mg/dl) mitataan entsymaattisella menetelmällä. Virtsan albumiinin suhde kreatiniiniin (u-ACR - mg/g) lasketaan seuraavalla kaavalla: [virtsan albumiini (mg/dl) / virtsan kreatiniini (mg/dl)] x 1000. Näissä laskelmissa sekä albumiini että kreatiniini ovat samassa yksikössä. Koehenkilöiltä, ​​joiden virtsa on positiivinen, otetaan vielä kaksi näytettä, ja niitä pidetään näiden u-ACR-keskiarvoina (V0, V1, V2, V3). Ulostenäyte otetaan mikrobimäärää varten (V0, V1, V2, V3). LPS (V0, V1, V2, V3). LPS mitataan kaupallisilla kitteillä (Limulus amoebocyte lysate assay) standardimenetelmillä. Sitokiinit IL1, IL1β, IL6, IL10, TNFa arvioidaan (V0, V1, V2, V3) (ELISA-pakkaus).
2. Terveyspäiväkirjaa pidetään 2 kuukauden hoidon aikana: jokainen potilas täydentää päiväkirjaa sivuvaikutuksista tai antibioottihoidosta jne.
3. NGS (Next Generation Sequencing) analysoidaan ulosteanalyysiä varten (V0, V1, V2, V3)
4. Metabolominen analyysi otetaan massaspektrometrialla ulostenäytteistä (V0, V1, V2, V3)
5. SCFA-analyysi ulostenäytteistä (V0, V1, V2, V3).

Tulokset (katso Tulostoimenpiteet). Tiedonhaku: Tapausraporttilomake (CRF) täytetään jokaisesta tutkimukseen osallistuvasta aiheesta. Lähdeasiakirjat ovat sairaalan tai lääkärin kortti.

Tilastollinen näytteen koko: 16 yksilön otoksen on arvioitu riittävän osoittamaan 10 mg/dl eron perusglukoosipitoisuudessa 90 % teholla ja 95 %:n merkitsevyystasolla ja 10 %:n keskeyttämisasteella. 8. hoitoviikon aikana. Jokaisessa ryhmässä olevan 34 henkilön otoksen on arvioitu riittävän osoittamaan 1,4 pisteen eroa HOMA-IR-indeksissä 90 %:n teholla ja 95 %:n merkitsevyystasolla ja 10 %:n keskeyttämisasteella. 8. hoitoviikkoa. Tilastollisen merkitsevyyden oletetaan olevan P < 0,05. Tilastollinen analyysi suoritetaan SPSS for Windows -versiolla 17.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Organisaation ominaisuudet: Tutkimus suoritetaan Pediatric Endokrine Service of Division of Pediatrics -osastolla.

Kaikki verinäytteet mitataan standardoiduilla menetelmillä sairaalan kemian laboratoriossa, Maggiore della Carità -sairaalassa, Novarassa, aiemmin kuvattu. Ulosteanalyysi mitataan Bolognan yliopiston tieteiden ja teknologioiden osastolla Bolognassa.

Hyvä kliininen käytäntö: Protokolla suoritetaan Helsingin julistuksen mukaisesti. Tietoinen suostumus hankitaan kaikilta vanhemmilta ennen arviointeja kullekin potilaalle perustellun selvityksen jälkeen.