受胎能の保存方法: in vitro 成熟卵母細胞に対するガラス化の影響 (OVOMIV)
過去数十年の間に、女性とティーンエイジャーのがん治療は改善されました。 したがって、より高い生存率が記載されています。 しかし、がん治療は生殖機能を変化させ、成人期までの生殖能力の窓を大幅に短縮する可能性があります。 したがって、可能であれば、卵母細胞のガラス化による受精率の保存に進むことをお勧めします。 ガラス化は、新鮮な卵母細胞の使用と比較して、生殖補助技術によって高い生存率と同様の結果を可能にする凍結技術です。 自動ガラス化の革新的な方法が最近開発されました。 通常のプロトコルは、成熟した卵母細胞をガラス化することから成ります。 ただし、この戦略は、ホルモン感受性がんや卵巣刺激が不可能な場合には使用できません。 これらの状況では、未熟な卵母細胞を収集できます。 また、生殖補助医療を利用するための体外成熟工程の実現も必要である。
文献の最近のデータによると、卵母細胞のガラス化を体外成熟 (IVM) の前または後に行う必要があるかどうかは不明のままです。 したがって、この研究の目的は、IVMの前後にガラス化が行われた場合の卵母細胞の構造と機能への影響を研究することです。 ガラス化は、革新的な方法である半自動法によって行われます。
調査の概要
詳細な説明
この研究を行うために、研究者は 3 つのグループを比較します。 グループ 1: IVM の前にガラス化された未成熟卵母細胞。グループ 2: IVM 後にガラス化された未成熟卵母細胞。グループ 3: IVM によって処理された新鮮な未熟卵母細胞 (ガラス化なし、コントロール グループ)。
未成熟卵母細胞は ICSI 患者から提供されます。 通常、これらの卵母細胞 (胚胞) は注射に使用できないため、通常は破壊されます。 女性は、インフォームドおよび書面による同意を与える。 包含基準は、排卵障害のない37歳未満の女性です。
ガラス化は、半自動法（Gavi、Merck）で行われます。 速度論的および成熟率は時間経過によって分析されます（Primovision、Vitrolife） 成熟卵母細胞では、アクチンおよびチューブリン細胞骨格、紡錘体組織、および皮質顆粒が免疫蛍光および3D共焦点顕微鏡によって研究されます。 母体因子転写の発現は、RT-PCRによって分析されます。 倍数性は、multiFISH および/または CGH アレイによって分析されます。
研究の種類
入学 (予想される)
連絡先と場所
研究場所
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Clermont-Ferrand、フランス、63003
- CHU Clermont-Ferrand
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参加基準
適格基準
就学可能な年齢
健康ボランティアの受け入れ
受講資格のある性別
サンプリング方法
調査対象母集団
説明
包含基準:
- ICSI治療
- 未成熟卵母細胞
- 排卵の病状なし
除外基準:
- 多核卵巣症候群
- 子宮内膜症
- 排卵障害
研究計画
研究はどのように設計されていますか？
デザインの詳細
コホートと介入
グループ/コホート |
介入・治療 |
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体外成熟前にガラス化された未熟卵母細胞
未熟な卵母細胞は、半自動法によるクローズドシステムのガラス化を使用してガラス化されます。
加温後、36時間熟成培養を行います
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Gavi、Merck ® は、閉鎖システムによる半自動ガラス化を可能にします。
グループ 1: IVM の前にガラス化された未成熟卵母細胞。グループ 2: IVM 後にガラス化された未成熟卵母細胞。グループ 3: IVM によって処理された新鮮な未熟卵母細胞 (ガラス化なし、コントロール グループ)。
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体外成熟後にガラス化した未熟卵母細胞
未成熟卵母細胞の成熟培養は、インビトロで36時間行われます。
IVM の後、成熟した卵母細胞は、半自動法によりクローズド システムでガラス化されます。
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Gavi、Merck ® は、閉鎖システムによる半自動ガラス化を可能にします。
グループ 1: IVM の前にガラス化された未成熟卵母細胞。グループ 2: IVM 後にガラス化された未成熟卵母細胞。グループ 3: IVM によって処理された新鮮な未熟卵母細胞 (ガラス化なし、コントロール グループ)。
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新鮮な卵母細胞
未成熟卵母細胞の培養は 36 時間行います。
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この研究は何を測定していますか？
主要な結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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胚発生動態
時間枠：ICSI の 6 日後から試験完了まで
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Time Lapse Primovision で得られた記録から、研究者は体外成熟後の胚発生の正確な時間を決定することができます。
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ICSI の 6 日後から試験完了まで
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二次結果の測定
結果測定 |
メジャーの説明 |
時間枠 |
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成熟卵母細胞におけるアクチンおよびチューブリン細胞骨格と紡錘体組織の分析 (中期 II)
時間枠：2019/01/01 - 2019/12/31
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中期 II 段階の卵母細胞は、アクチン、チューブリン、および染色体を染色するための免疫蛍光実験に使用されます。
卵母細胞は、共焦点顕微鏡を使用して画像化され、高解像度の画像化と定量的な画像解析を実行します。
第 2 減数分裂紡錘体の長さ、位置、向きが分析されます。
アクチンネットワークと染色体を定量的に分析します。
すべての測定値は、対照群として使用される新鮮な成熟 (中期 II) 卵母細胞と比較されます。
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2019/01/01 - 2019/12/31
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第一減数分裂における染色体分離の解析
時間枠：2019/01/01 - 2019/12/31
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マルチ蛍光 in situ ハイブリダイゼーションおよび/または CGH アレイを実行して、ガラス化後の染色体分離を測定します。
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2019/01/01 - 2019/12/31
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成熟 (中期 II) 卵母細胞における皮質顆粒分布の分析。
時間枠：2019/01/01 - 2019/12/31
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レクチンによる染色は、成熟した卵母細胞の皮質顆粒をマークして、プロトコルが空間分布に影響を与えるかどうかを観察するために使用されます。
この染色を分析するために、研究者は定量的画像解析法を使用します。
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2019/01/01 - 2019/12/31
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母体因子の安定性の分析。
時間枠：2019/01/01 - 2019/12/31
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タンパク質および転写産物として卵形成中に卵母細胞の細胞質に保存される母性因子は、初期の胚発生に不可欠です。
治験責任医師は、リアルタイム PCR と組み合わせた逆転写を実行して、ヒト卵母細胞データベースから選択された候補遺伝子の転写量を定量化します。
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2019/01/01 - 2019/12/31
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協力者と研究者
研究記録日
主要日程の研究
研究開始 (予期された)
一次修了 (予期された)
研究の完了 (予期された)
試験登録日
最初に提出
QC基準を満たした最初の提出物
最初の投稿 (実際)
学習記録の更新
投稿された最後の更新 (実際)
QC基準を満たした最後の更新が送信されました
最終確認日
詳しくは
本研究に関する用語
キーワード
その他の研究ID番号
- CHU-393
医薬品およびデバイス情報、研究文書
米国FDA規制医薬品の研究
米国FDA規制機器製品の研究
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